우유 섭취로 인한 위장관 불편감의 생리학적 바이오마커 규명 (MIDI)

우유 및 유제품 소비와 관련된 소화 장애를 보고하는 개인이 전 세계적으로 증가하고 있지만, 많은 경우 이 상태는 잘 기록된 유당 불내성 또는 카제인 알레르기 진단과 관련이 없습니다. 일부 연구자들은 이러한 장애(질병 진단이 없는 경우)가 우유 소화 중에 형성되는 특정 펩타이드로 인한 것일 수 있다고 가정합니다. 추가 증거는 장 솔 경계 효소의 활성 부족, 장 투과성 변경 및/또는 특정 장내 미생물 구성과 같은 다른 요인이 우유 섭취로 인한 위장(GI) 불편의 시작과 관련될 수 있다는 가설을 뒷받침합니다. . 실제로, 이러한 모든 요인은 소화를 건너뛰고 장 점막을 통과하는 펩티드와 유당의 양과 유형을 조절하여 위장관 운동성과 위장관 호르몬 분비에 영향을 미칠 수 있습니다. 유사하게, 통증 조절 과정뿐만 아니라 섭식 행동의 항상성 및 비항상성 조절에 미치는 영향으로 인해 우유 섭취 후 위장관 증상의 진화에서 엔도카나비노이드 시스템(EC)의 역할을 가설로 세울 수 있습니다.

본 연구에서는 우유섭취로 인한 위장장애로 인한 비습관적 우유소비자(NHMC)인 건강한 피험자를 대상으로 건강하고 습관적인 우유소비자(HMC)와 비교하여 유당과 유단백의 소화율을 알아보고자 한다. 장내 투과성, 장내 미생물 구성 및 피험자의 심리적 웰빙 상태도 두 그룹에서 조사 및 비교됩니다.

모집 전 설문지와 유당 호흡 검사를 기반으로 참가자를 등록한 후 연구 설계에는 장 투과성 검사와 우유 검사가 포함됩니다.

이 연구에 참여하는 피험자의 잠재적 적격성은 지원자의 개인 및 사회 인구학적 데이터, 우유 소비 습관 및 관련 증상에 대한 정보, 건강에 대한 일반 정보(인체 측정, 건강 상태, 흡연 및 알코올 소비 습관), 가정 환경, 유제품 및 소비에 대한 자원봉사자의 고려 정보, 식습관.

정보에 입각한 동의서에 서명할 잠재적 적격 피험자는 Rome Consensus Conference(2009)에서 승인된 프로토콜에 따라 수행된 유당 호흡 검사를 통해 최종 적격성을 평가합니다. GI 증상은 VAS(Visual Analogue Scales)를 통해 호흡 샘플의 H2 측정과 병행하여 테스트 시작부터 최대 24시간 동안 피험자에 의해 기록됩니다.

유당 호흡 테스트 동안 피험자는 신체 활동 설문지(IPAQ의 약식 버전), 삶의 질, 우울증, 불안 및 스트레스(DASS)에 대한 설문지, 반정량적 음식 빈도 설문지(FFQ)를 작성해야 합니다. ), 대변의 빈도와 일관성을 평가하기 위한 King's Stool Chart, 개인의 식습관을 평가하기 위한 Three Factor Eating Questionnaire(TFEQ). 체중과 키의 인체 측정 데이터도 측정됩니다.

유당 호흡 검사 도중 및 이후에 발생한 전반적인 증상은 호흡 샘플에서 측정된 H2 농도와 함께 평가됩니다. 락토스 흡수 장애를 식별하기 위해 기준선에 비해 20ppm의 컷오프 값이 사용됩니다.

이 선택 절차는 자격이 있는 것으로 식별됩니다.

• 호흡 검사(BT-)에서 음성이고 GI 증상(유당 흡수제)을 언급하지 않거나 약간의 경미한 위장관 증상을 언급하는 피험자
• 호흡 검사(BT+)에 양성이지만 증상이 없는 피험자(증상이 없는 유당 흡수 장애자).

한편, 피험자는 다음과 같은 경우 연구에서 제외됩니다.

• 그들은 호흡 검사(BT+)에 양성이며 GI 증상(유당 불내성)을 보고합니다.
• 그들은 호흡 검사(BT-)에서는 음성이지만 "구토" 및 "느슨하고 흐물흐물하거나 묽은 변"과 같은 심각한 GI 증상을 보고합니다.

아래와 같이 2개의 과목군이 구성되면 등록이 종료됩니다.

• 그룹 1, 습관적 우유 소비자(HMC): 우유를 정기적으로 소비하는(>700mL/주) 피험자 20명은 우유 섭취 후 GI 불쾌감을 경험하지 않고 유당 내성 또는 유당 흡수 장애가 있습니다.
• 그룹 2, 비습관적 우유 소비자(NHMC): 우유 섭취 후 위장관 불편으로 인해 정기적으로 우유를 소비하지 않는(< 150 mL/week), 유당 내성 또는 유당 흡수 장애가 있는 피험자 20명.

두 그룹의 모든 피험자에 대해 장 투과성 테스트와 우유 테스트가 수행됩니다. 이 검사는 유당 호흡 검사 후 1주일 후와 그 사이에 1주일 간격으로 일정이 잡힙니다. 피험자는 또한 일반적인 식습관에 따라 배설물 샘플을 수집하도록 요청받을 것입니다.

장 투과성 검사를 위해 대상자는 약물 소비에 대한 지침을 받고 검사 2일 전에 통제된 식단을 따르도록 요청받습니다(우유 및 유제품, 폴리올이 함유된 식품 제외).

단식 대상자는 물 100ml에 락툴로스 5g, 만니톨 2g 및 수크랄로스 2g을 함유한 용액을 마시기 전에 기본 소변 샘플을 수집합니다. 소변은 1ppm의 클로르헥시딘 용액 1mL가 첨가된 두 개의 용기에 0-5시간 및 5-24시간 동안 수집됩니다. 24시간에 걸쳐 수집되어 연구 센터로 전달된 다음 날 소변 샘플을 분주하고(1.5ml) 분석할 때까지 -20°C에서 동결합니다.

우유 테스트 전 주 동안 피험자는 음식 일기를 작성합니다. 또한 우유 검사 전 2일 동안 우유, 유제품 및 우유 단백질을 함유한 식품을 마시지 않도록 지시합니다. 밀크 테스트 당일, 공복 피험자는 실제 식욕 및 위장관 증상에 대한 설문지를 작성하고, 기준 소변 및 혈액 샘플을 수집하고, 손가락을 찔러 공복 혈당을 측정합니다. 그 후 피험자는 10분 이내에 250ml의 우유를 마신 후 특정 시점에서 혈당, 증상, 식욕 설문지, 혈액 샘플 및 소변을 채취합니다. 마지막 채혈 후 피험자는 점심을 제공받고 연구 센터를 떠나기 전에 GI 증상 및 식욕 설문지 작성, 소변 수집, 음식 일지 작성 및 정해진 저녁 식사를 하도록 지시받습니다. 설문지, 일기 및 6-24시간 소변 샘플은 다음날 실험실로 배달됩니다.

-40°C에 보관된 혈액 샘플은 다음에 대해 분석됩니다.

• 아프로티닌으로 전처리된 혈장 샘플에서 위장관 호르몬(인슐린, 위 억제 펩티드(GIP), 글루카곤 유사 펩티드 1(GLP-1), 글루카곤, c-펩티드, 그렐린, 렙틴);
• 엔도카나비노이드 및 N-아실-에탄올아민(EC);
• 카제인 소화 유래 펩티드(베타-카소모르핀 및 우유 단백질에서 유래한 모든 알려진 펩티드);
• 아미노산 프로파일;
• DPPIV 활동;
• 베이스라인 DPPIV 농도.

분취(1.5ml)되고 -40°C에서 냉동된 소변 샘플은 다음을 측정하는 데 사용됩니다.

• 유당, 갈락토오스 + 포도당, 인디칸 배설 수준(우유 검사 후 24시간 이상 수집된 소변의 경우).
• 락툴로스, 만니톨 및 수크랄로스 배설 수준(장투과성 시험 후 24시간 이상 수집된 소변의 경우).

-40°C에 보관된 대변 샘플은 International Human Microbiome Consortium(http://www.human-microbiome.org/)의 표준 운영 절차에 따라 DNA 추출에 사용됩니다. 통계적 분석은 특정 미생물 시그니처와 임상, 식이 및 대사 매개변수 사이의 연관성을 추론하기 위해 가장 적절한 방법으로 수행됩니다.