폐경 후 출혈이 있는 여성의 환자 채취 소변 및 질 검체와 임상의 채취 자궁경부 검체를 이용한 자궁내막암 위험 계층화를 위한 DNA 메틸화 마커 평가

배경:

자궁내막암(EC) 발생률은 증가하고 있으며 전 세계 여성에서 네 번째로 흔한 암 유형으로 연간 약 417,000건의 새로운 사례와 90,000명의 사망자가 발생합니다. 더욱이, EC는 덴마크를 포함한 선진국에서 가장 흔한 부인과 암으로 연간 약 800건의 새로운 사례와 90명의 사망자가 발생합니다. 진단이 늦은 EC 단계의 여성에 대한 예후가 좋지 않기 때문에 조기 진단이 필수적입니다. EC에 대한 선별 검사는 존재하지 않으며 가장 흔하게 관찰되는 임상 증상은 폐경 후 출혈(PMB)로, 폐경 후 여성의 약 11%에 영향을 미치는 흔한 상태입니다. EC 사례의 90%가 PMB에 선행하기 때문에, 덴마크의 모든 PMB 여성은 암 환자 경로를 통한 전문 부인과 치료 의뢰가 지시되어 여성들의 불안과 높은 의료 비용을 초래합니다. 그러나 PMB를 나타내는 여성 중 단지 5-10%만이 EC를 가지고 있습니다. 전 세계적으로, 자궁내막의 질식 초음파(TVUS) 평가(기준: 두께 ≥5mm 및/또는 자궁강의 불규칙한 안감)는 암 위험이 가장 높아 자궁내막 생검(자궁경 검사 유무에 관계없이)이 필요한 PMB 여성을 식별하는 데 사용됩니다. TVUS 평가는 매우 높은 민감도(94.8%)를 가지지만 낮은 특이도(51%)로 인해 건강한 여성에서 불필요한 침습적 시술이 많이 발생합니다. 더욱이, 진단 프로그램은 초음파 평가, 자궁내막 채취 및 조직병리학적 검사를 위한 숙련된 전문가에 의존합니다. 이는 EC 진단을 돕기 위한 더 간단하고, 비침습적이며, 사용자가 제공할 수 있고, 더 특이적인 검사에 대한 임상적 긴급하고 충족되지 않은 필요를 강조합니다.

이 연구는 환자가 수집한 소변 및 질 검체에서의 DNA 메틸화 검사가 EC 위험을 결정하는 임상적으로 안전한 비침습적 대안인지 여부를 규명하는 것을 목표로 합니다. 암 특이 유전자의 높은 DNA 과메틸화 수준을 검사하는 것은 자궁경부암 및 자궁내막암을 포함한 조기 암을 검출하기 위한 유망한 바이오마커를 제공하는 것으로 입증되었습니다. DNA 과메틸화는 종양 억제 유전자의 침묵과 연관되어 암 발생에 기여합니다. 생물학적으로, 질 및 소변 물질을 DNA 메틸화 검사로 EC 검출에 사용할 수 있는 능력은 EC 유래 DNA 및 세포 파편의 국소적 박리로 질 분비물과 소변으로 들어가고, 종양에서 박리된 순환 DNA의 신장을 통한 배설로 소변으로 들어가기 때문입니다.

주로 소규모 개념 증명 및 환자-대조군 연구에서 혈장, 자가 수집 질 검체 및 의사가 수집한 자궁경부 도말 검체에서 DNA 메틸화 검사를 사용하여 EC를 검출하는 것이 가능함을 보여주었습니다. 그러나, 질 검체 및 소변에서의 DNA 메틸화 분석의 진단적 가치를 EC에 대한 액체 생검으로 보고한 첫 논문은 공동 지도교수인 Steenbergen 교수에 의해 작년에 발표되었습니다. 여기서, 환자-대조군 데이터는 환자가 수집한 소변 및 질 검체에서 EC 특이 DNA 메틸화 마커의 우수한 진단 성능을 보여주었으며, CDH13, GHSR, SST, CDO1, ZIC1을 포함하는 마커 패널을 사용한 EC 검출에 대한 민감도 89-90% 및 특이도 90-92%를 나타냈습니다.

단 하나의 전향적 코호트 연구만이 45세 이상의 이상 자궁 출혈 여성에서 EC의 유무를 검출하는 측면에서 의사가 수집한 자궁경부-질 검체에서의 DNA 메틸화 검사의 진단 성능을 기존의 TVUS 평가와 비교했습니다. 결과는 WID-qEC DNA 메틸화 검사(마커: ZSCAN12 및 GYPC)가 TVUS 평가와 비교하여 동등한 민감도(90.9%)와 우수한 특이도(92.1 대 79.1%)를 가짐을 입증했습니다.

그러나, 이는 환자가 수집한 소변 및 질 검체에서의 DNA 메틸화 검사를 TVUS 평가와 비교하는 첫 연구가 될 것입니다.

연구 설계: 비교 진단 정확도 연구로, 진단 시점의 진단 검사 방법과 2년 후의 장기적 안전성을 비교합니다.

재료 및 방법:

질, 소변 및 자궁경부 검체는 네덜란드 암스테르담 대학 의학센터의 Steenbergen 교수 실험실에서 정량적 메틸화 특이 PCR(qMSP)을 사용한 DNA 메틸화 검사 분석을 위해 발송될 때까지 Randers 지역 병원(RHR) 병리학과의 생물은행에 보관됩니다. 모든 검체는 메틸화 마커에 대해 검사될 것이며, 질 검체용 3개(CDO1, GHSR, ZIC1), 소변용 3개(GHSR, CDH13, SST), 자궁경부 검체용 3개(CDH13 + CDO1 + ZIC1)입니다. TVUS 평가 및 자궁내막 생검 결과는 전국 덴마크 병리학 데이터뱅크와 덴마크 시민 등록 시스템을 통해 환자와 연결된 전자 환자 기록에서 검색될 것입니다. 덴마크에서는 모든 거주자가 고유한 10자리 코드(CPR 번호)를 가지며, 모든 건강 데이터가 이에 연결됩니다.

목표:

1. 폐경 후 출혈 여성 중 EC를 검출하기 위해 환자가 수집한 완전 배뇨 소변 및 질 검체, 그리고 의사가 수집한 자궁경부 검체에서의 DNA 메틸화 검사의 진단 정확도를 결정하고, 2) DNA 메틸화의 진단 검사 정확도를 현재의 TVUS를 이용한 진단 평가와 비교합니다.
2. 소변, 질 및 자궁경부 검체와 TVUS를 포함한 진단 평가 유형에 대한 선호도와 경험을 평가합니다.

가설:

1. 소변 검체에서의 DNA 메틸화 검사는 TVUS와 비교하여 동등한 민감도와 우수한 특이도로 EC를 검출할 수 있으며, 질 및 자궁경부 검체에서의 DNA 메틸화 검사보다 높은 정확도를 가질 것입니다.
2. 소변 검체에서의 DNA 메틸화 분석은 2년 후 TVUS와 동등하지만 질 및 자궁경부 검체보다 더 나은 장기적 음성 EC 위험을 가질 것입니다.

연구 계획 및 실현 가능성 이 연구는 대중 보건 프로그램 학과, RHR 병리학과와 협력하여 수행되며, 중앙 덴마크 지역(Randers 및 Aarhus)과 남부 덴마크 지역(Odense)의 부인과 부서가 등록 장소로 참여합니다. 최신 실험실 시설은 암스테르담 UMC의 Steenbergen 교수 실험실에 구비되어 있어 연구의 실현 가능성을 지원합니다.

전망 및 의사소통 성공한다면, 이 연구는 국제적 영향을 미치고 암 환자 경로를 통한 침습적 자궁내막 생검이 필요한지 여부를 PMB 여성들 사이에서 구분하는 새로운 진단 도구를 개발할 것입니다. 이는 적시 진단을 용이하게 하고, 환자들의 불안을 낮추며, 의료 시스템에 대한 부담을 줄일 것입니다. 결과는 국제 동료 검토 저널에 게재되고 컨퍼런스에서 발표되며, 박사 학위 논문으로 마무리될 것입니다. 결과는 관련 임상 포럼에 배포되고 국가 및 국제 지침에 구현될 것입니다.