群発頭痛における特定のマイクロRNAの役割 (5*1000)

背景 群発頭痛 (CH) は、国際頭痛分類第 3 版によれば、三叉神経自律神経頭痛 (TAC) に含まれる一次性頭痛です。 CH は多面的で不完全に理解されている病態生理学を特徴としています。 視床下部、三叉神経血管複合体、三叉神経自律神経反射が重要な役割を果たしていると考えられています。

実験的証拠の増加により、慢性疼痛および片頭痛を含む一次性頭痛における特定のマイクロRNA (miRNA) の関与が強調されています。 miRNA は、長さが約 22 ヌクレオチドの小さな内因性非コード RNA です。 miRNA は、メッセンジャー RNA (mRNA) の分解を促進したり、mRNA の翻訳を抑制したりすることにより、遺伝子発現の転写後調節因子として機能します。 個々の miRNA が数百の異なる mRNA を標的とする可能性があり、逆に各 mRNA が複数の miRNA によって制御される可能性があるため、miRNA によって実行される制御プロセスは複雑かつ明確です。 すべてのタンパク質をコードする遺伝子の 60% 以上が miRNA によって制御されており、その結果、分化、発生、シグナル伝達を含むさまざまな細胞プロセスの多面的調節が決定されると推定されています。 miRNA は痛みの発生と維持に関与しており、特定の miRNA が片頭痛に関与している可能性があることを示唆する証拠がいくつかあります。

最近の研究で、慢性片頭痛 (CM) 患者の末梢血単核球 (PBMC) における 2 つの miRNA、miR-382-5p および miR-34a-5p の遺伝子発現の上方制御が観察されました。 これらの miRNA は、発作性片頭痛を持つ個人や健常者 (HC) と比較して、炎症調節と γ-アミノ酪酸 (GABA) の放出に関与しています。 これらの発見は、これらの miRNA の遺伝子発現と片頭痛の表現型、およびその重症度の間の相関関係を強調しています。

最近の研究では、CH における特定の神経ペプチドの積極的な役割が示唆されています。 デンマークのグループは、CGRP、PACAP、または VIP の静脈内投与が、疾患の活動期に研究された場合、参加者の少なくとも 50% に急性 CH 発作を誘発する可能性があることを実際に実証しました。

現時点では、CH における miRNA の潜在的な関与に関するデータはありません。 この研究は、群発頭痛における miRNA の役割を詳細に調査し、この一次性頭痛障害の病態生理学への理解に貢献することを目的としています。 さらに、得られた結果は、miRNA アゴニスト (Agomir) やアンタゴニスト (Antagomir) など、CH の分野で使用できる新世代の分子の開発への道を開く可能性があります。

目的 我々の現在のプロジェクトの主な目的は、活動期（eCH- act）、寛解期のエピソード性 CH（eCH-rem）、慢性 CH（cCH）、および健康な対照被験者（HC）。

メソッド

すべての被験者は、時間をかけて単一の評価を実行し、その間に次のことを行います。

• 研究手順の説明とインフォームドコンセントへの署名
• スクリーニング訪問
• 臨床および人口統計データの収集（頭痛日記の改訂に基づく）
• 空腹時の静脈採血
• アンケートの管理

すべての被験者は夜間絶食後の朝に評価されます。 cCH または eCH-act の影響を受けた被験者の場合、サンプリングは、eCH 患者では少なくとも 3 時間、eCH 患者では少なくとも 8 時間 CH 発作が存在しないことによって定義される、臨界間期で実施されることが期待されます。 cCH。 採血後、患者はセンターに滞在し、一連のアンケートに回答します。 これにより、研究者は、CH 発作の直前に血液サンプリングが実行されることを排除して、患者を少なくとも 2 時間監視することができます。

eCH 患者の場合、「活動期」と「寛解期」は次のように定義されます。

• 活動期: CH 攻撃が少なくとも 7 日間存在する段階。
• 寛解期: 薬物療法を行わずに少なくとも 15 日間連続して群発頭痛発作が存在しないことを特徴とします。

miR-382-5p、miR-34a-5p、および miRNA-155 遺伝子発現は、リアルタイム逆転写 (RT-PCR) によって PBMC で評価されます。 この評価は、U6 (ハウスキーピング遺伝子として使用される核内低分子 RNA の一種) で正規化され、相対定量 (RQ) として表されます。 CGRP α、PACAP、VIP の血漿レベルは、検証済みの市販の ELISA キットを使用して測定されます。 生化学分析のために計画された方法の詳細な説明は、ここで見つけることができます: https://doi.org/10.1186/s10194-020-01189-0。

一連の臨床質問票には、片頭痛障害評価 (MIDAS)、頭痛影響検査 (HIT-6)、群発頭痛影響質問票 (CHIQ) が含まれます。

サンプルサイズの計算と事前に計画された統計分析 計算では次のパラメーターが考慮されました。 エフェクト サイズ: 0.5。アルファ誤差: 0.05;ベータ誤差: 0.05 (検出力: 95%);グループ数: 4。

サンプルサイズの計算は、フリーウェア プラットフォーム G*Power (ver. 3.1.9.7) 4 つのグループにボンフェローニ補正を適用した ANOVA 検定。 推奨される最小サンプルサイズは 76 人の被験者 (グループあたり 19 人の被験者) です。 潜在的な変動を考慮して、グループあたり 25 人の被験者で合計 100 人の被験者を登録する予定です。

パラメトリックまたはノンパラメトリック相関は、生化学変数と臨床変数の間の関係を測定するために使用されます。 単変量解析の結果に基づいて多変量解析が実行されます。 統計的有意性は 5% レベルに設定されます (p<0.05)。