パーソナライズされた膵臓癌ワクチンの開発のための免疫原性ネオエピトープの同定 (CanVac)

背景 膵管腺癌 (PDAC) は、予後が非常に悪い、最も攻撃的な腫瘍タイプの 1 つです。 積極的な治療を行わない場合、転移性 PDAC 患者の平均生存期間は 3 ～ 5 か月です [1]。 外科的および補助療法の現在の進歩は、1970 年代以来、全生存率を改善することに失敗しています。 したがって、従来の化学療法ベースのレジメンとの交差耐性ではない新しい治療戦略が不可欠です。 最近、がん治療における注目は、免疫ベースの戦略に重点を置いています。これらの治療法は、化学療法や放射線療法とは異なるメカニズムを介して作用し、交差耐性のない治療オプションを表すためです [2]。 免疫療法は、腫瘍抗原に対する強力な T 細胞応答を刺激することを目的としています。 しかし、これらの体制の発展には重大な課題が存在します。 これらには、腫瘍の免疫原性が低いこと、および腫瘍内に高度に免疫抑制環境が存在することが含まれます [3、4]。 さまざまな腫瘍ワクチン接種戦略の臨床的可能性は、初期段階の臨床試験で実証されており、PDAC 患者におけるいくつかの有望な免疫学的および臨床的反応があります [5-8]。 理想的な PDAC ワクチンの開発には、まだ多くのハードルを克服する必要があります。 過去のがんワクチン試験の失敗の大部分は、固有の免疫力が弱い不適切な腫瘍抗原の選択に起因する可能性があるため、重要なことは、強力で特異的な免疫応答を誘発する特定の腫瘍抗原を特定する必要がある[9、10]。 ハイスループットプロファイリング技術の現在の進歩により、がん細胞のゲノム状態の迅速な決定が可能になり、個々のミュータノームに関する包括的なデータが利用できるようになりました [11、12]。 所望のHLA分子によって提示され得る合成ペプチドの産生のためのHLA結合能力に基づいて、エクソーム配列決定によって同定されたミスセンス変異を選択することも現在可能である[12、13]。 このプラットフォームの開発により、100 人の PDAC 患者から公開されたデータを分析し [14]、高親和性 HLA-A2 および HLA-DP4 (最も豊富な HLA クラス I および II 分子 [15、16]) を含むデータセットを確立することができました。およびペプチドワクチン候補としての分析のためのHLA-E*01:01およびHLA-E*01:03制限ネオエピトープ。

仮説 配列分析により、患者集団で高頻度に発現し、HLA-A2、HLA-DP4、HLA-E*01 に対する野生型対応物と比較して高い結合親和性を持つネオエピトープのペプチド ライブラリーを開発することができました。 :01 または HLA-*01:03 分子。 これらの多くは、in vitro で T 細胞インターフェロン-γ (IFN-γ) 応答を刺激するのに十分な免疫原性を持ち、in vivo 抗腫瘍応答に変換されると仮定しています。 次に、免疫原性ネオエピトープを、腫瘍溶解性ウイルスなどのアジュバントを使用してペプチドワクチン接種プログラムで組み合わせて、PDAC患者の腫瘍内での標的送達および発現を行い、堅牢で長期的な抗腫瘍反応を刺激することができます。

目的 このプロジェクトの最初の目的は、利用可能なミュータノーム データから選択されたネオ エピトープ候補の in vitro 検証を実行し、健康な個人の末梢血単核細胞 (PBMC) を使用してそれらの免疫原性を決定することです。

研究計画 健康な個人からの PBMC サンプルは、サーモフィッシャー サイエンティフィックから市販されている試薬を使用して HLA タイプされます。 HLA-A2、HLA-DP4、HLA-E*01:01 および/または HLA-E*01:03 陽性サンプルは、利用可能な配列データのバイオインフォマティクス分析後に選択されたペプチドでパルスされます。 サンプル中のＴ細胞によるＩＦＮ－γおよびインターロイキン－２（ＩＬ－２）産生は、ペプチド免疫原性の尺度として、２週間以内に２ラウンドの刺激後にＥＬＩＳＡによって評価される。 免疫原性ペプチドが同定されると、それらの野生型対応物が並行して分析され、変異エピトープに対する特異性が確認されます。 野生型対応物が免疫応答を誘発しない免疫原性ペプチドは、トランスジェニック HLA-A2/HLA-DP4 マウスを使用して in vivo で分析される腫瘍溶解性ウイルスベースのワクチンに含めるために選択されます [17]。