O efeito de quebrar a posição sentada prolongada no tecido adiposo e no metabolismo

Avaliações pré-julgamento:

Avaliação da atividade física: um monitor combinado de frequência cardíaca/acelerômetro foi usado por 7 dias para avaliar o gasto energético habitual da atividade física do participante (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, Reino Unido). Este foi anexado ao tórax esquerdo por meio de 2 almofadas adesivas de ECG por 24 horas por dia, exceto durante o banho/banho/natação.

Análise da composição corporal:

A massa corporal foi avaliada com balanças digitais pós-miccionais (TANITA corp., Tóquio, Japão). A circunferência da cintura e do quadril foi avaliada com base nas diretrizes da Organização Mundial da Saúde. A composição corporal foi determinada usando absorciometria de raios X de dupla energia (Discovery, Hologic, Bedford, Reino Unido). A massa de tecido adiposo abdominal subcutâneo e visceral foi estimada a partir de uma região central entre L1-L4.

Dias de teste:

Nas 72 horas anteriores a cada teste principal, os participantes foram orientados a abster-se de realizar qualquer atividade física extenuante. Nas 48 h anteriores a cada ensaio principal, não foi permitido o consumo de álcool/cafeína e, entretanto, foi feito um registo alimentar 48 h antes do primeiro ensaio principal. Os participantes foram convidados a replicar esta dieta antes de seu segundo ensaio principal. Além disso, nas 48 horas anteriores a cada teste principal, os participantes foram solicitados a restringir seus passos para menos de 4.000 passos por dia, a fim de imitar os padrões de estilo de vida sedentário e eliminar quaisquer efeitos agudos da atividade física recente.

Duas tentativas foram realizadas, incluindo uma sentada prolongada e uma quebra de tentativas sentadas prolongadas. No teste de break, após consumir a 1ª refeição, os participantes caminharam 2 minutos em uma esteira a uma velocidade de 6,4 km/h a cada 20 minutos pelos 180 minutos seguintes. No restante do tempo, os participantes sentaram-se na cadeira. Após 180 min, foi fornecida a 2ª refeição. Depois de terminar a 2ª refeição, os participantes continuaram 2 min de pausa na atividade física prolongada sentada na mesma velocidade a cada 20 min pelos 120 min seguintes. No total, os participantes realizaram 15 sessões de dois minutos de atividade física durante todo o teste, totalizando 30 minutos de pausa na atividade física prolongada sentada. No ensaio sentado prolongado, os participantes sentaram-se em uma cadeira.

O ar expirado, o RPE e a frequência cardíaca foram coletados em duas caminhadas sentadas para determinar a intensidade do exercício e o gasto energético. Além disso, duas sessões de 5 minutos de ar expirado e freqüência cardíaca foram tomadas para calcular o gasto total de energia durante a sessão. Durante cada tentativa, os participantes foram autorizados a passar da posição sentada para a esteira ou urinar, se necessário. Enquanto estavam sentados, os participantes só podiam ler, usar um laptop ou assistir televisão, mas foram solicitados a ficar o mais quietos possível durante todo o processo. Na primeira tentativa, os participantes foram autorizados a consumir água ad libitum e o volume ingerido foi replicado para a 2ª tentativa

Em cada ensaio principal, amostras de sangue de linha de base foram coletadas antes da 1ª refeição e de hora em hora nas 5 horas seguintes. Amostras de sangue adicionais foram coletadas a cada 15 minutos após a primeira e segunda refeição. Um total de 14 amostras de sangue foram coletadas para cada ensaio.

Cultura de tecido adiposo e expressão gênica:

Após a biópsia e limpeza do tecido adiposo, o tecido foi picado em aproximadamente 5-10 mg e colocado diretamente em placas de cultura estéreis (Nunc, Roskilde, Dinamarca) com meio basal de células endoteliais (ECBM) contendo 0,1% de albumina de soro bovino livre de ácidos graxos 100 U penicilina ml-1 e estreptomicina 0,1 mg ml-1 (Sigma-Aldrich, Gillingham, Reino Unido). O tecido adiposo foi incubado com uma proporção final de 100 mg de tecido por 1 ml de meio ECBM por 3 horas. Foi utilizada uma incubadora a 37°C, 5% de CO2 e 95 ± 5% de umidade relativa (incubadora MCO-18A1C CO2; Sanyo, Osaka, Japão). Os meios foram transferidos para eppendorfs estéreis e armazenados a -80°C após 3 horas de incubação. Aproximadamente 200 mg de tecido adiposo foram homogeneizados em 5 ml de Trizol em um tubo estéril livre de RNase/DNase (Invitrogen, Paisley, Reino Unido) e armazenados a -80°C antes de análise posterior.

Tamanho da amostra:

Um estudo anterior semelhante relatou área incremental sob a curva (iAUC) para insulina durante a pausa na posição sentada prolongada em comparação com a posição sentada prolongada de 3.337 UI L-1 9h-1 e 2.470 UI L-1 9h-1, respectivamente. Com base em um SD presumido de 600 UI L-1 9h-1, precisaríamos de 9 participantes para mostrar uma diferença em iAUC para insulina com poder de 95% e alfa de 5%.

Estatisticas:

Todos os dados foram apresentados como média ± erro padrão da média (SEM). A área incremental sob a curva (iAUC) foi calculada usando o método trapezoidal e as diferenças entre as tentativas analisadas usando testes t pareados. Os resultados de glicose, insulina, NEFA, adipocinas e cultura de células foram determinados usando uma ANOVA de duas vias com medidas repetidas usando SPSS versão 22 (IBM, Armonk, NY, EUA). Onde interações significativas (tentativa × tempo) foram encontradas, uma análise post hoc foi aplicada usando o teste t com a correção de Holm-Bonferroni. As comparações simples usaram um teste t ou equivalente não paramétrico. A significância estatística foi estabelecida em p ≤ 0,05.