Teli per incisione impregnati di iodio e ricolonizzazione batterica nella chirurgia simulata del ginocchio. Uno studio sperimentale randomizzato controllato.

Sfondo

L'infezione del sito chirurgico (SSI) è una grave complicanza della chirurgia ortopedica, con conseguente reintervento e recupero prolungato (1, 2)

Per prevenire le SSI, sono stati introdotti metodi profilattici come parte della procedura in molti tipi di interventi chirurgici. È stato dimostrato che strategie profilattiche come la disinfezione preoperatoria con clorexidina o soluzioni di iodio con alcool riducono il numero di batteri della pelle prima dell'incisione chirurgica o dell'inserimento di un catetere endovenoso. (3-7). La creazione di un ambiente completamente asettico per la durata dell'intervento è tuttavia impossibile, a causa dell'incapacità della disinfezione preoperatoria di sterilizzare completamente la pelle, unita alla ricolonizzazione della flora endogena del paziente dai follicoli piliferi, dalle ghiandole sebacee e dalle ghiandole sudoripare.(6) (8, 9)

L'utilizzo di teli plastici autoadesivi è stato introdotto per prevenire la contaminazione del sito chirurgico dovuta alla ricolonizzazione della flora cutanea, bloccando la traslocazione dei batteri dalla cute adiacente al sito chirurgico nella ferita chirurgica. I teli da incisione in plastica autoadesivi sono in questo modo progettati per fungere da barriera, contenendo la flora cutanea durante l'intervento chirurgico.

Questi tipi di teli sono tuttavia risultati inferiori nella prevenzione delle SSI batteriche, rispetto ai nuovi tipi di teli che incorporano un complesso antisettico di iodio nell'adesivo del telo, rivolto verso la pelle (10, 11). Questo risultato potrebbe essere spiegato da un telo- "effetto serra" indotto supportato dall'evidenza di un aumento del tasso di colonizzazione batterica con l'uso intraoperatorio di teli di plastica autoadesivi non iodati (12, 13). Questo effetto può essere il risultato di una relativa occlusione della pelle che porta ad un aumento dell'idratazione della pelle.(14) Questo aumento della crescita batterica non è mai stato dimostrato nei teli per incisione autoadesivi impregnati di iodio (IIAD) ed è stato contraddetto in studi che riportano una riduzione del tasso di ricolonizzazione dei batteri della pelle sull'addome quando l'IIAD è stato confrontato con nessun drappeggio e non teli di iodio mentre altri autori hanno riportato una diminuzione della contaminazione della ferita chirurgica quando l'IIAD è stato utilizzato preoperatoriamente nella chirurgia addominale (3, 15)

Indipendentemente dalla superiorità dell'IIAD rispetto ai teli non iodati, è stato recentemente concluso da una meta-analisi che l'uso dell'IIAD non riduce l'incidenza di SSI rispetto all'assenza di teli (10). Questa conclusione è stata criticata per essere dovuta all'errore di tipo 2 derivante dal tasso relativamente basso di SSI nella chirurgia pulita (16). La revisione, tuttavia, contiene dati minimi sull'uso dell'IIAD nella chirurgia ortopedica. La trasferibilità delle sue conclusioni a un ambiente ortopedico è quindi discutibile.

La flora cutanea, prevalentemente stafilococchi, è il corso primario di SSI in chirurgia ortopedica (17, 18) ed è stato anche dimostrato che costituisce la maggior parte delle specie ricolonizzanti sulla pelle (8, 19).

L'IIAD è quindi diventato parte della procedura preoperatoria standard in molti contesti chirurgici ortopedici negli ospedali della Danimarca meridionale, tra cui l'Odense University Hospital e lo Svendborg Hospital. Questa decisione può essere giustificata da studi in vitro che concludono un marcato effetto battericida dell'IIAD su un'ampia gamma di specie batteriche, in particolare stafilococchi. (16) L'effetto battericida dell'IIAD è stato valutato anche in vivo nella chirurgia dell'anca, dove l'effetto battericida e la significativa riduzione della contaminazione della ferita sono stati riportati quando l'IIAD è stato applicato 24 ore prima del prelievo cutaneo (20). L'effetto battericida non è stato tuttavia valutato quando l'IIAD viene applicato all'inizio dell'intervento chirurgico prima dell'incisione, come avviene normalmente nella chirurgia ortopedica.

È stato dimostrato che la ricolonizzazione dei batteri cutanei dopo la disinfezione avviene completamente o parzialmente entro 7 giorni quando la pelle viene disinfettata con una soluzione di clorexidina o iodio e coperta con una medicazione in poliuretano, non contenente antimicrobici.(21-24) La ricolonizzazione può tuttavia essere già rilevabile entro poche ore dalla disinfezione. Tuttavia, ciò non è stato associato a un aumento significativo dei tassi di SSI.(3, 13) Vale la pena notare che alcune prove suggeriscono che le soluzioni di preparazione della pelle contenenti clorexidina possono risiedere sulla pelle e fornire un'azione antisettica residua da sole. (25-27)

L'IIAD non ha dimostrato di migliorare l'incidenza di SSI nella chirurgia non ortopedica e alcune evidenze retrospettive suggeriscono risultati simili nella chirurgia dell'anca (28). È quindi di grande importanza gettare ulteriore luce sull'effetto dell'IIAD in ambito chirurgico ortopedico.

Motivazione

I teli di plastica autoadesivi impregnati di iodio sono stati utilizzati per anni in molti tipi di chirurgia. Nonostante ciò, non è stato dimostrato che il suo uso riduca l'incidenza di SSI.

Le SSI che provocano infezioni intraarticolari da batteri della pelle sono una ben nota e grave complicanza della chirurgia ortopedica. La valutazione di misure profilattiche come l'IIAD è quindi disperatamente necessaria. Nonostante ciò, la chirurgia ortopedica è poco rappresentata nella letteratura attuale in materia.

È l'obiettivo del nostro studio di aggiungere alla conoscenza sull'effetto dell'uso di IIAD sulla crescita batterica dermica in un contesto chirurgico ortopedico.

Obiettivi

L'obiettivo di questo studio è valutare gli effetti dell'applicazione intraoperatoria di teli autoadesivi impregnati di iodio sulla quantità batterica (unità formanti colonie) della pelle in pazienti in attesa di intervento chirurgico di sostituzione totale del ginocchio (TKA). Desideriamo indagare se il drappo intraoperatorio con un IIAD aumenta la ricolonizzazione con microbi cutanei rispetto all'assenza di drappo durante la chirurgia TKA simulata. L'esito primario è la quantità microbica, mentre l'esito secondario è l'identificazione di organismi vitali sulla pelle. L'ipotesi è che l'IIAD aumenti la ricolonizzazione dei microbi cutanei rispetto all'assenza di telo.

Metodo

Progettazione dello studio

Lo studio è concepito come uno studio sperimentale controllato randomizzato eseguito in un contesto parallelo. I pazienti fungeranno da controllo proprio e il rapporto di assegnazione è quindi uguale.

Partecipanti

I pazienti vengono reclutati in modo prospettico attraverso la clinica ambulatoriale per l'osteoartrosi del ginocchio, Odense University Hospital. Il medico curante seleziona i pazienti per la partecipazione.

I pazienti sono idonei per l'inclusione se sono programmati per un intervento chirurgico di sostituzione totale del ginocchio tramite l'Odense University Hospital. Di seguito sono elencati i motivi di esclusione.

Misura di prova

Una differenza nella quantità batterica di un fattore 10 (1,0 log10) tra il gruppo di intervento e quello di controllo è giudicata clinicamente significativa nello sviluppo di SSI. Per rilevare una differenza di 1,0 log nella quantità batterica con un livello di potenza dell'80%, un livello di significatività del 5% e una deviazione standard di 1,0 log10, è richiesta una dimensione del campione di 16 ginocchia in ciascun gruppo, che richiede l'inclusione di 16 pazienti. Per reclutare questo numero di pazienti è previsto un periodo di inclusione di 6 mesi.

Randomizzazione

L'assegnazione del ginocchio al gruppo drappeggiato vs. non drappeggiato sarà randomizzata. La randomizzazione garantisce che la differenza nella flora batterica tra le ginocchia dei pazienti abbia un effetto minimo sull'esito. Il potenziale bias di allocazione è ridotto al minimo.

In questo studio l'assegnazione sarà assegnata utilizzando buste contenenti fogli di carta numerati. La qualità delle buste viene valutata per garantire che l'assegnazione non possa essere determinata senza aprire le buste. Verranno predisposte 30 buste, determinandone l'assegnazione. Un soggetto esterno preparerà le buste.

I numeri pari assegnano il partecipante al drappeggio del ginocchio destro, mentre i numeri dispari assegnano al drappeggio del lato sinistro. Le buste conterranno quantità pari di numeri pari e dispari.

Non sospettiamo che la conoscenza dell'allocazione del ginocchio sia importante per l'esito dello studio. Non si ritiene pertanto necessario accecare partecipanti o ricercatori dall'intervento.

Intervento

La procedura si svolgerà nella sezione chirurgica del reparto ortopedico dell'ospedale universitario di Odense. I pazienti vengono accolti e invitati a cambiarsi con l'abbigliamento locale del paziente.

I pazienti sono posizionati supini in una sala operatoria standard, con flusso laminare attivo e lampade chirurgiche . Verrà installato un telo operatorio a livello della vita del paziente per garantire una contaminazione minima da parte della respirazione del paziente. Entrambe le ginocchia vengono disinfettate utilizzando una soluzione colorata di curcumina di clorexidina allo 0,5% in etanolo al 96% applicata in un movimento pittorico in 2 sessioni di 10 secondi separate da un periodo di asciugatura di 30 secondi. L'area disinfettata viene quindi lasciata asciugare completamente. La disinfezione è seguita dalla copertura standard delle aree adiacenti al sito chirurgico mediante teli chirurgici. Un ginocchio viene successivamente drappeggiato con un telo adesivo plastico allo iodio (Ioban 2), mentre l'altro ginocchio viene lasciato scoperto. L'applicazione del telo viene eseguita secondo le linee guida 3M.(11) Se il partecipante ha i capelli lunghi sulle gambe, questi vengono tagliati con forbici elettriche prima dell'intervento. Al paziente viene quindi chiesto di rimanere supino sul tavolo operatorio per 75 minuti. Dopo la disinfezione e il successivo drappeggio di entrambe le ginocchia, il tavolo operatorio viene posizionato nella posizione della sedia a sdraio e al paziente viene offerto un cuscino per sostenere le ginocchia. Questo è posto sotto i teli chirurgici. La posizione sulla sedia a sdraio riduce al minimo il disagio di dover rimanere supini sollevando la testa del paziente e assicurando una certa flessione delle ginocchia. Al paziente è consentito muovere le gambe in modo controllato, in modo da non contaminare il ginocchio controlaterale. Entrambe le ginocchia devono essere spostate allo stesso modo per garantire lo stesso stress sulla pelle del sito di campionamento durante l'intervento. Il busto del paziente è coperto con una coperta "Bair Hugger" per prevenire l'ipotermia.

Il ricercatore e l'infermiere indosseranno retina per capelli, indumenti operativi sterili, guanti sterili e maschera facciale durante la disinfezione e l'applicazione del drappo. L'infermiera del progetto, con esperienza nell'applicazione del drappo, lo farà in conformità con la procedura ospedaliera standard.

Campionamento cutaneo

Molti metodi di campionamento cutaneo batteriologico sono stati utilizzati in studi precedenti. Poiché il risultato di questo studio è quello di confrontare la quantità batterica media, decidiamo di utilizzare una versione modificata della tecnica cup-scrub/metodo di campionamento del cilindro, che è un metodo standard per testare la preparazione preoperatoria della pelle.(21, 29, 30)

Questo metodo campiona la pelle utilizzando un cilindro che limita l'area di campionamento a una piccola area coperta dal telo. 1 ml della soluzione di campionamento viene applicato al cilindro di campionamento. Il sito del campione viene quindi strofinato con una pressione moderata in una formazione a griglia uniforme con un'ansa di inoculazione in plastica sterile per 1 minuto. Dopo lo sfregamento, la soluzione di campionamento viene raccolta in una provetta sterile utilizzando una pipetta sterile. Il processo di campionamento viene quindi ripetuto, producendo un altro campione, che viene raggruppato con il primo.

Utilizzando due scrub invece di uno, la percentuale di microrganismi rimossi dal sito di campionamento aumenta, mentre il lavaggio della superficie cutanea sembra essere una parte vitale del processo di campionamento. Anche se la maggior parte degli organismi si trova sopra o vicino alla superficie della pelle, alcuni hanno proprietà aderenti, mentre altri sono situati nelle parti più profonde dello strato corneo e dei follicoli piliferi. Questo potrebbe spiegare perché il lavaggio del sito campione senza scrubbing è inferiore al metodo scrubbing, poiché produce solo meno della metà degli organismi campionati mediante scrubbing (30). L'efficacia di questo metodo è stata valutata da altri autori ed è vista come un approccio appropriato al campionamento cutaneo quando l'obiettivo è valutare sia la flora superficiale che quella residente/"nascosta".(5, 6, 31)

Riconosciamo che il campionamento dei batteri della pelle produrrà solo una frazione della flora totale a causa della relativa inaccessibilità della flora che risiede in profondità. (6)

I campioni di pelle vengono prelevati bilateralmente dalla parte anteriore distale della coscia prima della disinfezione per valutare la normale quantità batterica. Dopo la disinfezione e la completa evaporazione di eventuali alcoli, verranno prelevati campioni di base da entrambe le ginocchia per documentare la pari quantità batterica prima del drappeggio. Dopo la durata dell'intervento (75 minuti), verranno prelevati campioni post-intervento dal ginocchio senza drappo, seguito dall'apertura del drappo Ioban sulle aree di campionamento utilizzando una forbice sterile e una pinza chirurgica. La pelle viene quindi campionata. I campioni saranno prelevati da un'area cutanea sovrarotulea, corrispondente alla cute che ricopre i bordi del tendine del muscolo quadricipite femorale e da un'area infrarotulea della cute che ricopre i bordi del legamento rotuleo. Queste aree corrispondono alla pelle che delimita la linea di incisione dell'approccio pararotuleo mediale comunemente utilizzato nella chirurgia TKA. L'area precisa per il campionamento in queste regioni viene scelta al momento del campionamento per consentire perdite minime tra la pelle e il cilindro di campionamento.

3 piastre contenenti agar sangue al 5% vengono poste su un tavolo a una distanza massima di 1 m dalle ginocchia. Tali lastre verranno scoperte e aperte all'inoculazione da parte dei microrganismi presenti nell'aria della sala operatoria all'inizio del tempo di intervento di 75 minuti successivo al drappeggio. Le placche vengono coperte al termine dell'intervento, dopo il prelievo finale del ginocchio. Un campione inutilizzato del fluido di campionamento viene piastrato in duplicato e fungerà da controllo negativo.

Lo stesso ricercatore eseguirà tutti i campionamenti, garantendo così la coerenza nella routine di campionamento. Un infermiere aiuta nel processo di campionamento. Il ginocchio di controllo verrà campionato per primo per prevenire la contaminazione pre-campionamento del ginocchio controlaterale, quando il drappo autoadesivo viene rimosso.

Il ricercatore e l'infermiere indosseranno retina per capelli, indumenti operativi sterili, guanti sterili e una maschera facciale durante il campionamento.

Soluzione campione e sistema di neutralizzazione

La pelle viene campionata utilizzando una soluzione di campionamento costituita da una soluzione tampone fosfato (PBS) contenente il 10% di polisorbato 80 (Tween 80), l'1% di lecitina, lo 0,5% di tiosolfato di sodio pentaidrato e lo 0,1% di Triton-x 100 con pH regolato a 7,9. (21, 32-35)

Il sistema di neutralizzazione deve essere convalidato in conformità allo standard E-1054-08 dell'American Society for Testing and Materials (ASTM) "Metodi di test standard per la valutazione di inattivatori di agenti antimicrobici" utilizzando Staph. epidermidis come organismo di sfida con un tempo di esposizione di 30 minuti.

Manipolazione del campione

Dopo il campionamento, i campioni raggruppati vengono immediatamente depositati in sala operatoria. Ciò garantisce una vitalità batterica ottimale in presenza di triton-x e contaminazione da riporto degli antisettici cutanei, che ha dimostrato di inibire la crescita batterica anche a concentrazioni molto ridotte (33, 36-38). Uno studio di convalida sulle proprietà del fluido di campionamento non ha mostrato alcuna inibizione della crescita dei microrganismi quando la placcatura è stata eseguita entro 30 minuti dal campionamento.

Le piastre inoculate vengono quindi trasportate al dipartimento microbiologico dell'OUH per l'incubazione dopo la fine dell'intervento.

I campioni di ginocchio saranno diluiti in serie in un tampone fosfato sterile in diluizioni dieci volte a 10-3 per i campioni pre-disinfezione e 10-1 per i campioni post-disinfezione. Aliquote di 100-200 microlitri di ciascun campione diluito e non diluito vengono quindi distribuite in duplicato su piastre di agar sangue al 5%. Tutte le piastre vengono quindi incubate in aerobiosi per 36-48 ore a 35 gradi Celsius. Le piastre inoculate con aria e le piastre di controllo negativo vengono incubate insieme ai campioni del ginocchio per 36-48 ore a 35 gradi Celsius.

I campioni saranno contrassegnati secondo il sistema di codifica descritto nella sezione di gestione dei dati di questo protocollo.

Viene quindi determinato il numero di unità formanti colonia, CFU, nei campioni. N. Milandt eseguirà il conteggio dei CFU con l'assistenza del personale del dipartimento microbiologico dell'OUH. Tutte le lastre saranno fotografate in modo da poter eseguire il successivo riconteggio, se necessario.

Strutture

Il reparto ortopedico del dipartimento di chirurgia ortopedica dell'ospedale universitario di Odense (OUH) fornirà le sale operatorie per il progetto.

Il Dipartimento di microbiologia clinica, OUH, fornisce strutture di laboratorio per l'analisi microbica.

Etica

Non prevediamo complicazioni o effetti collaterali all'intervento di questo studio. Essere posizionati in posizione supina per 75 minuti può produrre un lieve disagio e può provocare mal di schiena per alcuni pazienti. La rimozione del drappo Ioban può essere associata a disagio causato dall'aderenza ai capelli dell'estremità inferiore. L'applicazione di una soluzione disinfettante contenente curcumina può causare macchie sulla pelle che possono essere difficili da rimuovere completamente subito dopo l'intervento. Tuttavia, questo scolorimento scomparirà entro pochi giorni con la normale perdita dell'epidermide.

Le informazioni relative al progetto e al suo intervento saranno presentate ai partecipanti verbalmente e per iscritto. I pazienti saranno prima contattati verbalmente e consegnati informazioni scritte sul progetto. I pazienti che manifestano interesse a partecipare riceveranno successivamente informazioni verbali, fornite dal ricercatore principale. Se il paziente ha bisogno di ulteriori informazioni sul progetto, gli vengono fornite le informazioni di contatto dell'infermiere del progetto e del ricercatore principale.

Lo studente universitario N. Milandt ha preso l'iniziativa per il progetto in collaborazione con il professore, MD, S. Overgaard.

Nessun membro di questo gruppo di ricercatori ha legami finanziari con imprese che vendono o producono teli autoadesivi impregnati di iodio.

I partecipanti a questo studio non riceveranno alcun compenso per la loro partecipazione. Ai partecipanti verranno comunque offerti frutta, snack e una bevanda analcolica a seguito dell'intervento e avranno diritto al rimborso delle spese di trasporto per il trasporto fino a 100 km andata e ritorno in conformità alle vigenti convenzioni regionali.

Questo protocollo è stato presentato ai comitati etici scientifici regionali per la Danimarca meridionale ed è stato accettato nel giugno 2014.

Risultati

Gestione dati

Registrazione dei dati

Tutti i dati del paziente vengono registrati e salvati utilizzando Epidata. Un documento contiene tutte le informazioni sul paziente collegate a un numero di identificazione univoco (ID). Questo file chiave conterrà il numero di previdenza sociale e il nome di tutti i partecipanti insieme ad altre variabili di interesse.

I risultati dell'analisi microbiologica sono registrati in un documento separato contenente solo numeri ID. Al risultato dell'analisi verrà assegnato un codice che designa l'ID paziente nr (1,2,3...), Tempo di campionamento (Pre- (0), 10 minuti (10) o 75 minuti (75) dopo la disinfezione.). Il codice conterrà anche informazioni sulla randomizzazione della gamba ((Drape (D) / No-drape (N)) e sul sito di campionamento (Suprapatellar (S) / Infrapatellar (I)). Tutti i campioni vengono piastrati in duplicato e verrà quindi assegnato un numero aggiuntivo per identificare l'unica piastra e la fase di diluizione per la piastra. Il codice univoco viene assegnato alla targa corrispondente con etichette adesive e avrà una variabile corrispondente nel modulo di inserimento dati.

Tutti i dati verranno registrati senza alterazioni aritmetiche.

Tutte le variabili di entrata sono documentate in un codebook.

Crittografia

Tutti i dati vengono crittografati utilizzando il modulo di crittografia Epidata integrato basato sui protocolli di crittografia Advanced Encryption Standard. Il file chiave che collega i numeri ID ai numeri di previdenza sociale verrà crittografato utilizzando questo standard. Le fotografie delle lastre vengono salvate contenenti solo il codice assegnato al paziente e non possono essere associate a un individuo identificabile senza sbloccare i file di dati principali. Il file di dati di esempio non conterrà informazioni riservate sulla persona e pertanto non sarà crittografato.

Backup

Il backup di tutti i documenti e file del progetto viene eseguito settimanalmente su un server sicuro del sistema informatico dell'Odense University Hospital. N. Milandt avrà accesso esclusivo ai dati sottoposti a backup.

N. Milandt fungerà da persona di contatto e avrà la responsabilità principale per i dati del progetto. Tutti i dati saranno archiviati e pubblicati in conformità con le decisioni dell'Agenzia danese per la protezione dei dati.

Risultati e inferenza statistica

Pulizia dei dati

Per garantire risultati validi quando i dati vengono trasformati in logaritmi, il valore minimo della misurazione è impostato su 1 risultante in 0 log10 dopo la trasformazione. Di conseguenza, una media duplicata di <1 unità formanti colonia (CFU)/piastra è impostata su 0 log10. La sensibilità dell'analisi della piastra di diffusione può essere carente nel distinguere tra 0 e 1 CFU e può quindi essere appropriato unire questi valori come un valore di floor comune di log10 = 0.

Non si prevede che la densità batterica dei campioni eseguiti dopo la disinfezione superi la densità del campione prima della disinfezione. Se questo è il caso, l'osservazione è probabilmente dovuta a contaminazione ed è esclusa dall'analisi.

Risultati primari

L'esito primario di questo studio è il numero di CFU cresciute sulle piastre di agar. Questo numero comprende tutti gli organismi vitali. I dati grezzi saranno convertiti in CFU/cm2 di pelle e successivamente trasformati in log10 per consentire l'assunzione di linearità. Dai campioni infrarotuleo e sovrarotuleo verrà calcolata una media che rappresenti l'intero ginocchio.

Viene quindi confrontata la media delle CFU/cm2 sopravvissute. Il confronto verrà eseguito all'interno dello stesso ginocchio e tra le ginocchia nello stesso paziente. I campioni prelevati da un ginocchio vengono confrontati a diversi tempi di campionamento (linea di base, 10 minuti dopo la disinfezione e 75 minuti dopo l'inizio dell'intervento chirurgico simulato). L'analisi tra le ginocchia verrà eseguita tra il gruppo drappo e il gruppo senza drappo a tutti i tempi di campionamento. Infine, verrà calcolata una ricrescita batterica media come variabile che rappresenta l'aumento della densità batterica tra il campionamento eseguito prima e dopo l'uso di Ioban drappeggio. Viene quindi confrontata la ricrescita dei batteri nelle due impostazioni.

I dati vengono esaminati utilizzando un'analisi esplorativa dei dati per giustificare l'ipotesi della distribuzione gaussiana. In tal caso, l'analisi verrà eseguita utilizzando un t-test di studenti a due code.

Se i dati non approssimano la distribuzione normale, verrà utilizzato il test U di Mann-Whitney non parametrico. P ≤0,05 è interpretato come significativo. L'analisi statistica sarà eseguita utilizzando il software di analisi dei dati e statistica, STATA.

Tutti i processi analitici sono documentati in un registro di gestione dei dati e in un do-file STATA

Risultato secondario

Anche il tipo di organismo presente sulla pelle dopo la disinfezione e l'uso di teli Ioban è di interesse nella pratica clinica. Tuttavia, non rientra nell'ambito di questo studio produrre un'analisi quantitativa dettagliata della frequenza di vari organismi sulla pelle. Eseguiremo comunque un piccolo esame descrittivo della flora cutanea in seguito all'uso del drappo Ioban.

Le piastre di crescita non diluite dei campioni di 75 minuti di ogni partecipante saranno esaminate macroscopicamente per colonie uniche. Viene analizzato sia il ginocchio drappeggiato che il ginocchio non drappeggiato. Le colonie vengono quindi identificate utilizzando l'analisi del tempo di volo di desorbimento/ionizzazione laser assistita da matrice (MALDI-TOF). I risultati saranno elencati come prevalenza della crescita di organismi specifici nella popolazione dello studio.

Orario

L'inizio previsto del progetto è il 1 settembre 2014. Il progetto sarà avviato entro un periodo di raccolta dati di 9 mesi. Durante questo periodo saranno reclutati e sottoposti all'intervento di progetto un minimo di 16 pazienti. Gli ultimi 3 mesi del periodo del progetto saranno dedicati all'analisi dei dati e alla produzione di un articolo e alla preparazione di una presentazione del progetto. Il progetto terminerà il 31 agosto 2015.

Commento degli Autori:

Riconosciamo che sono state apportate revisioni a questo protocollo di sperimentazione dopo la registrazione della sperimentazione primaria. Dichiariamo che le modifiche al protocollo sono state apportate prima del reclutamento dello studio e dell'analisi dei dati. Non è stata apportata alcuna modifica ai criteri di inclusione/esclusione, né alle misure dei risultati dello studio.