EDN と好酸球性食道炎 (OesEDN)

好酸球性食道炎は、食道の機能不全を引き起こす食道粘膜の好酸球性浸潤に続発する、免疫学的およびアレルギー起源の慢性炎症性消化器疾患です。 これは、小児科領域での発生率がここ数十年にわたって上昇している新興疾患であり、年間発生率は10万人あたり3～12人、有病率は10万人あたり22～49人であると推定されています。 これは、消化性食道炎に次いで慢性食道炎の 2 番目に多い原因です。

慢性的な症状（重度の逆流、嚥下障害、食物の詰まりの感覚、食事中に飲み込むために水を飲む必要がある）、または時には急性の症状（例、下痢など）があります。 食事中の突然の宿便、過多の唾液漏を伴う）、緊急内視鏡検査が必要です。 食道線維症、狭窄、または食道穿孔によって合併する場合があります。

好酸球性食道炎の診断は、少なくとも 1 回の食道生検で 15 個を超える好酸球/視野 (倍率 x 400) の証明に基づいて組織学的に行われます。 プロトンポンプ阻害剤（PPI）、立ち退き食事法、局所コルチコステロイド療法、そして最近では免疫療法など、いくつかの治療法が長年にわたって試行され、テストされてきました。 疾患の寛解を確認するため、または治療の変更を正当化するために、定期的に内視鏡による再評価が必要です（新しい治療の導入後は 8 ～ 12 週間ごと、その後は維持治療中または臨床的再発の場合はそれ以前に毎年）。 したがって、患者の経過観察には多数の消化器内視鏡検査が必要であり、小児科ではほとんどが全身麻酔下で行われますが、これは合併症の潜在的なリスクを伴う侵襲的な処置です。

活動性好酸球性食道炎の非侵襲性バイオマーカーを同定できれば、臨床現場により適合し、患者の忍容性がより高い診断および追跡戦略を提案できるようになるだろう。

EDN (好酸球由来神経毒) は、好酸球が活性化されたときに分泌されるタンパク質です。 血清 EDN はアトピーに関して広く研究されています。 好酸球性食道炎では、これは食道生検での好酸球の密度と有意に相関しているようであり、したがって活動性好酸球性食道炎の患者では対照よりも高いと考えられます。 一部のチームは、小児科における好酸球性食道炎の診断においてこのマーカーの感度と特異性を最適化するために、ROC 曲線を使用して血中 EDN のカットオフ値を提案しています。 治療中の患者では、血清 EDN が大幅に減少しているようです。

他の研究では、食道生検に関する EDN に焦点を当てています。 2010年の研究では、免疫蛍光技術を使用して、好酸球性食道炎の追跡調査患者および対照患者からの食道生検における細胞内および細胞外のEDN沈着の分布を評価しました。 EDN 染色はすべての患者からの生検で明確に観察されましたが、対照被験者では存在しないか、非常に弱かったです。 ただし、組織 EDN と好酸球浸潤密度の間の相関関係に関する結論は異なります。

最新のデータは、消化器内視鏡検査中に直接実行されるか、加重口腔食道システムを介して間接的に実行される食道ブラシ EDN に関するものです。 内腔EDNは、寛解期、胃食道逆流症または対照の好酸球性食道炎患者よりも、活動性好酸球性食道炎患者の方が有意に高かった。 それは、PPI 療法に対する反応を予測することさえできます。 EDN および他の管腔内マーカーは、二次性線維症やその他の合併症の発症を含む疾患活動性を予測しました。

尿中 EDN は、アトピー性疾患、特に喘息やアトピー性皮膚炎において分析されています。 これらのアレルギー疾患における好酸球の活性と関連しているようです。 好酸球性食道炎における尿中EDNの研究はありません。

現在まで、異なる EDN アッセイ間の相関関係に関する研究は行われていません。

EDN は有望に思えますが、食道生検での好酸球密度を予測するいくつかのバイオマーカーを組み合わせたモデルの作成を可能にするためには、好酸球性食道炎の活動性と相関する他のバイオマーカーの同定がさらなる課題です。 この目的を達成するには、この病気の免疫学的、アレルギー学的、および代謝学的特徴に関するより正確な知識が非常に貴重であると思われます。 2023年に発表された研究では、食道生検と血液サンプルからの免疫系活性化の分析と、血液サンプルからの非標的メタボロミクス分析が実施されました。 この研究の結果は、好酸球性食道炎に特有の血漿サインがメタボロームデータとサイトカイン情報から特定できる可能性があることを示唆しています。

最後に、微生物叢は、喘息や湿疹など、いくつかの消化器疾患および消化器外のアレルギー性疾患や炎症性疾患の発症に関与していると考えられています。 最近、好酸球性食道炎患者における食道、唾液、および糞便微生物叢の役割を調査した研究は 4 件のみです。 腸内細菌叢の異常は、対照被験者と比較して食道微生物量の増加と特定の種（ヘモフィルス、連鎖球菌）の特定の多さ、唾液細菌の多様性の低下、および患者と対照における糞便微生物叢の類似性を伴うことが記載されています。 それにもかかわらず、食道および/または唾液の微生物叢が炎症や疾患に与える影響を示す直接的な証拠はほとんどありません。

研究者は、この疾患の末梢症状が食道の好酸球性浸潤と相関していると仮説を立てています。 研究者らは、尿中、血清および管腔内のEDN濃度だけでなく、血清および食道のサイトカインプロファイルおよび食道のメタボロミクスも食道生検における好酸球性浸潤と相関し、したがって活動性好酸球性食道炎患者の疾患活動性と相関すると考えている。 寛解期および対照期の好酸球性食道炎患者では、研究者は、活動性好酸球性食道炎患者と比較して、正常または低いEDN値および異なるサイトカインプロファイルが観察されることを期待しています。 研究者はまた、活動性好酸球性食道炎患者における食道および唾液の分泌異常を観察することも期待している。

臨床的見通しの観点から、研究者らは、これらの結果により疾患活動性を予測する非侵襲性バイオマーカーパネルの開発が可能となり、患者のモニタリングに必要な消化内視鏡検査の回数が制限されることを期待している。

この研究は、トルソーAPHP病院の小児栄養・消化器科で追跡調査され、好酸球性食道炎の疑い例の一部として、または好酸球性食道炎の追跡調査中に上部消化管内視鏡検査のために入院した小児患者のコホートを対象に実施される。以前から知られている好酸球性食道炎の症例。 保護者およびお子様の理解度に応じて書面による同意を取得します。

消化器内視鏡検査では、全身麻酔に必要なカテーテル上の血液サンプル、刺激されていない唾液の採取、内視鏡による食道ブラッシング、および追加の 4 つの食道生検が採取されます。 消化器内視鏡検査のための入院中には、尿サンプルと便サンプルも採取されます。

組織学的結果と、好酸球性食道炎の診断と活動性の評価のゴールドスタンダードに相当する生検の好酸球濃度に応じて、被験者は「活動性好酸球性食道炎患者」グループ、「活動性好酸球性食道炎患者」グループのいずれかに分類されます。好酸球性食道炎が寛解している患者」グループ、または「好酸球性食道炎を有さない患者」グループであり、比較対照グループに相当します。 したがって、このグループは事後的に定義されます。

尿、血清、および管腔内食道ブラッシングの EDN 値は、INRAe または Pitié-Salpêtrière で ELISA または qPCR によって測定されます。 総 IgE および特異的 IgE、ファディアトップ®、トリプターゼ、CBC、および好酸球活性化検査は、Groupe Hospitalier de l'Est Parisien 生化学アレルギー研究所で実施されます。 Phadiatop® 検査が陽性の場合、肺炎アレルゲン特異的 IgE のレベルを決定するために、すでに採取された血液に対して追加の検査が実施されます。 血液サンプルと食道生検のサイトカインプロファイルの分析、および非標的メタボロミクス分析は、すべてのサンプルが採取された後、第 2 段階で INRAe で実施されます。

さらに、唾液、食道、糞便の細菌および真菌の DNA の抽出は INRAe で実行され、配列決定は @Bridge プラットフォームで行われます。

消化器内視鏡検査当日、お子様および/またはその保護者は PedsQL® および PEESS のアンケートに記入します。

私たちの主な目的は、尿、血液、および食道ブラッシング中の EDN と、食道生検でカウントされた好酸球性浸潤との相関関係を評価することです。 次に、血液および食道生検中のサイトカインのパネルの濃度、血液および食道生検中のアレルギー感作プロファイル、および食道メタボロミクスの非標的記述がグループ間で比較されます。

我々の第二の目的は、患者と対照間の細菌叢および菌叢の組成、アルファおよびベータ多様性、ならびにそれらと病理との関連を説明するために、これらの同じ患者の食道、唾液および糞便微生物叢を研究し、以下のことを提案することである。好酸球性食道炎の管理において食道および/または唾液の微生物叢を調節することを目的とした代替療法の可能性。 一次および二次結果については以下で詳しく説明します。