Vliv přerušení dlouhého sezení na tukovou tkáň a metabolismus

Předběžná hodnocení:

Hodnocení fyzické aktivity: kombinovaný monitor srdeční frekvence/akcelerometr byl nošen po dobu 7 dní, aby se vyhodnotil obvyklý energetický výdej účastníka při fyzické aktivitě (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, UK). Toto bylo připevněno k levé části hrudníku pomocí 2 adhezivních EKG podložek po dobu 24 hodin denně s výjimkou sprchování/koupání/plavání.

Analýza složení těla:

Tělesná hmotnost byla hodnocena pomocí digitálních vah po vyprázdnění (TANITA corp., Tokio, Japonsko). Obvod pasu a boků byl hodnocen na základě pokynů Světové zdravotnické organizace. Tělesné složení bylo stanoveno pomocí rentgenové absorptiometrie s duální energií (Discovery, Hologic, Bedford, UK). Hmotnost abdominální podkožní a viscerální tukové tkáně byla odhadnuta z centrální oblasti mezi L1-L4.

Zkušební dny:

Během 72 hodin před každým hlavním soudem byli účastníci požádáni, aby se zdrželi jakékoli namáhavé fyzické aktivity. Během 48 hodin před každým hlavním líčením nebyla povolena konzumace alkoholu/kofeinu a mezitím byl 48 hodin před prvním hlavním líčení dokončen dietní záznam. Účastníci byli požádáni, aby zopakovali tuto dietu před druhým hlavním testem. Kromě toho byli účastníci 48 hodin před každým hlavním testem požádáni, aby omezili své kroky na méně než 4 000 kroků za den, aby napodobili vzorce sedavého životního stylu a eliminovali jakékoli akutní účinky nedávné fyzické aktivity.

Byly provedeny dva pokusy včetně jednoho prodlouženého sezení a jednoho pokusu o přerušení prodlouženého sezení. V přerušovací zkoušce po konzumaci 1. jídla účastníci šli 2 minuty na běžeckém pásu rychlostí 6,4 km/h každých 20 minut po dobu následujících 180 minut. Po zbytek času účastníci seděli na židli. Po 180 minutách bylo zajištěno 2. jídlo. Po dokončení 2. jídla účastníci pokračovali 2 minuty v přerušování dlouhodobé fyzické aktivity vsedě stejnou rychlostí každých 20 minut po dobu následujících 120 minut. Celkem účastníci během studie provedli 15 dvouminutových záchvatů fyzické aktivity v celkové délce 30 minut a přerušili tak prodlouženou fyzickou aktivitu vsedě. V prodlouženém sezení účastníci seděli na židli.

Vydechovaný vzduch, RPE a srdeční frekvence byly shromážděny ve dvou pauzách vsedě, aby se určila intenzita cvičení a energetický výdej. Kromě toho byly měřeny dvě 5minutové sezení vydechovaného vzduchu a srdeční frekvence pro vypočtený celkový energetický výdej během sezení. Během každého pokusu bylo účastníkům umožněno přejít ze sedu na běžecký pás nebo se v případě potřeby vyprázdnit. Při sezení směli účastníci pouze číst, používat notebook nebo sledovat televizi, jinak byli požádáni, aby se po celou dobu drželi pokud možno v klidu. V první studii bylo účastníkům umožněno konzumovat vodu ad libitum a požitý objem byl replikován pro druhou studii

V každé hlavní studii byly odebírány základní krevní vzorky před prvním jídlem a každou hodinu po dobu následujících 5 hodin. Další vzorky krve byly odebírány každých 15 minut po prvním a druhém jídle. Pro každý pokus bylo odebráno celkem 14 vzorků krve.

Kultivace tukové tkáně a genová exprese:

Po biopsii a vyčištění tukové tkáně byla tkáň rozemleta na přibližně 5-10 mg a přímo umístěna na sterilní kultivační plotny (Nunc, Roskilde, Dánsko) s bazálním médiem endoteliálních buněk (ECBM) obsahujícím 0,1 % hovězího sérového albuminu bez mastných kyselin 100 U ml-1 penicilinu a 0,1 mg ml-1 streptomycinu (Sigma-Aldrich, Gillingham, UK). Tuková tkáň byla inkubována s konečným poměrem 100 mg tkáně na 1 ml média ECBM po dobu 3 hodin. Byl použit inkubátor při 37 °C, 5 % CO2 a 95 ± 5 % relativní vlhkosti (MCO-18A1C CO2 inkubátor; Sanyo, Osaka, Japonsko). Médium bylo přeneseno do sterilních Eppendorfových nádob a skladováno při -80 °C po 3 hodinách inkubace. Přibližně 200 mg tukové tkáně bylo homogenizováno v 5 ml Trizolu ve sterilní zkumavce bez RNázy/DNázy (Invitrogen, Paisley, UK) a skladováno při -80 °C před další analýzou.

Velikost vzorku:

Předchozí podobná studie uváděla inkrementální plochu pod křivkou (iAUC) pro inzulin během delšího sezení při přerušování ve srovnání s prodlouženým sezením 3337 IU L-1 9h-1 a 2470 IU L-1 9h-1, v daném pořadí. Na základě předpokládané SD 600 IU L-1 9h-1 bychom požadovali, aby 9 účastníků vykazovalo rozdíl v iAUC pro inzulín s 95% výkonem a 5% alfa.

Statistika:

Všechna data byla prezentována jako průměr ± standardní chyba průměru (SEM). Přírůstková plocha pod křivkou (iAUC) byla vypočtena pomocí lichoběžníkového způsobu a rozdíly mezi pokusy byly analyzovány pomocí párových t-testů. Výsledky pro glukózu, inzulín, NEFA, adipokiny a buněčné kultury byly stanoveny pomocí dvoucestné ANOVA s opakovanými měřeními pomocí SPSS verze 22 (IBM, Armonk, NY, USA). Tam, kde byly nalezeny významné interakce (zkouška × čas), byla aplikována post hoc analýza pomocí t-testu s Holm-Bonferroniho korekcí. Jednotlivá srovnání používala t-test nebo neparametrický ekvivalent. Statistická významnost byla stanovena na p < 0,05.