Plazma a-Szünuklein Aggregáció Vetőmag Tevékenység, mint Új Biomarker a Neurodegeneratív Betegségekre

A szinuklein betegség, más néven szinukleinopátiák, egy általános kifejezés a degeneratív betegségek egy osztályára. Főként a Parkinson-kórt (PD), a Lewy-testeces demenciát (DLB), a többrendszersorvadást (MSA) és másokat foglalja magában. A betegség jellemzője az alfa-szinuklein (α-syn) abnormális hajtogatódása a perifériás és központi idegrendszerben, ami Lewy-testek, Lewy-neuritok, neuronok és glia sejtekben glia citoplazmatikus inklúziótestek képződéséhez vezet. Az α-syn intracelluláris elhelyezkedése és felhalmozódási mintázata különböző a szinuklein betegségekben. Átfedő állapotok vannak a szinuklein betegségek között, ami a szinuklein betegségek klinikai diagnózisának pontosságát is nagyon alacsonyra teszi. Végső diagnózist csak a beteg halála után lehet megállapítani, és agymintákat immunhisztokémiai festéssel értékelnek. Ezért a szinuklein betegség előzetes beavatkozása és megmentése érdekében pontosabb és kevésbé invazív diagnosztikai módszerek fejlesztése szükséges.

A valós idejű remegés által indukált konverzió (RT-QuIC) egy módszer a kórokozó fehérjemagvak in vitro amplifikálására, amely lehetővé teszi, hogy a magvak in vitro amplifikációs képességgel rendelkező fehérjék transzformálják a szubsztrátokat hibásan hajtogatott magokká meghatározott körülmények között. Az RT-QuIC eredetileg a prionfehérje-betegek diagnosztizálására használták. A technika azonosítani tudja a hibásan hajtogatott formában lévő prionfehérjét a Creutzfeldt-Jakob betegségben szenvedő betegek cerebrospinális folyadékában 100%-os specifikussággal és 95-98%-os érzékenységgel, így beépítették a sporadikus Creutzfeldt-Jakob betegség klinikai diagnosztikai kritériumai közé. Tanulmányok kimutatták, hogy a betegek cerebrospinális folyadékából vagy más biológiai folyadékokból vagy szövetekből kinyert kórokozó magokat rekombináns fehérje szubsztrátokkal inkubálva, és időszakos rázással elősegítve a mag és a szubsztrát kölcsönhatását, kényszeríthető a szubsztrát kórokozó fehérjemagokká alakulására. Az RT-QuIC reakciófolyamatot a gépben lévő detektor valós időben figyeli a tioflavinra, egy fluoreszcens festékre, amely fluoreszkál, amikor a béta lemezes réteghez kötődik, ami szintén jellemző az amiloid fibrillumokra. Tanulmányok kimutatták, hogy a betegek cerebrospinális folyadékának tesztelése RT-QuIC-vel pontosan megkülönböztetheti a Lewy-testeces demenciát a nem-Parkinson demenciától. Ebben a tanulmányban az RT-QuIC technikát használták a klinikai mintákban lévő hibásan hajtogatott α-syn amplifikálására, hogy feltárják a fehérje jellemzők különbségeit a szinuklein betegségek között, és megpróbálják ezzel a módszerrel diagnosztizálni a szinuklein betegségeket. Először szinukleinfehérje betegség klinikai eseteit vonták be, és 100 kontroll alany, 221 PD beteg és 127 MSA beteg, 10 PSP beteg plazmáját állították össze. Az RT-QuIC technológiával aSyn-t (amelyet laboratóriumunkban sikeresen előállítottunk) használtuk az egészséges alanyok és a szinukleinopátiás betegek plazmájának amplifikálására. Megállapították, hogy a maximális fluoreszcencia intenzitás (szélsőérték), csúcsideje, K/2 (a szélsőérték/2 meredeksége) és Tmax/2 (a szélsőérték/2 elérésének ideje) használható diagnosztikai és differenciáldiagnosztikai mutatókként a szinukleinopátiák esetében.