EDN 和嗜酸性食管炎 (OesEDN)

嗜酸性粒细胞性食管炎是一种免疫性和过敏性慢性炎症性消化道疾病，继发于食管粘膜嗜酸性粒细胞浸润导致食管功能障碍。 它是一种新出现的疾病，近几十年来在儿科中的发病率一直在上升，估计年发病率为 3 至 12 / 100,000，患病率在 22 至 49 / 100,000 之间。 它是慢性食管炎的第二常见原因，仅次于消化性食管炎。

有慢性症状（严重反流、吞咽困难、食物堵塞感以及进餐时需要喝水才能吞咽），有时也有急性症状（例如吞咽困难）。 进餐时突然食物嵌塞，伴有唾液过多），需要紧急内窥镜检查。 可能并发食管纤维化、狭窄或食管穿孔。

嗜酸性粒细胞性食管炎的诊断是组织学诊断，基于至少一次食管活检显示 > 15 个嗜酸性粒细胞/视野（放大倍数 x 400）。 多年来已经尝试和测试了几种疗法：质子泵抑制剂（PPI）、逐出饮食、局部皮质类固醇疗法以及最近的免疫疗法。 为了确认疾病缓解或证明治疗改变的合理性，需要定期进行内镜重新评估（采用新治疗后每 8 至 12 周一次，然后在维持治疗期间或在临床复发的情况下每年进行一次）。 因此，患者随访需要进行大量消化内窥镜检查，大多数在儿科全身麻醉下进行，这是一种具有潜在并发症风险的侵入性手术。

活动性嗜酸性粒细胞性食管炎的非侵入性生物标志物的鉴定将使我们能够提出更适合临床实践并更好地被患者耐受的诊断和随访策略。

EDN，即嗜酸性粒细胞衍生神经毒素，是嗜酸性粒细胞激活时分泌的一种蛋白质。 血清 EDN 在特应性方面已得到广泛研究。 在嗜酸性粒细胞性食管炎中，它似乎与食管活检中嗜酸性粒细胞的密度显着相关，因此活动性嗜酸性粒细胞性食管炎患者的密度高于对照组。 一些团队甚至使用 ROC 曲线提出了血液 EDN 的临界值，以优化该标记物在儿科诊断嗜酸粒细胞性食管炎时的敏感性和特异性。 接受治疗的患者血清 EDN 似乎显着下降。

其他研究重点关注食管活检中的 EDN。 2010 年的一项研究使用免疫荧光技术评估了嗜酸性粒细胞性食管炎随访患者和对照组食管活检中细胞内和细胞外 EDN 沉积物的分布。 在所有患者的活检中都可以清楚地观察到 EDN 染色，而在对照受试者中则没有或非常弱。 然而，关于组织 EDN 与嗜酸性粒细胞浸润密度之间的相关性的结论不同。

最新数据涉及食管刷 EDN，在消化内窥镜检查期间直接进行或通过加权口食管系统间接进行。 活动性嗜酸性粒细胞性食管炎患者的管腔 EDN 显着高于缓解期嗜酸性粒细胞性食管炎、胃食管反流病或对照患者。 它甚至可以预测 PPI 治疗的反应。 EDN 和其他腔内标志物可预测疾病活动性，包括继发性纤维化和其他并发症的发生。

尿 EDN 已在特应性疾病中进行了分析，特别是哮喘和特应性皮炎。 它似乎与这些过敏性疾病中的嗜酸性粒细胞活性有关。 尚无嗜酸性粒细胞性食管炎中尿 EDN 的研究。

迄今为止，尚未对不同 EDN 测定之间的相关性进行研究。

EDN 似乎很有希望，但与嗜酸性粒细胞性食管炎活动相关的其他生物标志物的鉴定是一个额外的挑战，以能够创建结合预测食管活检中嗜酸性粒细胞密度的多种生物标志物的模型。 为此，更精确地了解这种疾病的免疫学、过敏学和代谢组学特征似乎非常有价值。 2023 年发表的一项研究对食管活检和血液样本中的免疫系统激活进行了分析，并对血液样本进行了非靶向代谢组学分析。 这项研究的结果表明，可以从代谢组数据和细胞因子信息中识别出嗜酸性食管炎特异的血浆特征。

最后，微生物群与多种消化道和消化道外过敏性和炎症性疾病（例如哮喘和湿疹）的发病机制有关。 最近只有四项研究探讨了食管、唾液和粪便微生物群在嗜酸性粒细胞性食管炎患者中的作用。 与对照受试者相比，已描述了生态失调，即食道微生物负荷增加，某些物种（嗜血杆菌、链球菌）特别丰富，唾液细菌多样性较低，患者和对照者的粪便微生物群相似。 然而，几乎没有直接证据证明食道和/或唾液微生物群对炎症和疾病的影响。

研究人员假设该疾病的外周特征与食管嗜酸性粒细胞浸润相关。 研究人员认为，不仅尿液、血清和腔内 EDN 浓度，而且血清和食管细胞因子谱和食管代谢组学都与食管活检中的嗜酸性粒细胞浸润相关，从而与活动性嗜酸性粒细胞性食管炎患者的疾病活动性相关。 在嗜酸性粒细胞性食管炎缓解期患者和对照患者中，研究人员期望观察到与活动性嗜酸性粒细胞性食管炎患者相比正常或较低的 EDN 值以及不同的细胞因子谱。 研究人员还希望观察活动性嗜酸性粒细胞性食管炎患者的食管和唾液生态失调。

就临床前景而言，研究人员希望这些结果能够开发出预测疾病活动性的非侵入性生物标志物组，从而限制监测患者所需的消化内窥镜检查的数量。

该研究将在 Trousseau-APHP 医院儿科营养和胃肠病科对一组儿科患者进行研究，这些患者要么是疑似嗜酸性粒细胞性食管炎病例的一部分，要么是在随访期间住院接受上消化道内窥镜检查。先前已知的嗜酸性粒细胞性食管炎病例。 将获得父母的书面同意，并根据儿童的理解程度获得书面同意。

在消化内镜检查期间，将采集全身麻醉所需的导管上的血样、未刺激的唾液收集、内镜下食管刷洗和 4 次额外的食管活检。 住院期间还将采集尿液样本和粪便样本进行消化内窥镜检查。

根据组织学结果和活检中的嗜酸性粒细胞密度（对应于诊断和评估嗜酸性粒细胞性食管炎活动性的金标准），受试者将被分类为“活动性嗜酸性粒细胞性食管炎患者”组、“活动性嗜酸性粒细胞性食管炎患者”组和“活动性嗜酸性粒细胞性食管炎患者”组。 “患有嗜酸性粒细胞性食管炎缓解期的患者”组，或“无嗜酸性粒细胞性食管炎的患者”组，这将对应于比较对照组。 因此，该组将被后验定义。

尿液、血清和腔内食管刷检 EDN 值将在 INRAe 或 Pitié-Salpêtrière 通过 ELISA 或 qPCR 进行测量。 总和特异性 IgE、Phadiatop®、类胰蛋白酶、CBC 和嗜酸性粒细胞活化测试将在 Groupe Hospitalier de l'Est Parisien 生物化学-过敏学实验室进行。 如果 Phadiatop® 测试呈阳性，将对已收集的血液进行额外测试，以确定肺炎过敏原特异性 IgE 的水平。 一旦采集完所有样本，INRAe 将在第二阶段对血液样本和食管活检的细胞因子谱进行分析，以及非靶向代谢组学分析。

此外，唾液、食道和粪便细菌和真菌 DNA 的提取将在 INRAe 进行，并在 @Bridge 平台进行测序。

在消化内窥镜检查当天，儿童和/或其父母将填写 PedsQL® 和 PEESS 问卷。

我们的主要目的是评估尿液、血液和食管刷检中的 EDN 与食管活检中嗜酸性粒细胞浸润的相关性。 然后，将在各组之间比较血液和食管活检中一组细胞因子的浓度、血液和食管活检中的过敏致敏情况以及食管代谢组学的非针对性描述。

我们的次要目标是研究这些患者的食道、唾液和粪便微生物群，以描述患者和对照之间细菌和真菌菌群的组成、α和β多样性，以及它们与病理学的关系，并提出建议可能的替代疗法旨在调节食管和/或唾液微生物群以治疗嗜酸粒细胞性食管炎。 主要和次要结果详述如下。