SLK, 결막염, 안구건조증의 발병기전에서 사이토카인과 비만세포의 역할
상변연각결막염, 결막결막염, 안구건조증을 포함한 안구표면염증질환의 발병기전에서 사이토카인과 비만세포의 역할
연구자 연구의 구체적인 목표는 다음과 같습니다.
- SLK, 결막충돌증, 건성각결막염(KCS)을 포함한 다양한 안구 표면 장애가 있는 환자의 눈물 샘플을 수집합니다.
- 다양한 안구 표면 장애 사이의 눈물 사이토카인 및 pH 값의 차별적 발현을 평가합니다.
- SLK 및 결막충돌증 환자로부터 외과적 결막 검체를 채취한다.
- SLK에서 비만세포 이동을 유도하는 요인과 비만세포가 어떻게 활성화되는지를 수술 표본과 배양된 섬유아세포를 통해 평가합니다.
연구 개요
상태
상태
정황
정황
상세 설명
상변연각결막염, 결막결막염, 건성각결막염 환자에서 다양한 눈물 사이토카인 수치 검출
- 기저 눈물 샘플은 유리 모세관을 사용하여 내외측 눈물 반월판에서 비외상적으로 수집됩니다. 각막과 결막 표면을 만지지 않도록 주의하십시오. 약 30μl의 눈물 샘플을 얻은 다음 샘플을 1500rpm(225g)에서 10분 동안 원심분리합니다. 눈물 샘플을 마이크로튜브(Eppendorf)에 넣고 -70°C에서 보관합니다. IL-1β, IL-17, TNF-α 및 IFN-γ 수준은 효소 결합 면역흡착 분석 키트로 측정됩니다.
- 결막 검체의 면역조직화학염색 방법 - 필요에 따라 상안구결막절제술과 하안구결막절제술을 받은 SLK 및 결막결막염 환자에게서 결막을 채취한다. 백내장 또는 망막 수술 중 복막 절개술 후 기록된 중복 결막은 정상 대조군으로 사용하기 위해 절제됩니다. 모든 SLK, 결막충돌증 및 대조군의 결막 표본은 일상적인 파라핀 포매 및 헤마톡실린 및 에오신 염색을 위해 병리과로 보내집니다. 수술 표본은 4C에서 1~2일 동안 4% 파라포름알데히드에 넣은 다음 4C에서 1% 인산나트륨 완충액에 보관합니다. 그런 다음 파라핀에 내장됩니다. 조직 접착력을 향상시키기 위해 Vectabond(Vector Laboratories, Burlingame, California, USA)로 전처리된 유리 슬라이드에 5마이크로미터 두께의 절편을 장착합니다. 파라핀 절편을 탈파라핀 처리하고 재수화한 다음 인산염 완충 식염수(PBS; pH 7.4)로 세척합니다. 항원 검색은 절편을 수조에서 0.1% 트립신에 15분 동안 담가 수행합니다. 슬라이드를 3% 과산화수소에 넣으면 내인성 과산화효소 활성이 소멸됩니다. 그런 다음 슬라이드를 혈청으로 차단한 다음 1차 항체와 함께 배양합니다. 1차 항체(TSL 및 SCF)는 4°C에서 밤새 배양됩니다. 그 후, 비오틴이 결합된 2차 항체와 함께 실온에서 60분 동안 배양한다. 또한, Vectastain elite® ABC 키트(Vector labs, CA USA)를 사용하여 아비딘-비오틴 양고추냉이 퍼옥시다제 복합체와의 인큐베이션을 실온에서 30분 동안 수행합니다. 효소가 결합된 위치는 기질 3,3'-디아미노벤지딘(DAKO, CA, USA), 갈색 불용성 침전물을 생성하는 크로모겐의 첨가에 의해 가시화될 것이다. 그런 다음 절편을 헤마톡실린으로 대조염색한 다음 탈수하고 Vecta Mount로 마운팅합니다. 마운팅 매체를 사용하여 슬라이드를 평가했습니다.
연구 유형
연구 유형
등록 (예상)
등록
연락처 및 위치
연구 장소
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Zhongzheng Dist
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Taipei, Zhongzheng Dist, 대만, 100
- National Taiwan University Hospital
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참여기준
자격 기준
자격 기준
공부할 수 있는 나이
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
연구 대상 성별
샘플링 방법
연구 인구
설명
• 파트 I. 눈물 샘플
포함 기준:
- 20-85세
- 상변연각결막염(SLK) 또는 결막충돌증 또는 건성각결막염(KCS) 환자로 진단된 자
제외 기준:
- 임신
3개월 이내 모든 안과 수술
- 파트 2. 외과 결막 표본
포함 기준:
- 20-85세
- 질환군: 내과적 치료에 불응하여 결막절제술을 받는 SLK 또는 결막충돌증 환자
- 통제 그룹: peritomy 후 중복 결막으로 망막 또는 백내장 수술을 받는 환자
공부 계획
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
- 시간 관점: 유망한
연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
주요 결과 측정
결과 측정 |
기간 |
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ELISA로 측정한 눈물 사이토카인 변화
기간: 치료 전 눈물 채취, 1개월 및 6개월 추적 방문
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치료 전 눈물 채취, 1개월 및 6개월 추적 방문
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공동 작업자 및 조사자
수사관
수사관
- 수석 연구원: Fung-Rong Hu, MD, National Taiwan University Hospital
연구 기록 날짜
연구 주요 날짜
연구 시작
연구 시작
기본 완료 (예상)
기본 완료
연구 완료 (예상)
연구 완료
연구 등록 날짜
최초 제출
최초 제출
QC 기준을 충족하는 최초 제출
QC 기준을 충족하는 최초 제출
처음 게시됨 (추정)
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연구 기록 업데이트
마지막 업데이트 게시됨 (추정)
마지막 업데이트 게시됨
QC 기준을 충족하는 마지막 업데이트 제출
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마지막으로 확인됨
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