Aggiunta di antiossidanti nel sistema di terreni di coltura sequenziali umani (Antioxidants)

Obiettivo dello studio:

Studio che confronta lo sviluppo di blastocisti sulla stessa coorte di ovociti utilizzando due diversi sistemi di media, media G-Series sequenziali rispetto a media G-Series sequenziali integrati con antiossidanti.

Punto finale principale:

Percentuale di blastocisti di buona qualità (GQB) per ovocita fecondato il giorno 5.

Endpoint secondari:

Sviluppo dell'embrione giorno 3, 5 e 6 Qualità dell'embrione giorno 3, 5 e 6 Formazione totale di blastocisti (giorno 5 e giorno 6) Tasso di utilizzo (embrioni disponibili per il trasferimento e la crioconservazione) Tasso di gravidanza biochimica Tasso di impianto Tasso di gravidanza clinica

Impostare:

Prospettivo fratello ovocita, studio di superiorità

MATERIALI E METODI

Intervento:

Nuovo tipo di terreno di coltura embrionale utilizzato per la coltura in vitro di embrioni umani per fecondazione in vitro.

Analisi di potenza:

La pianificazione e l'analisi della potenza sono state fatte insieme a uno statistico, Nils-Gunnar Pehrsson.

Dai dati retrospettivi che utilizzano la simulazione, la SD intra-individuale per la differenza in % GQB tra le due strategie multimediali è stata stimata al 32%. Per trovare una differenza dell'8% in GQB tra i due media con potenza dell'80% con T-test accoppiato saranno necessarie 128 coppie.

Randomizzazione:

Le coppie verranno arruolate nello studio al prelievo degli ovociti (giorno 0). Per la partecipazione è richiesto un minimo di 8 complessi cumulo-ovociti.

Verrà eseguita la randomizzazione stratificata degli ovociti per coppia. Per ogni coppia verranno numerati gli ovociti.

Questi ovociti per ogni coppia verranno quindi randomizzati a blocchi (per due) per i due tipi di media; A (sistema multimediale G-Series tradizionale = controllo) e B (sistema multimediale G-Series con antiossidante = intervento). In entrambi i gruppi verrà eseguita la cultura tradizionale. L'assegnazione sarà effettuata in rapporto 1:1 secondo una lista di randomizzazione univoca per ogni coppia.

Accecante:

Per ridurre al minimo possibili bias per l'esito primario (GQB D5) l'embriologo che esegue la valutazione morfologica il giorno 5/6 non saprà a quale gruppo appartengono gli embrioni.

Sia il medico che la coppia saranno accecati rispetto a quale gruppo è stato selezionato un embrione per il trasferimento.

Procedura di trattamento IVF:

Verrà eseguito un trattamento di fecondazione in vitro tradizionale che include la stimolazione ovarica e il prelievo di ovociti utilizzando i metodi standard presso le cliniche.

Valutazione dell'embrione il giorno 3 secondo i criteri di consenso Alpha/ESHRE e il giorno 5 secondo il punteggio di Gardner.

Punteggio morfologico Lo sviluppo e la morfologia dell'embrione il giorno 3 saranno valutati in base ai criteri di consenso Alpha/ESHRE. Lo sviluppo e la morfologia dei blastocisti saranno valutati secondo un sistema di punteggio pubblicato per i blastocisti e saranno documentati con foto individuali di ogni blastocisti. Il punteggio di embrioni e blastocisti verrà eseguito al microscopio invertito rispettivamente il giorno 3 e i giorni 5 e 6. Le blastocisti che hanno un punteggio uguale o superiore a 3BB sono considerate GQB.

DOCUMENTAZIONE Tutti i pazienti che partecipano allo studio saranno documentati su un CRF computerizzato. Questo documento conterrà dati clinici e di laboratorio rilevanti per lo specifico ciclo di fecondazione in vitro.

ANALISI STATISTICA Verranno definite sia una popolazione Intention-to-Treat (ITT) che una popolazione Per Protocol (PP). La variabile di efficacia primaria in questo studio di superiorità sarà la differenza in % GQB tra i due tipi di media per ogni coppia. L'analisi statistica primaria sarà un test T accoppiato a due code per quanto riguarda la media della differenza in % GQB tra terreni di coltura sequenziali standard e terreni antiossidanti sulla popolazione ITT. Verrà calcolato un intervallo di confidenza bilaterale al 95% per la differenza media in % GOB tra i due mezzi. Tutti i test di significatività saranno bilaterali e condotti al livello di significatività del 5%.