개인 맞춤형 췌장암 백신 개발을 위한 면역원성 신생 에피토프 동정 (CanVac)

배경 췌관 선암(PDAC)은 예후가 극히 불량한 가장 공격적인 종양 유형 중 하나입니다. 적극적인 치료를 하지 않는 경우 전이성 PDAC 환자의 평균 생존 기간은 3-5개월입니다[1]. 1970년대 이후 수술 및 보조 치료의 현재 발전은 전체 생존율을 향상시키는 데 실패했습니다. 따라서 기존의 화학 요법 기반 요법과 교차 저항하지 않는 새로운 치료 전략이 필수적입니다. 최근 암 치료에 대한 관심은 면역 기반 전략에 더욱 집중되고 있습니다. 면역 기반 전략은 화학 요법이나 방사선 요법과 구별되는 메커니즘을 통해 작용하고 비 교차 내성 치료 옵션을 나타냅니다[2]. 면역 기반 요법은 종양 항원에 대한 강력한 T 세포 반응을 자극하는 것을 목표로 합니다. 그러나 이러한 체제의 발전에는 상당한 난관이 존재합니다. 여기에는 종양의 빈약한 면역원성과 종양 내 고도의 면역 억제 환경의 존재가 포함됩니다[3, 4]. 다양한 종양 예방접종 전략의 임상적 잠재력은 PDAC 환자에서 일부 유망한 면역학적 및 임상적 반응과 함께 초기 단계 임상 시험에서 입증되었습니다[5-8]. 이상적인 PDAC 백신의 개발에는 여전히 많은 장애물이 극복되어야 합니다. 결정적으로, 과거 암 백신 시도의 실패는 내재 면역 잠재력이 약한 부적절한 종양 항원을 선택했기 때문에 강력하고 특정한 면역 반응을 이끌어내는 특정 종양 항원을 식별해야 합니다[9, 10]. 개별 뮤타놈에 관한 포괄적인 데이터를 사용할 수 있도록 암 세포의 게놈 상태를 신속하게 결정할 수 있는 고처리량 프로파일링 기술의 현재 발전[11, 12]. 또한 현재 원하는 HLA 분자에 의해 제시될 수 있는 합성 펩타이드 생산을 위한 HLA 결합 능력을 기반으로 엑솜 시퀀싱을 통해 식별된 미스센스 돌연변이를 선택할 수 있습니다[12, 13]. 이 플랫폼의 개발을 통해 100명의 PDAC 환자[14]에서 발표된 데이터를 분석하고 고친화성 HLA-A2 및 HLA-DP4(가장 풍부한 HLA 클래스 I 및 II 분자[15, 16])를 포함하는 데이터 세트를 설정할 수 있었습니다. 및 펩티드 백신 후보로서 분석을 위한 HLA-E*01:01 및 HLA-E*01:03-제한 신생-에피토프.

가설 서열 분석을 통해 환자 집단에서 높은 빈도로 발현되고 HLA-A2, HLA-DP4, HLA-E*01에 대한 야생형 대응물과 비교하여 높은 결합 친화도를 갖는 신생 에피토프의 펩티드 라이브러리를 개발할 수 있었습니다. :01 또는 HLA-*01:03 분자. 우리는 이들 중 다수가 시험관 내에서 T 세포 인터페론-γ(IFN-γ) 반응을 자극하기에 충분히 면역원성이고, 이는 생체 내 항종양 반응으로 전환될 것이라고 가정합니다. 그런 다음 PDAC 환자의 종양 내에서 표적 전달 및 발현을 위한 종양 용해 바이러스와 같은 보조제를 사용하여 강력하고 장기적인 항종양 반응을 자극하는 펩티드 백신 접종 프로그램에서 면역원성 신생 에피토프를 결합할 수 있습니다.

목표 이 프로젝트의 초기 목표는 건강한 개인의 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 사용하여 면역원성을 결정하기 위해 이용 가능한 뮤타놈 데이터에서 선택된 신생 에피토프 후보의 시험관 내 검증을 수행하는 것입니다.

연구 계획 건강한 개인의 PBMC 샘플은 thermofisher Scientific에서 시판되는 시약을 사용하여 HLA 유형이 지정됩니다. HLA-A2, HLA-DP4, HLA-E*01:01 및/또는 HLA-E*01:03 양성 샘플은 이용 가능한 서열 데이터의 생물정보학 분석 후 선택된 펩티드로 펄스될 것입니다. 샘플에서 T 세포에 의한 IFN-γ 및 인터류킨-2(IL-2) 생산은 펩티드 면역원성의 척도로서 2주 내에 2회 자극 후 ELISA에 의해 평가될 것이다. 면역원성 펩티드가 확인되면 야생형 대응물을 동시에 분석하여 돌연변이된 에피토프에 대한 특이성을 확인합니다. 야생형 대응물이 면역 반응을 유발하지 않는 면역원성 펩타이드는 형질전환 HLA-A2/HLA-DP4 마우스[17]를 사용하여 생체 내 분석을 위해 종양 용해 바이러스 기반 백신에 포함되도록 선택됩니다.