口腔創傷治癒に対するプロバイオティクスの効果 - パイロット研究 (PROWOUND)

介入: インフォームド コンセントと臨床データ (年齢、性別) のベースライン収集の後、参加者は治療順序の 1 つにランダムに割り当てられます。 慣らし期間として、7日間に十分な量のプロバイオティクスまたはプラセボの錠剤が与えられます. 参加者は、毎日 2 錠 (朝と夕方に 1 つずつ、0 ～ 7 日目) を服用するように指示され、プロバイオティクスを含む他の食品やサプリメントは控えるよう求められます。 8日目に、参加者はクリニックに出席し、パンチ生検が行われます。 割り当てグループに応じて、プロバイオティクスまたはプラセボ オイルが提供されます。 参加者は、毎晩 9 日間、プラスチック マイクロブラシを使用して創傷に局所的にオイルを塗布するように指示され、1 日 2 回割り当てられた錠剤を継続するように強く強化されます。 参加者は、創傷治癒のフォローアップ写真のために、負傷後 2、5、および 8 日目にクリニックに出席します。 最初の介入期間は 4 週間のウォッシュ アウト期間で終了し、その後、同じ手順に従って 2 回目の介入期間が始まります。

プロバイオティクス タブレットとプロバイオティクス オイル (推奨用量) には、2x10^8 CFU のラクトバチルス ロイテリが含まれています。 プラセボ錠剤とオイルの両方は、サイズと組成が同じですが、プロバイオティクス菌株が添加されていません. 錠剤とオイルは、色分けされた同一のポット/ボトルに詰められています。 分析が完了するまで、コードは調査員に公開されません。 タブレットとオイルの両方が BIOGAIA AB から提供されています。

臨床手順とサンプリング

すべての臨床処置とサンプル収集は、コペンハーゲン大学の歯学研究所、齲蝕学、歯内学、小児歯科および臨床遺伝学部門、保健医療科学部の資格のある認可された歯科医によって行われます。 収集されたサンプル (唾液、創傷滲出液、細菌塗抹標本) は、すべての患者からのすべてのサンプルが収集されるまで、-80 °C の冷凍庫に保存されます - 最大 6 か月間。 収集したすべてのサンプルを同時に実行することで、ラボ分析を効率的に実行し、エラーを回避できます。

パンチ生検: 8 日目に、直径 3.5 mm、深さ約 1.5 mm の標準化された円形の傷が、生検パンチを使用して硬口蓋の粘膜に作成されます。 生検は、局所止血のためにエピネフリンと組み合わせたリドカイン２％を使用して、無菌条件下および局所麻酔下で行われる。 外科用メスを使用して、コペンハーゲン大学歯科研究所のバイオ セーフティ規制に従って廃棄される表面上皮とその下にある表面結合組織を除去します。 創傷後、創傷部位を口腔内カメラで撮影 (ブラインド コード) し、基準として創傷の周囲に標準サイズの直径 6 mm のテンプレートを配置します。 参加者は、負傷後 2 日目、5 日目、8 日目に歯科医院に通い、博士課程の学生ジーナ カスティブランコが撮影した傷の写真を撮ります。 写真の創傷サイズは 2 人の評価者によって測定され、ソフトウェア (Canvas 7、ACD Systems of America) を使用して、標準ラベル サイズに対する創傷表面積の比率として表されます。 エンドポイントは、創傷後 2、5、および 8 日目に測定された初期創傷サイズのパーセンテージになります。

唾液サンプリング：各被験者からの刺激されていない全唾液（UWS）の6つのサンプルが収集されます（ベースラインで1つ、慣らし期間の直後に1つ、介入期間の終了時に1つ）。 USW コレクションの場合、参加者は頭を少し曲げて快適な位置に座ります。 参加者は、目を開けたままにして、飲み込むなど、できるだけ少ない動きをするように求められます。 その後、水で口をすすぎ、吐き出すように指示されます。 その後、指定されたプラスチック製のコップに 10 分間唾液を口から垂らすように指示されます。 唾液のアリコート (1.5 ml) を直ちに氷上に置き、さらに分析するまで -80 °C の冷凍庫に保存します。

傷滲出液の採取：傷滲出液は全部で8サンプル採取します。 創傷部位を綿ペレットで乾燥させ、ペリオペーパーストリップ（ProFlow、Amityville、NY、USA）を創傷に20秒間静かに押し付けます。 血液汚染の場合、ストリップは排出され、5 分後にサンプリングが繰り返されます。 Peritron 8000 (Proflow) を使用して滲出液の量を記録し、μL で表します。 1 つのストリップは約 0.1-0.4 を保持します 滲出液の μ L。 次に、ストリップをプラスチックチューブに移し、さらに分析するまで-80℃で保存します。

細菌スミア コレクション: 4 つの細菌スミアがサンプリングされます。 滅菌スワブを創傷部位に通し、プラスチックチューブに入れ、さらに分析するまで-80°Cで凍結保存します。 塗抹標本は、一般的に創傷治癒の遅延に関連する細菌種 (β-溶血性連鎖球菌および黄色ブドウ球菌) の有無および数を検出するために、従来の微生物培養に供されます。

痛みと不快感の知覚: 1 ページのログブックが各慣らし期間の開始時に参加者に渡され、VAS スケールに従って錠剤の摂取と痛みと不快感の知覚を登録できます。 参加者は、結果に影響を与える可能性のある要因 (身体活動とアルコール飲料の数) を登録することもお勧めします。 参加者は、介入期間の終わりに記入済みのログブックを持参するよう求められます。

知覚ストレスと一般的な健康: 介入期間の終わりに、参加者は、検証済みの一般健康アンケート GHQ-12 (10) および検証済みの知覚ストレス スケール (11) に記入するよう求められます。 これらの要因 (ストレスの自己認識と一般的な健康状態) は、創傷治癒の結果の共同創設者である可能性があることが知られています。

コンプライアンス: 各介入期間の開始時に、参加者には 16 日間分の錠剤と 9 日間分の塗布に十分な局所用オイルが提供されます。 コンプライアンスは、錠剤の毎日の摂取量とオイルの塗布が登録されている参加者のログブックへの記入を通じてチェックされます。 最後の予定では、参加者は残りの錠剤とオイルを数え/推定するために持参するよう求められます.

データ分析：すべてのデータはオープンソースの統計ソフト「R」で処理され、正規分布に制御されます。 多変量および単変量分散分析 (MANOVA および ANOVA) を使用して、時間の経過に伴う被験者内の変化を評価します。 0.05 未満の p 値は、統計的に有意と見なされます。 得られた結果は、国際的に認知されたジャーナルに掲載されます。 結果が雑誌に掲載できない場合は、歯科大学のウェブサイトで入手できます。 肯定的、否定的、および決定的でない結果が公開されることを強調します。

データ管理: 収集されたすべてのデータは、個人データの処理に関する法律および「保健法」に従って処理されます。 参加時に、参加者には固有の番号が割り当てられ、個人識別番号のない別のプロトコルが割り当てられます。 この研究は、民間の科学的健康プロジェクトであるため、「Datatilsynet」には報告されません。