Het effect van langdurig zitten op vetweefsel en metabolisme

Evaluaties voorafgaand aan het proces:

Beoordeling van fysieke activiteit: een gecombineerde hartslag-/versnellingsmetermonitor werd gedurende 7 dagen gedragen om het gebruikelijke energieverbruik van de deelnemer aan fysieke activiteit te beoordelen (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, VK). Deze werd 24 uur per dag met 2 zelfklevende ECG-pads op de linkerborst bevestigd, behalve tijdens douchen/baden/zwemmen.

Analyse van de lichaamssamenstelling:

De lichaamsmassa werd beoordeeld met behulp van digitale weegschalen na leegte (TANITA corp., Tokyo, Japan). De taille- en heupomtrek werd beoordeeld op basis van de richtlijnen van de Wereldgezondheidsorganisatie. De lichaamssamenstelling werd bepaald met behulp van Dual Energy X-ray absorptiometry (Discovery, Hologic, Bedford, UK). Abdominale subcutane en viscerale vetweefselmassa werd geschat op basis van een centraal gebied tussen L1-L4.

Proefdagen:

In de 72 uur voorafgaand aan elke hoofdproef werd de deelnemers gevraagd om af te zien van enige inspannende fysieke activiteit. In de 48 uur voorafgaand aan elke hoofdproef was het nuttigen van alcohol/cafeïne niet toegestaan ​​en in de tussentijd werd 48 uur voor de eerste hoofdproef een voedingsdossier ingevuld. Deelnemers werd gevraagd om dit dieet te repliceren voorafgaand aan hun tweede hoofdproef. Bovendien werd de deelnemers in de 48 uur voorafgaand aan elke hoofdproef gevraagd om hun stappen te beperken tot minder dan 4000 stappen per dag om sedentaire levensstijlpatronen na te bootsen en eventuele acute effecten van recente fysieke activiteit te elimineren.

Er werden twee proeven uitgevoerd, waaronder een proef met langdurig zitten en een proef met langdurig zitten onderbreken. In de remproef liepen de deelnemers na het nuttigen van de eerste maaltijd 2 minuten op een loopband met een snelheid van 6,4 km/u elke 20 minuten gedurende de volgende 180 minuten. De rest van de tijd zaten de deelnemers op de stoel. Na 180 minuten werd de 2e maaltijd verstrekt. Na het beëindigen van de 2e maaltijd moesten de deelnemers de volgende 120 minuten elke 20 minuten elke 20 minuten 2 minuten lang zittende fysieke activiteit onderbreken met dezelfde snelheid. In totaal voerden de deelnemers 15 periodes van twee minuten fysieke activiteit uit tijdens de proef, waarbij ze in totaal 30 minuten lang de langdurige fysieke activiteit in zittende houding onderbraken. Bij de proef met langdurig zitten zaten de deelnemers op een stoel.

Uitgeademde lucht, RPE en hartslag werden verzameld in twee van de zittende pauzewandelingen om de trainingsintensiteit en het energieverbruik te bepalen. Bovendien werden twee keer 5 minuten zitten met uitgeademde lucht en hartslag meegenomen in het berekende totale energieverbruik tijdens zitten. Tijdens elke proef mochten de deelnemers van een zittende positie naar de loopband gaan of indien nodig leeglopen. Zittend mochten de deelnemers alleen lezen, een laptop gebruiken of televisie kijken, maar verder werd hen gevraagd om zo stil mogelijk te blijven. In de eerste proef mochten de deelnemers ad libitum water consumeren en het ingenomen volume werd gerepliceerd voor de 2e proef

In elk hoofdonderzoek werden basislijnbloedmonsters verzameld vóór de eerste maaltijd en elk uur gedurende de volgende 5 uur. Elke 15 minuten na de eerste en tweede maaltijd werden extra bloedmonsters genomen. Voor elke proef werden in totaal 14 bloedmonsters verzameld.

Vetweefselkweek en genexpressie:

Na vetweefselbiopsie en reiniging werd het weefsel fijngehakt tot ongeveer 5-10 mg en direct in steriele kweekplaten geplaatst (Nunc, Roskilde, Denemarken) met endotheelcel basale media (ECBM) die 0,1% vetzuurvrij runderserumalbumine 100 U bevatten. ml-1 penicilline en 0,1 mg ml-1 streptomycine (Sigma-Aldrich, Gillingham, VK). Vetweefsel werd gedurende 3 uur geïncubeerd met een uiteindelijke verhouding van 100 mg weefsel per 1 ml ECBM-medium. Een 37°C, 5% CO2 en 95 ± 5% relatieve vochtigheid incubator werd gebruikt (MCO-18A1C CO2 incubator; Sanyo, Osaka, Japan). Media werden overgebracht naar steriele eppendorfs en na 3 uur incubatie bij -80°C bewaard. Ongeveer 200 mg vetweefsel werd gehomogeniseerd in 5 ml Trizol in een RNase/DNase-vrije steriele buis (Invitrogen, Paisley, VK) en vóór verdere analyse bij -80°C bewaard.

Steekproefgrootte:

Een eerdere vergelijkbare studie rapporteerde een toenemende oppervlakte onder curve (iAUC) voor insuline tijdens het onderbreken van langdurig zitten in vergelijking met langdurig zitten van respectievelijk 3337 IU L-1 9h-1 en 2470 IU L-1 9h-1. Op basis van een veronderstelde SD van 600 IU L-1 9h-1, zouden we van 9 deelnemers een verschil in iAUC voor insuline nodig hebben met 95% vermogen en 5% alfa.

Statistieken:

Alle gegevens werden gepresenteerd als gemiddelde ± standaardfout van het gemiddelde (SEM). Incrementele oppervlakte onder curve (iAUC) werd berekend met behulp van de trapeziummethode en verschillen tussen onderzoeken werden geanalyseerd met behulp van gepaarde t-testen. Glucose, insuline, NEFA, adipokines en celkweekresultaten werden bepaald met behulp van een tweerichtings-ANOVA met herhaalde metingen met behulp van SPSS versie 22 (IBM, Armonk, NY, VS). Waar significante interacties (proef × tijd) werden gevonden, werd een post-hocanalyse toegepast met behulp van t-test met de Holm-Bonferroni-correctie. Enkele vergelijkingen gebruikten een t-toets of niet-parametrisch equivalent. Statistische significantie werd vastgesteld op p ≤ 0,05.