Pitkän istumisen keskeyttämisen vaikutus rasvakudoksiin ja aineenvaihduntaan

Oikeudenkäyntiä edeltävät arvioinnit:

Fyysisen aktiivisuuden arviointi: yhdistettyä syke-/kiihtyvyysanturimittaria käytettiin 7 päivän ajan osallistujan tavanomaisen fyysisen aktiivisuuden energiankulutuksen arvioimiseksi (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, UK). Tämä kiinnitettiin vasempaan rintakehään kahdella tarttuvalla EKG-tyynyllä 24 tuntia vuorokaudessa, paitsi suihkussa/kylvyssä/uinnissa.

Kehonkoostumusanalyysi:

Kehon massa arvioitiin käyttämällä digitaalisia vaakoja post-void (TANITA corp., Tokio, Japani). Vyötärön ja lantion ympärysmitta arvioitiin Maailman terveysjärjestön ohjeiden mukaan. Kehon koostumus määritettiin käyttämällä Dual Energy X-ray absorptiometriaa (Discovery, Hologic, Bedford, UK). Vatsan ihonalaisen ja viskeraalisen rasvakudoksen massa arvioitiin keskialueelta välillä L1-L4.

Kokeilupäivät:

72 tuntia ennen kutakin päätutkimusta osallistujia pyydettiin pidättäytymään kaikista rasittavista fyysisistä aktiviteeteista. 48 tuntia ennen jokaista pääkoetta alkoholin/kofeiinin nauttiminen ei ollut sallittua, ja sillä välin ravintolisä tehtiin 48 tuntia ennen ensimmäistä pääkoetta. Osallistujia pyydettiin toistamaan tämä ruokavalio ennen toista pääkoettaan. Lisäksi 48 tuntia ennen kutakin pääkoetta osallistujia pyydettiin rajoittamaan askeleensa alle 4 000 askeleeseen päivässä matkimaan istumista elämäntapamalleja ja eliminoimaan kaikki viimeaikaisen fyysisen toiminnan akuutit vaikutukset.

Suoritettiin kaksi koetta, mukaan lukien yksi pitkittynyt istuminen ja yksi keskeytys pitkittyneen istunnon koe. Murtokokeessa osallistujat kävelivät ensimmäisen aterian nauttimisen jälkeen 2 minuuttia juoksumatolla nopeudella 6,4 km/h 20 minuutin välein seuraavat 180 minuuttia. Lopun ajan osallistujat istuivat tuolilla. 180 minuutin kuluttua tarjottiin toinen ateria. Toisen aterian päätyttyä osallistujille jatkettiin 2 minuutin keskeyttämistä pitkittyneestä istumisesta samalla nopeudella 20 minuutin välein seuraavat 120 minuuttia. Kaiken kaikkiaan osallistujat suorittivat 15 kahden minuutin fyysistä aktiivisuutta koko kokeen ajan, yhteensä 30 minuuttia keskeyttivät pitkittyneen istuma-ajoharrastuksen. Pitkään kestäneessä istunnossa osallistujat istuivat tuolilla.

Uloshengitysilma, RPE ja syke kerättiin kahdella katkaisevalla istumakävelyllä harjoituksen intensiteetin ja energiankulutuksen määrittämiseksi. Lisäksi kaksi 5 minuutin uloshengitettyä ilmaa ja sykettä otettiin laskennalliseen energiankulutukseen istunnon aikana. Jokaisen kokeen aikana osallistujien annettiin siirtyä istuma-asennosta juoksumatolle tai tarvittaessa tyhjentyä. Istuessaan osallistujat saivat vain lukea, käyttää kannettavaa tietokonetta tai katsella televisiota, mutta muuten heitä pyydettiin pysymään mahdollisimman paikallaan koko ajan. Ensimmäisessä kokeessa osallistujien annettiin juoda vettä ad libitum ja nautittu määrä toistettiin toisessa kokeessa

Jokaisessa päätutkimuksessa otettiin perustason verinäytteitä ennen ensimmäistä ateriaa ja tunnin välein seuraavat 5 tuntia. Lisää verinäytteitä kerättiin 15 minuutin välein ensimmäisen ja toisen aterian jälkeen. Kutakin koetta varten kerättiin yhteensä 14 verinäytettä.

Rasvakudosviljelmä ja geeniekspressio:

Rasvakudosbiopsian ja puhdistuksen jälkeen kudos jauhettiin noin 5-10 mg:aan ja asetettiin suoraan steriileille viljelylevyille (Nunc, Roskilde, Tanska) endoteelisolujen peruselatusaineella (ECBM), joka sisälsi 0,1 % rasvahapotonta naudan seerumialbumiinia 100 U ml-1 penisilliiniä ja 0,1 mg ml-1 streptomysiiniä (Sigma-Aldrich, Gillingham, UK). Rasvakudosta inkuboitiin lopullisella suhteella 100 mg kudosta per 1 ml ECBM-elatusainetta 3 tunnin ajan. Käytettiin inkubaattoria, jonka lämpötila oli 37 °C, 5 % C02 ja suhteellinen kosteus 95 ± 5 % (MCO-18A1C C02-inkubaattori; Sanyo, Osaka, Japani). Elatusaine siirrettiin steriileihin eppendorfeihin ja säilytettiin -80 °C:ssa 3 tunnin inkubaation jälkeen. Noin 200 mg rasvakudosta homogenisoitiin 5 ml:ssa Trizolia RNaasi/DNaasi-vapaassa steriilissä putkessa (Invitrogen, Paisley, UK) ja säilytettiin -80 °C:ssa ennen lisäanalyysiä.

Otoskoko:

Aikaisemmassa samankaltaisessa tutkimuksessa kerrottiin insuliinin kasvavan käyrän alla (iAUC) pitkittyneen istumisen katkaisun aikana verrattuna 3337 IU L-1 9h-1 ja 2470 IU L-1 9h-1 pitkittyneeseen istumiseen. Perustuen oletettuun SD-arvoon 600 IU L-1 9h-1, vaatisimme 9 osallistujaa osoittamaan eron iAUC:ssa insuliinille 95 % teholla ja 5 % alfalla.

Tilastot:

Kaikki tiedot esitettiin keskiarvona ± keskiarvon standardivirhe (SEM). Inkrementaalinen käyrän alla oleva pinta-ala (iAUC) laskettiin käyttämällä puolisuunnikkaan menetelmää ja kokeiden väliset erot analysoitiin käyttämällä parillisia t-testejä. Glukoosi-, insuliini-, NEFA-, adipokiini- ja soluviljelytulokset määritettiin käyttämällä kaksisuuntaista ANOVAa toistuvin mittauksin käyttäen SPSS-versiota 22 (IBM, Armonk, NY, USA). Kun merkittäviä vuorovaikutuksia (koe × aika) havaittiin, käytettiin post hoc -analyysiä käyttäen t-testiä Holm-Bonferroni-korjauksella. Yksittäisissä vertailuissa käytettiin t-testiä tai ei-parametrista ekvivalenttia. Tilastollinen merkitsevyys asetettiin arvoon p < 0,05.