Modello di funghi isolati dal lavaggio broncoalveolare tra i pazienti con asma bronchiale

L’asma è una malattia eterogenea, solitamente caratterizzata da infiammazione cronica delle vie aeree e iperreattività. È definita dalla storia di sintomi respiratori, come respiro sibilante, mancanza di respiro, costrizione toracica e tosse, che variano nel tempo e in intensità, insieme a una limitazione variabile del flusso aereo espiratorio. La limitazione del flusso aereo può successivamente diventare persistente La diagnosi di asma si basa sull'identificazione di un modello caratteristico di sintomi respiratori come respiro sibilante, mancanza di respiro (dispnea), costrizione toracica o tosse, e limitazione variabile del flusso aereo espiratorio (Levy ML et al,2006 ) Nell'asma, la funzione polmonare può variare da completamente normale a gravemente ostruita nello stesso paziente. L'asma scarsamente controllato è associato a una maggiore variabilità della funzionalità polmonare rispetto all'asma ben controllato (Graham BL et al,2019). Un FEV1 ridotto può essere riscontrato in molte altre malattie polmonari (o in una tecnica spirometrica inadeguata), ma un rapporto ridotto tra FEV1 e forzato la capacità vitale (FEV1/FVC), rispetto al limite inferiore della norma, indica una limitazione del flusso aereo espiratorio. La maggior parte dei pazienti con asma può essere ben controllata con basse dosi di agenti antinfiammatori. Tuttavia, fino al 10% dei pazienti con asma si manifesta con una malattia grave, che porta ad una notevole limitazione delle attività della vita quotidiana e può essere fatale.(Moore et al.,2007).

L’asma grave rimane una sfida per pazienti e medici, poiché questi pazienti non solo sono difficili da trattare ma contribuiscono anche in modo sproporzionato ai costi complessivi dell’asma.

Le ragioni della variazione della gravità dell’asma da paziente a paziente non sono completamente comprese. È noto che diversi fattori ambientali, come gli acari della polvere domestica, la forfora degli animali domestici e i funghi ambientali (in particolare la loro esposizione continua), peggiorano il controllo dell’asma (GINA ,2023).

Le malattie fungine rappresentano una preoccupazione nella comunità medica e sanitaria pubblica a causa del crescente numero di persone con un sistema immunitario indebolito e dei progressi nelle pratiche sanitarie.

I funghi possono essere collegati all’asma grave in molti modi, tra cui (inalazione di spore fungine, sensibilizzazione fungina e aspergillosi broncopolmonare allergica (ABPA), un grave grado di sensibilizzazione fungina che culmina in un danno broncopolmonare irreversibile. Le infezioni fungine sono difficili da diagnosticare a causa dei sintomi clinici. , i segni e le manifestazioni radiografiche non sono specifici. Pertanto, una diagnosi definitiva richiede l’identificazione diretta dei funghi nel sito dell’infezione.

L'infezione fungina delle vie aeree può essere diagnosticata da:

• Esame microscopico
• Coltura di secrezioni respiratorie (espettorato, BAL), campioni di tessuto o sangue.
• Sierologia: analisi del siero che rileva gli anticorpi dell'ospite che reagiscono agli elementi fungini.
• Anticorpo antigene: rilevamento dei componenti della parete fungina che vengono versati nel flusso sanguigno o in altri fluidi corporei man mano che l'organismo prolifera.
• PCR Fino al 70% degli asmatici gravi sono IgE sensibilizzati ai funghi rispetto al 10% degli asmatici da lievi a moderati e al 5% della popolazione generale (RICK et al.,2020).

L’esposizione alle spore fungine esterne è stata associata al peggioramento dei sintomi dell’asma, alla ridotta funzionalità polmonare, ai ricoveri ospedalieri e alla morte correlata all’asma.(Agarwal et al.,2011).

La broncoscopia viene utilizzata come strumento diagnostico per osservare lesioni endobronchiali e per ottenere campioni clinici come il lavaggio broncoalveolare (BAL) e il lavaggio bronchiale. L'esame della coltura fungina da campione clinico di broncoscopia potrebbe aiutare nella diagnosi di micosi polmonare (Hermansyah et al.,2021).

Il lavaggio broncoalveolare (BAL) è una procedura diagnostica comune e relativamente sicura per la valutazione dei pazienti con malattia polmonare. Spesso fornisce preziose informazioni diagnostiche quando l'anamnesi clinica, l'esame fisico, i test di laboratorio di routine, i test di funzionalità polmonare e l'imaging radiografico non sono sufficienti per raggiungere una diagnosi definitiva. Rispetto all'analisi dell'espettorato, il BAL consente un campionamento mirato del tratto respiratorio inferiore con una minore contaminazione microbica dal tratto aerodigestivo superiore (Davidson et al.,2020).

Scopo del lavoro:

Lo scopo di questo studio è valutare il modello di funghi isolati dalle vie aeree respiratorie (albero bronchiale) dal lavaggio broncoalvealare (BAL) in pazienti asmatici con asma non controllata o difficile da trattare.

Progettazione dello studio:

Studio prospettico, trasversale, osservazionale. località dello studio: Tutti i pazienti adulti (>18 anni) con asma bronchiale difficile da trattare o esacerbazioni frequenti, ricoverati o seguiti in una clinica ambulatoriale presso il dipartimento toracico dell'Università di Mansoura e l'ospedale toracico di Damietta.

Misura di prova :

(BAL) verranno raccolti da 60 pazienti con asma bronchiale

Pazienti e metodi:

Pazienti con asma bronchiale non controllata, riacutizzazioni frequenti e sintomi difficili da trattare nonostante l'aderenza ai farmaci secondo (GINA 2023).

I pazienti verranno classificati in base al questionario sul controllo dell'asma (ACQ GINA2023 Asthma Control Questionnaire (ACQ):

Nelle ultime 4 settimane, il paziente ha avuto:

• Sintomi di asma diurni più di due volte a settimana? si No
• Qualche risveglio notturno dovuto all'asma? si No
• SABA* mitigatore dei sintomi più di due volte alla settimana? si No

• Qualche limitazione di attività dovuta all'asma? Sì NO Ben controllato: Nessuno di questi. Parzialmente controllato: 1-2 Non controllato: 3-4 Criteri di inclusione

  • Età 18 anni o più.
  • Pazienti con asma bronchiale non controllata, riacutizzazioni frequenti e sintomi difficili da trattare nonostante l'aderenza ai farmaci.

Criteri di esclusione

1. Età inferiore a 18 anni.
2. Pazienti che non danno il consenso alla procedura.
3. Pazienti con condizioni cardiache instabili (recente infarto miocardico, aritmia cardiaca, ecc.)
4. Donne incinte.
5. Paziente già in trattamento antifungino.
6. Anomalia del profilo di sanguinamento.
7. pazienti durante attacchi acuti gravi.

Tutti i pazienti saranno sottoposti a quanto segue:

1. Valutazione clinica:

   - Raccolta completa dell'anamnesi ed esame clinico.

2. Lavoro di laboratorio:

   • CBC
   • Profilo di sanguinamento (INR)
3. ECG
4. test di funzionalità polmonare (pfts) con test di reversibilità Risposta positiva al broncodilatatore (BD) (test di reversibilità) È considerato negli adulti se: aumento del FEV1 >12% e >200 mL (maggiore confidenza se l'aumento è >15% e >400 mL) .

Misurare il cambiamento 10-15 minuti dopo la somministrazione di 200-400 mcg di salbutamolo (albuterolo) o equivalente, rispetto alle letture pre-BD.

Prima del test di reversibilità dei broncodilatatori, i broncodilatatori inalatori a breve e lunga durata d'azione venivano sospesi per 4 e 12 ore; i broncodilatatori orali a breve e a lunga durata d'azione sono stati sospesi rispettivamente 8 e 12 ore prima del test. Analisi radiologica

- TC del torace o radiografia del torace 6- Broncoscopia con BAL: la broncoscopia con BAL è stata eseguita secondo procedure standardizzate progettate per ridurre al minimo la contaminazione orale. Il BAL è stato eseguito instillando sequenzialmente e quindi prelevando aliquote da 50 ml di soluzione salina normale sterile.

I campioni di liquido di lavaggio broncoalveolare raccolti con precauzioni asettiche sono stati immediatamente trasportati al laboratorio per il trattamento dei funghi. Il fluido BAL deve essere raccolto in un contenitore sterile etichettato e trasportato opportunamente al laboratorio per l'analisi.

La microbiologia lavora su:

Il BAL verrà colorato mediante colorazione fungina con lattofenolo e coltura su agar destrosio Sabouraud.

Alcuni funghi patogeni crescono lentamente in coltura e richiedono che le piastre vengano conservate fino a 2 settimane, e in alcuni casi fino a 4 settimane, prima di essere scartate come negative. Tuttavia, molti funghi patogeni comuni, come Aspergillus fumigatus e Candida albicans, produrranno colonie identificabili entro 1-3 giorni. Le colture dovrebbero essere esaminate a intervalli frequenti (almeno tre volte alla settimana).

Analisi statistica:

I dati raccolti verranno codificati, elaborati e analizzati utilizzando il programma SPSS (Versione 26) per Windows. Quando necessario verranno utilizzati i test statistici appropriati. I valori P inferiori a 0,05 (5%) saranno considerati staticamente significativi.

Considerazione etica:

• Il protocollo dello studio sarà sottoposto all'approvazione dell'IRB
• Approvazione dei dirigenti delle strutture sanitarie in cui verrà condotto lo studio
• Il consenso informato scritto sarà ottenuto da ciascun partecipante che condividerà lo studio.
• La riservatezza e la privacy personale saranno rispettate a tutti i livelli dello studio. I dati raccolti non verranno utilizzati per nessun altro scopo