위 전암성 상태를 역전시키기 위한 피르비늄의 사용

목표:

본 연구의 주요 목적은 위 장화생 및/또는 이형성증이 있는 인간 참가자에서 완전한 장 화생 또는 정상 위 점막으로의 복귀를 위한 피르비늄 사용의 효능 및 안전성에 대한 추가 데이터를 얻는 것입니다. 두 번째 목적은 화생 및/또는 이형성증 환자로부터 유래된 인간 전암성 위양에서 피르비늄 치료의 효과를 평가하고, 이질적인 전암성 세포에서 피르비늄 치료의 표적 효과를 결정하고, 항암제로서 피르비늄 작용의 기능적 메커니즘을 정의하는 것입니다. 약물을 사용하여 GC 위험 예측과 관련된 혈청 바이오마커 수준에 대한 피르비늄의 영향을 확인하고 피르비늄이 위 미생물군집에 미치는 영향을 조사합니다.

연구 설계:

이는 광범위/현저한 장상화생(IM) 및/또는 이형성증이 있는 참가자 50명을 모집하는 것을 목표로 하는 제2상 무작위 임상 시험입니다. 등록 후 적절한 샘플링을 보장하기 위해 수정된 캠브리지 프로토콜을 사용하여 기본 식도위십이지장경검사(OGD)가 수행됩니다. 대부분의 참가자는 기준선에서 조직학을 확인하기 전에 모집되므로 일부 참가자는 기준선에서 IM이 없거나 광범위/표시된 IM이 없거나 이형성증이 없는 것으로 확인되면 연구에서 제외됩니다. 광범위/현저한 위 IM 및/또는 이형성증의 증거가 있는 50명의 참가자는 14일 동안 매일 1:1 무작위 비율로 피르비늄(2mg/kg/일) 또는 위약을 경구 투여받게 됩니다. 참가자는 치료 14일차에 증상 모니터링을 위해 진료소에서 또는 전화를 통해 후속 조치를 받게 됩니다. 참가자는 맹검 상태를 유지하며 연구 팀은 맹검 팀과 맹검 해제 팀으로 나뉩니다. 눈가림이 해제된 팀만이 임상시험의 활성 단계 동안 노출(피르비늄 대 위약)에 접근할 수 있습니다. 무작위 배정 후 치료 마지막 날로부터 최대 1년 동안 총 3회의 후속 연구 방문이 클리닉에 있을 것입니다.

기준:

참가자는 IM 및 이형성증 상태를 확인하기 위해 기준선 OGD 및 생검을 받게 됩니다. 위 점막 생검은 다음과 같이 수집됩니다:

• AL, AG, IA, BL, BG, PP에서 각각 1회 생검을 실시하고 조직학적 검사를 위해 보냈습니다.
• BL의 인접 생검 3개, IA의 생검 1개, AL의 인접 생검 5개, AG의 인접 생검 1개, PP의 인접 생검 2개는 액체 질소에서 급속 냉동됩니다.

위치는 다음과 같이 정의됩니다.

• AL - 유문의 2~3cm 이내에서 유문의 곡률이 적음
• AG - 유문의 2~3cm 이내에서 유문의 더 큰 곡률
• IA - 각절상부
• BL - 말뭉치의 작은 곡률, 각도에서 4cm 근위
• BG - 신체의 큰 곡률의 중간 부분, 심장에서 8cm
• PP - 프레필로러스

기회가 있으면 위액을 섭취하고 위 pH를 측정합니다. 알려진 위 IM 영역의 4개 생검을 사용하여 위 오르가노이드를 생성합니다. 광범위/현저한 위 IM 및/또는 이형성증의 증거가 있는 참가자는 피르비늄 또는 위약 치료군에 무작위로 배정됩니다. 동반 질환, 약물 사용, H. pylori 검사 및 치료 이력, 가족력, 담배 및 알코올 노출, 내시경 데이터, 병리학/조직학 결과를 포함한 임상 데이터는 등록 시 수집됩니다.

초기 IM 병변 부위는 EGGIM II를 표적으로 삼아 위치하며 이는 광범위한 IM과 잘 연관됩니다. 위점막은 HD-WLE, HD-NBI로 관찰됩니다. OGD 절차는 확인 목적으로 기록됩니다. OGD 동안 확인된 모든 점막 병변은 일반적인 임상 실습의 일부로 별도로 생검을 실시하고 조직병리학적 평가를 위해 보내집니다. 냉동 생검 샘플은 고품질 조직 은행에 보관됩니다. 조사관은 위의 프로토콜을 따릅니다. 그러나 환자의 이익이 요구하는 경우 프로토콜에서 벗어날 수 있습니다.

조직학적 평가:

조직학적 평가를 위해 생검은 H&E와 PAS/Alcian blue에 대해 염색됩니다. 또한, 정상 위 계통, 화생(SPEM 및 IM) 및 이형성증의 마커에 대해 면역염색을 수행합니다. 생검에서의 마커 발현은 디지털 영상화 및 정량화를 통해 평가됩니다.

음식 빈도 설문지(FFQ):

참가자는 대변 샘플 수집 후 4주 이내에 기본 방문 시 FFQ를 한 번 완료하라는 요청을 받습니다.

후속 조치:

피르비늄 그룹과 위약 그룹 모두 동일한 후속 절차를 거칩니다. 점막 생검은 다음과 같이 각 후속 감시 OGD에서 수집됩니다.

• AL, AG, IA, BL, BG, PP에서 각각 1회 생검을 실시하고 조직학적 검사를 위해 보냈습니다.
• BL의 인접한 생검 2개, AL의 인접한 생검 4개, PP의 인접한 생검 2개는 액체 질소에서 급속 냉동됩니다.

각 후속 내시경 검사에서 최대 14번의 연구 생검이 실시됩니다. EGGIM 점수가 기록됩니다. 위점막은 HD-WLE, HD-NBI로 관찰됩니다. OGD 절차는 확인 목적으로 기록됩니다. OGD 동안 확인된 모든 점막 병변은 일반적인 임상 실습의 일부로 별도로 생검을 실시하고 조직병리학적 평가를 위해 보내집니다. 냉동 생검 샘플은 고품질 조직 은행에 보관됩니다. 조사관은 위의 프로토콜을 따릅니다. 그러나 환자의 이익이 요구하는 경우 프로토콜에서 벗어날 수 있습니다.

후속 감시 OGD는 치료 7일차, 치료 후 6주 및 치료 후 1년에 수행됩니다. 치료 7일차의 감시 OGD에 대해 ±2일의 창 기간, 치료 후 6주 및 1년의 감시 OGD에 대해 ±2주의 창 기간이 허용됩니다.

증상은 치료 마지막 날(14일)에 진료소 또는 전화 후속 조치를 통해 모니터링됩니다. 알려진 드문 부작용으로는 피부 발진, 햇빛에 대한 민감성, 설사, 메스꺼움/구토, 위경련 등이 있으며 이러한 증상과 기타 증상은 모든 피험자에서 모니터링됩니다.

혈액 수집, 처리 및 분석:

기준선, 치료 7일차, 치료 후 6주 및 치료 후 1년의 각 시점에 각 참가자로부터 최대 20ml의 혈액을 채취합니다. 혈청, 혈장 및 연막이 추출됩니다.

위액, 타액 및 대변 수집:

위액을 채취하고 각 연구 내시경 검사에서 위 pH를 측정합니다(예: 기준선, 치료 7일차, 치료 후 6주 및 치료 후 1년). 타액과 대변은 기준선, 치료 후 6주, 치료 후 1년 등의 시점에 미생물군집 연구를 위한 연구 내시경 참가자로부터도 채취됩니다.

인간 전암 유기체:

연구자들은 이질적인 전암성 세포에서 피르비늄 치료의 표적 효과를 확인하고 항암제로서 피르비늄 작용의 기능적 메커니즘을 정의하는 것을 목표로 2상 임상 시험에 모집된 환자로부터 추출된 인간 오가노이드를 사용하여 생물학적 연구를 수행할 것입니다.

혈청 바이오마커 프로파일링:

혈청에서 총 RNA를 분리하여 cDNA로 변환한 후 정량화합니다. 기술적 및 생물학적 변이를 표준화한 후 표적 miRNA 발현 수준을 분석하여 건강한 상태와 질병 상태 사이에서 가장 높은 식별력을 갖는 miRNA 패널을 식별합니다.

미생물군 분석:

조직, 위액, 타액 및 대변은 IM 진행/퇴행에서 미생물-숙주 상호 작용을 연구하기 위해 차세대 메타게놈 시퀀싱 및 직접 배양학을 겪게 됩니다.

단일 세포 분석:

조직을 차가운 조직 보관 용액에 넣고 효소 분해를 사용하여 단일 세포로 분리한 후 트리판 블루 염색을 수행하여 세포 생존력을 확인합니다. 그런 다음 해리된 세포는 scRNA-seq, scDNA-seq, scATAC-seq, 단일 세포 면역 프로파일링 및 기타 단일 세포 관련 기술(심층 통합 전산 데이터 분석과 함께 제공)과 같은 다양한 단일 세포 플랫폼에 사용됩니다. 각각의 생물학적 측정. 이 외에도 조직은 여러 게놈 플랫폼(예: 엑솜 시퀀싱 및 로우 패스 시퀀싱 등) 및 면역조직학적 플랫폼.

샘플 크기 계산:

48명의 참가자(그룹당 24명)의 표본 크기는 치료군(피르비늄)과 대조군(위약) 그룹 간에 위 장화생(1차 평가변수)이 감소한 참가자 비율에서 30%의 차이를 탐지해야 합니다. 0%에 가까운 참가자가 위 장화생이 감소하고 20%의 잠재적 탈락률이 있다고 가정할 때 20% 편측 제1종 오류율에서 80% 검정력입니다. 연구 설계를 2상 스크리닝 시험 설계라고 하며, 이는 치료가 실제로 효과적임을 감지할 확률이 80%이며, 연구 결과가 치료에 유리한 경우 3상 시험에서 추가 조사할 가치가 있습니다. 모집 대상은 48명에서 50명으로 늘어났습니다.

통계 분석:

(가) 일반적인 고려사항

연구자들은 대조 위약과 비교하여 피르비늄(14일 동안 경구 2mg/kg/일)이 위 IM이 절대 50% 감소할 것이라고 가정합니다. 이에 따라 진행성 위 IM 환자의 평균 75.6% +/- 8.4%( SD) 위 생검에서 IM이 평균 14% +/- 8.2%(SD) 존재하는 경증 위 IM 환자와 비교하여 생검에서 IM 존재.

연속 변수는 평균, 중앙값, Q1 및 Q3, 최소값 및 최대값, 표준 편차를 포함한 기술 통계를 사용하여 요약됩니다. 범주형 변수는 백분율과 빈도를 사용하여 요약됩니다. 모든 신뢰구간은 95%입니다.

(B) 효능 분석

모든 효능 분석은 치료 의도 집단을 기반으로 수행됩니다. 위 장화생(및/또는 완전한 장 화생 또는 정상 위 점막으로 복귀하기 위한 이형성증)이 감소한 환자 비율의 1차 평가변수는 치료군과 위약군에 대해 별도로 계산됩니다. 백분율의 차이는 95% 정확한 신뢰 구간과 함께 표시됩니다. 연구의 탐색적 성격을 고려하여 p-값은 보고되지 않습니다. 이진 결과가 있는 2차 평가변수는 1차 평가변수와 유사하게 분석됩니다. 2차 연속 종료점은 추적 시점의 기준선 대비 평균 변화로 표시됩니다. 그룹 간 평균값의 차이는 95% 신뢰 구간과 함께 각 추적 시점에 표시됩니다.

(다) 안전성 분석

모든 안전성 분석은 치료받은 모집단을 기준으로 제시됩니다. 이상사례 및 심각한 이상사례는 각 유형의 이상사례 및 심각한 이상사례를 경험한 피험자의 수와 함께 그룹과의 관계 및 심각도와 함께 개수 및 백분율을 사용하여 표시됩니다. 실험실 결과는 각 그룹에 대한 비정상 및 임상적으로 중요한 결과의 비율과 함께 각 평가 시점의 평균값과 함께 표시됩니다.

(D) 중간분석

공식적인 중간 분석은 계획되어 있지 않습니다. 그러나 주임시험자는 정기적으로 맹검 방식으로 안전성 데이터를 모니터링합니다. NUH 내시경 센터 소장, NUH 위장병학 및 간학 부서장, NUH 위장병학 및 간학 부서 안전 책임자로 구성된 위원회에서 안전 데이터를 정기적으로 모니터링합니다.