長時間の座り作業をやめることによる脂肪組織と代謝への影響

治験前の評価:

身体活動評価：参加者の習慣的な身体活動エネルギー消費量を評価するために、心拍数/加速度計を組み合わせたモニターを 7 日間装着しました (Actiheart、Cambridge Neurotechnology Ltd.、ケンブリッジ、英国)。 これは、シャワー/入浴/水泳中を除き、1日24時間、2枚の粘着性ECGパッドを介して左胸に取り付けられました。

体組成分析:

体重は、排尿後にデジタルスケール（TANITA corp.、東京、日本）を使用して評価されました。 ウエストとヒップ周囲は、世界保健機関のガイドラインに基づいて評価されました。 体組成は、二重エネルギー X 線吸光光度計 (Discovery、Hologic、ベッドフォード、英国) を使用して測定しました。 腹部皮下および内臓脂肪組織量は、L1 ～ L4 の間の中央領域から推定されました。

トライアル日数:

各主要試験の 72 時間前に、参加者は激しい身体活動を控えるよう求められました。 各主要試験の 48 時間前にはアルコール/カフェインの摂取は禁止され、その間、最初の主要試験の 48 時間前に食事記録が完了しました。 参加者は、2回目の主要試験の前にこの食事を再現するよう求められました。 さらに、各主要試験の48時間前に、座りがちな生活パターンを模倣し、最近の身体活動による急性影響を排除するために、参加者は1日あたりの歩数を4000歩未満に制限するよう求められました。

1 つは長時間座る試験、もう 1 つは長時間座るのをやめる試験を含む 2 つの試験を実施しました。 ブレーキングトライアルでは、参加者は最初の食事を摂取した後、その後の180分間、20分ごとに時速6.4kmのトレッドミルで2分間歩きました。 残りの時間、参加者は椅子に座っていました。 180分後、2回目の食事が提供されました。 2回目の食事を終えた後、参加者はその後120分間、20分ごとに同じ速度で長時間座った状態での身体活動を中断して2分間続けました。 合計すると、参加者は試験全体を通して 2 分間の身体活動を 15 回実行し、合計 30 分間、長時間の座位での身体活動を中断しました。 長時間の座位試験では、参加者は椅子に座りました。

運動強度とエネルギー消費量を決定するために、2 つの休憩座位歩行で呼気、RPE、心拍数が収集されました。 さらに、5分間座った状態を2回行い、呼気と心拍数を測定して、座っている間の総エネルギー消費量を計算しました。 各試験中、参加者は座位からトレッドミルに移動するか、必要に応じて排尿することが許可されました。 座っている間、参加者は読書、ラップトップの使用、またはテレビの視聴のみが許可され、それ以外の場合はずっとできるだけ動かないよう求められました。 最初の試験では、参加者に水を自由に摂取させ、その摂取量を2回目の試験でも再現しました。

各主要試験では、最初の食事の前とその後の 5 時間ごとにベースライン血液サンプルが収集されました。 追加の血液サンプルを 1 回目と 2 回目の食事後 15 分ごとに収集しました。 各試験で合計 14 個の血液サンプルが収集されました。

脂肪組織培養と遺伝子発現:

脂肪組織生検および洗浄後、組織を約 5 ～ 10 mg に切り刻み、0.1% 脂肪酸を含まないウシ血清アルブミン 100 U を含む内皮細胞基礎培地 (ECBM) を含む滅菌培養プレート (Nunc、ロスキレ、デンマーク) に直接置きました。 ml-1 ペニシリンおよび 0.1 mg ml-1 ストレプトマイシン (Sigma-Aldrich、英国ジリンガム)。 脂肪組織を、ＥＣＢＭ培地１ｍｌ当たり組織１００ｍｇの最終比率で３時間インキュベートした。 37℃、5% CO2、95 ± 5% 相対湿度のインキュベーターを使用しました (MCO-18A1C CO2 インキュベーター、三洋電機、大阪、日本)。 培地を滅菌エッペンドルフに移し、3時間インキュベートした後、-80℃で保存した。 約200 mgの脂肪組織を、RNase/DNaseフリーの滅菌チューブ(Invitrogen、Paisley、UK)中で5mlのTrizol中でホモジナイズし、さらなる分析まで-80℃で保存した。

サンプルサイズ：

以前の同様の研究では、それぞれ3337 IU L-1 9h-1および2470 IU L-1 9h-1の長時間座位と比較して、長時間座位を中断した際のインスリンの曲線下面積(iAUC)の増加が報告されています。 600 IU L-1 9h-1 の推定 SD に基づいて、9 人の参加者に、95% のパワーと 5% のアルファでインスリンの iAUC の差を示すように要求します。

統計：

すべてのデータは、平均値±平均値の標準誤差（SEM）として表されました。 増分曲線下面積 (iAUC) は台形法を使用して計算され、試験間の差異は対応のある t 検定を使用して分析されました。 グルコース、インスリン、NEFA、アディポカイン、および細胞培養の結果は、SPSS バージョン 22 (IBM、ニューヨーク州アーモンク、米国) を使用した反復測定を伴う二元配置分散分析を使用して決定されました。 有意な相互作用 (試行 × 時間) が見つかった場合は、Holm-Bonferroni 補正を備えた t 検定を使用して事後分析が適用されました。 単一の比較では、t 検定またはノンパラメトリック同等の検定を使用しました。 統計的有意性は p ≤ 0.05 に設定されました。