Effekten av å bryte langvarig sittestilling på fettvev og metabolisme

Vurderinger før rettssak:

Vurdering av fysisk aktivitet: en kombinert puls-/akselerometermonitor ble brukt i 7 dager for å vurdere deltakerens vanlige fysiske aktivitetsenergiforbruk (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, Storbritannia). Denne ble festet til venstre bryst via 2 selvklebende EKG-pads i 24 timer per dag bortsett fra under dusjing/bading/svømming.

Analyse av kroppssammensetning:

Kroppsmassen ble vurdert ved hjelp av digitale vekter post-void (TANITA corp., Tokyo, Japan). Midje- og hofteomkrets ble vurdert basert på retningslinjer fra Verdens helseorganisasjon. Kroppssammensetning ble bestemt ved å bruke dobbeltenergi røntgenabsorptiometri (Discovery, Hologic, Bedford, Storbritannia). Abdominal subkutan og visceral fettvevsmasse ble estimert fra en sentral region mellom L1-L4.

Prøvedager:

I de 72 timene før hver hovedforsøk ble deltakerne bedt om å avstå fra å utføre anstrengende fysisk aktivitet. I de 48 timene før hver hovedforsøk var inntak av alkohol/koffein ikke tillatt, og i mellomtiden ble en diettjournal fullført 48 timer før den første hovedforsøket. Deltakerne ble bedt om å replikere denne dietten før deres andre hovedforsøk. I tillegg, i de 48 timene før hver hovedforsøk, ble deltakerne bedt om å begrense trinnene sine til under 4000 trinn per dag for å etterligne stillesittende livsstilsmønstre og eliminere eventuelle akutte effekter fra nylig fysisk aktivitet.

To forsøk ble utført, inkludert en forlenget sittende og en avbrudd for lengre sitteforsøk. I bruddforsøket, etter å ha inntatt det første måltidet, gikk deltakerne 2 minutter på en tredemølle med en hastighet på 6,4 km/t hvert 20. minutt i de følgende 180 minuttene. Resten av tiden satt deltakerne på stolen. Etter 180 minutter ble det andre måltidet gitt. Etter å ha fullført det andre måltidet, fortsatte deltakerne 2 minutter med å bryte langvarig sittende fysisk aktivitet med samme hastighet hvert 20. minutt i de følgende 120 minuttene. Totalt utførte deltakerne 15 to-minutters anfall med fysisk aktivitet gjennom hele forsøket i totalt 30 minutter med å bryte langvarig sittende fysisk aktivitet. I den langvarige sitteforsøket satt deltakerne på en stol.

Utåndet luft, RPE og hjertefrekvens ble samlet inn i to av pausende sitteturer for å bestemme treningsintensitet og energiforbruk. I tillegg ble to 5 minutters sitting med utåndet luft og hjertefrekvens tatt til beregnet total energiforbruk under sittende. Under hvert forsøk fikk deltakerne bevege seg fra sittende stilling til tredemøllen eller tømme hvis nødvendig. Mens de satt, fikk deltakerne bare lese, bruke en bærbar datamaskin eller se på TV, men ble ellers bedt om å holde seg så rolig som mulig hele veien. I den første prøven fikk deltakerne konsumere vann ad libitum og volumet som ble inntatt ble replikert for den andre prøven

I hver hovedforsøk ble baseline-blodprøver tatt før det første måltidet og hver time i de følgende 5 timene. Ytterligere blodprøver ble tatt hvert 15. minutt etter det første og andre måltidet. Totalt ble det samlet inn 14 blodprøver for hvert forsøk.

Fettvevskultur og genuttrykk:

Etter fettvevsbiopsi og rensing ble vevet hakket til ca. 5-10 mg og plassert direkte i sterile dyrkningsplater (Nunc, Roskilde, Danmark) med endotelcellebasal media (ECBM) inneholdende 0,1 % fettsyrefritt bovint serumalbumin 100 U ml-1 penicillin og 0,1 mg ml-1 streptomycin (Sigma-Aldrich, Gillingham, Storbritannia). Fettvev ble inkubert med et sluttforhold på 100 mg vev per 1 ml ECBM-medium i 3 timer. En 37°C, 5 % CO2 og 95 ± 5 % relativ fuktighetsinkubator ble brukt (MCO-18A1C CO2 inkubator; Sanyo, Osaka, Japan). Media ble overført til sterile eppendorfer og lagret ved -80°C etter 3 timers inkubering. Omtrent 200 mg fettvev ble homogenisert i 5 ml Trizol i et RNase/DNase-fritt sterilt rør (Invitrogen, Paisley, UK) og lagret ved -80°C før videre analyse.

Eksempelstørrelse:

En tidligere lignende studie rapporterte inkrementelt areal under kurve (iAUC) for insulin under brudd på langvarig sitting sammenlignet med langvarig sitting på henholdsvis 3337 IE L-1 9h-1 og 2470 IE L-1 9h-1. Basert på en antatt SD på 600 IE L-1 9h-1, ville vi kreve at 9 deltakere viser en forskjell i iAUC for insulin med 95 % kraft og 5 % alfa.

Statistikk:

Alle data ble presentert som gjennomsnitt ± standard feil av gjennomsnitt (SEM). Inkrementelt areal under kurve (iAUC) ble beregnet ved hjelp av trapesmetoden og forskjeller mellom forsøk analysert ved bruk av parede t-tester. Glukose, insulin, NEFA, adipokiner og cellekulturresultater ble bestemt ved å bruke en toveis ANOVA med gjentatte mål ved bruk av SPSS versjon 22 (IBM, Armonk, NY, USA). Der det ble funnet signifikante interaksjoner (forsøk × tid), ble en post hoc-analyse brukt ved bruk av t-test med Holm-Bonferroni-korreksjon. Enkelte sammenligninger brukte en t-test eller ikke-parametrisk ekvivalent. Statistisk signifikans ble satt til p ≤ 0,05.