El efecto de romper la sedestación prolongada sobre el tejido adiposo y el metabolismo

Evaluaciones previas al juicio:

Evaluación de la actividad física: se usó un monitor combinado de frecuencia cardíaca/acelerómetro durante 7 días para evaluar el gasto de energía de la actividad física habitual de los participantes (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, Reino Unido). Este se adhirió al pecho izquierdo a través de 2 almohadillas adhesivas de ECG durante las 24 horas del día, excepto durante la ducha, el baño o la natación.

Análisis de composición corporal:

La masa corporal se evaluó utilizando básculas digitales postmiccionales (TANITA corp., Tokio, Japón). La circunferencia de la cintura y la cadera se evaluó según las pautas de la Organización Mundial de la Salud. La composición corporal se determinó utilizando absorciometría de rayos X de energía dual (Discovery, Hologic, Bedford, Reino Unido). La masa de tejido adiposo subcutáneo y visceral abdominal se estimó a partir de una región central entre L1-L4.

Días de prueba:

En las 72 horas previas a cada prueba principal, se pidió a los participantes que se abstuvieran de realizar cualquier actividad física extenuante. En las 48 horas previas a cada prueba principal, no se permitía el consumo de alcohol/cafeína y, mientras tanto, se completaba un registro dietético 48 horas antes de la primera prueba principal. Se pidió a los participantes que replicaran esta dieta antes de su segunda prueba principal. Además, en las 48 horas previas a cada prueba principal, se pidió a los participantes que restringieran sus pasos a menos de 4000 pasos por día para imitar los patrones de estilo de vida sedentario y eliminar cualquier efecto agudo de la actividad física reciente.

Se realizaron dos pruebas, incluida una sesión prolongada y una sesión prolongada de descanso. En la prueba de descanso, después de consumir la primera comida, los participantes caminaron 2 minutos en una cinta rodante a una velocidad de 6,4 km/h cada 20 minutos durante los siguientes 180 minutos. Durante el resto del tiempo, los participantes se sentaron en la silla. Después de 180 min, se proporcionó la segunda comida. Después de terminar la segunda comida, los participantes continuaron 2 min de actividad física sentada prolongada a la misma velocidad cada 20 min durante los siguientes 120 min. En total, los participantes realizaron 15 sesiones de dos minutos de actividad física durante la prueba para un total de 30 minutos de interrupción de la actividad física prolongada sentados. En la prueba sentada prolongada, los participantes se sentaron en una silla.

Se recogieron el aire espirado, el RPE y la frecuencia cardiaca en dos caminatas sentadas para determinar la intensidad del ejercicio y el gasto de energía. Además, se tomaron dos sesiones de 5 minutos de aire espirado y frecuencia cardíaca para calcular el gasto total de energía durante la sesión. Durante cada prueba, a los participantes se les permitió pasar de una posición sentada a la cinta rodante o orinar si era necesario. Mientras estaban sentados, a los participantes solo se les permitió leer, usar una computadora portátil o mirar televisión, pero se les pidió que se mantuvieran lo más quietos posible en todo momento. En la primera prueba, a los participantes se les permitió consumir agua ad libitum y el volumen ingerido se replicó para la segunda prueba.

En cada ensayo principal, se recogieron muestras de sangre de referencia antes de la primera comida y cada hora durante las siguientes 5 horas. Se recolectaron muestras de sangre adicionales cada 15 minutos después de la primera y segunda comida. Se recolectó un total de 14 muestras de sangre para cada ensayo.

Cultivo de tejido adiposo y expresión génica:

Después de la biopsia y limpieza del tejido adiposo, el tejido se picó a aproximadamente 5-10 mg y se colocó directamente en placas de cultivo estériles (Nunc, Roskilde, Dinamarca) con medio basal de células endoteliales (ECBM) que contenía 0,1% de albúmina de suero bovino libre de ácidos grasos 100 U ml-1 de penicilina y 0,1 mg ml-1 de estreptomicina (Sigma-Aldrich, Gillingham, Reino Unido). El tejido adiposo se incubó con una relación final de 100 mg de tejido por 1 ml de medio ECBM durante 3 horas. Se utilizó una incubadora a 37 °C, 5 % de CO2 y 95 ± 5 % de humedad relativa (incubadora de CO2 MCO-18A1C; Sanyo, Osaka, Japón). Los medios se transfirieron a eppendorfs estériles y se almacenaron a -80 °C después de 3 horas de incubación. Se homogeneizaron aproximadamente 200 mg de tejido adiposo en 5 ml de Trizol en un tubo estéril libre de RNasa/DNasa (Invitrogen, Paisley, Reino Unido) y se almacenaron a -80 °C antes del análisis posterior.

Tamaño de la muestra:

Un estudio similar anterior informó un área bajo la curva incremental (iAUC) para la insulina durante el descanso de la sedestación prolongada en comparación con la sedestación prolongada de 3337 UI L-1 9h-1 y 2470 UI L-1 9h-1, respectivamente. Con base en una DE supuesta de 600 UI L-1 9h-1, requeriríamos que 9 participantes mostraran una diferencia en el iAUC para insulina con una potencia del 95 % y alfa del 5 %.

Estadísticas:

Todos los datos se presentaron como media ± error estándar de la media (SEM). El área incremental bajo la curva (iAUC) se calculó mediante el método trapezoidal y las diferencias entre los ensayos se analizaron mediante pruebas t pareadas. Los resultados de glucosa, insulina, NEFA, adipocinas y cultivo celular se determinaron mediante un ANOVA de dos vías con medidas repetidas utilizando SPSS versión 22 (IBM, Armonk, NY, EE. UU.). Cuando se encontraron interacciones significativas (ensayo × tiempo), se aplicó un análisis post hoc utilizando la prueba t con la corrección de Holm-Bonferroni. Las comparaciones individuales utilizaron una prueba t o un equivalente no paramétrico. La significación estadística se fijó en p ≤ 0,05.