Effetto del dentifricio a base di erbe rispetto a quello convenzionale sulle macchie nere (RCT)

Tchildren saranno iscritti allo studio dall'autostrada clinica dentale, Medical Center of Excellence, National Research Center, Egitto. Dopo la lucidatura professionale delle macchie nere, i soggetti verranno assegnati in modo casuale in due gruppi di numero uguali (n = 28; suddiviso a 14 in ciascun gruppo).

Il gruppo di test utilizzerà il dentifricio a base di erbe (Dabur Red); (Garik Powder (Red Ocher), Pippali (Piper Longum), Maricha (Piper Nigrum), Sunthi (ZingiberOfficinale), Tomarbeej (Zanthoxylumarmatum), Karpoor (Cinnamumumcamphora), coda di Laungka (olio di syzygiumarumum) e pudinasatva (menthapiphipHipHipHipHipHora); Il gruppo di controllo utilizzerà il dentifricio con dentifricio di sodiofluoro (segnale). (Aqua, idrolizzato di amido idrogenato, silice idratata, PEG-32, citrato di zinco, lauril solfato di sodio, aroma, olio di mentopiperita, rosmarinus officinalis olio foglia, cI 74260).

Sia i gruppi di test che di controllo utilizzeranno il dentifricio assegnato due volte al giorno per 2 mesi. Lo studio sarà in doppio cieco; verranno preparate buste sequenzialmente numerate, opache e sigillate contenenti il ​​test o la pasta di controllo.

All'inizio dello studio, tutte le materie completeranno un questionario che include domande riguardanti variabili socio-demografiche come l'età e il sesso. I soggetti con BS (gruppi di test e controllo) chiederanno anche le abitudini di igiene orale come il tipo di spazzola dentale (manuale o elettrico), abitudini alimentari come l'integrazione di ferro e il tipo di acqua potabile consumata (tocco o acqua minerale).

I soggetti di prova e controllo riceveranno formazione per l'igiene dentale domestica all'iscrizione e saranno contattati telefonicamente ogni 2 settimane per 2 mesi per garantire l'adesione al protocollo e registrare qualsiasi ricorrenza di macchie nere.

Tutti i soggetti iscritti saranno seguiti presso la clinica dentale, National Research Center, Egitto. Lo studio sarà coerente con buone pratiche cliniche in conformità con i principi etici della "64a Dichiarazione di Associazione medica mondiale di Helsinki". Tutti i genitori dei partecipanti firmeranno un consenso informato scritto prima di unirsi allo studio dopo una breve spiegazione di tutte le procedure e tabella. Un assenso verbale verrà preso dal bambino prima dell'intervento.

Raccolta di esame clinico e campioni:

Tutti i soggetti con BS (sia il gruppo di test che di controllo) avranno un esame intraorale e una profilassi orale professionale all'iscrizione da parte dello stesso operatore. Verranno raccolte fotografie intraorali. La valutazione clinica di BS sarà valutata attentamente per escludere altre cause delle macchie dentali. Verrà inoltre calcolato il numero medio di indice di denti primari e permanenti decaduti, mancanti e riempiti (DMFT/DET).

I campioni salivari raccolgono cinque ml di campioni di saliva non stimolati da tutti i partecipanti di entrambi i gruppi di test e di controllo saranno raccolti in un tubo Falcon da 15 ml sterili secondo le procedure standard. I campioni verranno raccolti prima di usare il dentifricio a base di erbe e convenzionali e dopo 2 mesi di uso regolare.

Estrazione del DNA Il DNA totale dai campioni di saliva di tutti i partecipanti verrà eseguito utilizzando il kit di estrazione del DNA commerciale genomico, secondo le istruzioni del fornitore. L'integrità del DNA verrà controllata utilizzando l'elettroforesi su gel di agarosio e la concentrazione e la purezza dei campioni di DNA saranno controllati usando lo spettrofotometro nanodrop.

Quantificazione delle specie batteriche usando QRT-PCR due specie di batteri cariogenici; Streptococcus mutans e Lactobacillus casei sono selezionati per essere coinvolti in questo studio. Inoltre, due specie di batteri cromogenici; Actinomyces naeslundii e Prevotella melaninogenica saranno inclusi nel presente studio. Le sequenze di primer delle specie batteriche selezionate; F = tcgcgaaaaagataaacaaaca e r = gccccttcacagtttggttag per (streptococcus mutans), f = ttaaagccattctcagttcgga e r = tacggctttacttgttacGactt per (lactobacillus casei) (12). An-F3: CTGCTGCTGACATCGCCGCTCGTA and An-R3: TCCGCTCGCGCCACCTCTCGTTA for (Actinomyces naeslundii), Pm-F3: TGACCGTAAGAAGAAGTTGCCTGTA and Pm-R3: TTGCGACCGATAGCTGCCTTCATA for (Prevotella melaninogenica) (13). La quantificazione delle specie batteriche selezionate verrà eseguita utilizzando la miscela master verde Sybr, primer specifici, DNA e completare il volume della miscela di reazione usando acqua sterile RNase e DNasi. La reazione verrà eseguita utilizzando la reazione a catena della polimerasi in tempo reale nel dispositivo RT-PCR.