자가 말초혈액 줄기세포를 이용한 다발성 경화증 환자의 외래 조혈 이식술

다발성 경화증(MS)은 중추신경계(CNS) 미엘린의 파괴를 유발하는 만성 염증성 쇠약성 질환으로 축삭 손상 정도가 다양합니다. 주로 젊은 성인에게 영향을 미치며 남성보다 여성에서 2배 더 흔합니다(1). 1990년대에 발표된 연구는 동물 모델을 가져왔고 조혈 줄기 세포 이식(HSCT)이 자가면역 질환의 예방 및 치료에 유용하다는 이론적 고려 사항을 제시했으며 일부 환자의 임상 반응은 조혈 줄기 세포 이식 후 고용량 화학 요법에 이어 조혈 줄기 세포 구조를 "재설정"할 수 있음을 시사했습니다. " 자가반응성 클론의 제어를 통한 면역학적 변화, 면역 재구성 후 면역학적 내성(2); 이것은 HSCT가 MS에 대한 실행 가능한 치료 옵션이 될 수 있다는 결론을 이끌어 냈습니다(1-6). 자가 조혈 모세포 이식은 1996년부터 MS 환자에게 시행되었으며 전 세계적으로 700건 이상의 조혈 모세포 이식이 시행되었습니다(1-6). 대부분의 환자는 소규모 시험 또는 다기관 연구에서 치료를 받았습니다. 후향적 분석에서 이식 후 5년 이상의 무진행 생존이 관찰되었으며, 신경학적 결과는 재발 완화형 환자 및/또는 자기 공명 영상(MRI ) 이식 전 스크리닝 동안. 특히 공격적인 형태의 MS에서 좋은 결과에 대한 보고는 두드러진 염증 활동을 보이는 MS 환자에서 조혈모세포이식의 효과를 강화합니다. MS에 대한 조혈모세포이식의 이식 관련 사망 위험은 일반적으로 매우 높은 것으로 간주되었지만 2001년 이후 1.3%(2-6)로 감소했으며, 이는 아마도 컨디셔닝 요법의 변화로 인한 독성 감소의 결과일 것입니다. 유럽에서 700개 이상의 다발성 경화증 자가 이식에 대한 최근 데이터는 5년 동안 92%의 전체 생존율과 46%의 무진행 생존율을 보여 주었으며 사망 및 이환율의 주요 원인은 자가면역 질환의 재발입니다(2 -6). 컨센서스는 기존 요법에 반응하지 않는 진행성 다발성 경화증 환자와 EDSS(Expanded Disability Status Scale)(1) 3.0~6.0 사이에서 조혈모세포이식(HSCT)의 적응증을 제공합니다. 이식으로 혜택을 받을 수 있는 질병의 형태는 다음과 같습니다: 재발성 완화, 1차 또는 2차 진행성, 그리고 "악성" 형태(이식 표시 시 염증 활동의 증거가 있는 경우).

1993년부터 우리 그룹은 절차의 독성을 줄이고 비용을 줄이기 위해 새로운 방법을 사용하여 HSCT 실행에 참여했습니다(7-14). 우리는 급성 백혈병, 만성 백혈병, 재생불량성 빈혈, 골수종, 림프종, 골수이형성증 및 다발성 경화증을 포함한 자가면역 질환과 같은 다양한 질병에 대해 400개 이상의 HSCT를 수행했습니다. 자가 조혈모세포이식의 하위 집합 내에서 우리 방법의 두드러진 특징은 우리가 외래 환자 기준으로 수행하고(8-9, 15-16) 조혈 세포의 생존력을 증가시키기 위해 조혈 세포를 동결 및 해동하는 것을 피한다는 것입니다. 이식하고 비용을 줄이기 위해(8-9, 15-16) 우리는 항상 말초 혈액 줄기 세포(PBSC)를 사용합니다. 이러한 모든 변화는 개발 도상국에서 널리 퍼진 것과 같이 소외된 환경에 사는 개인에게 제공할 수 있는 저렴한 절차로 자가 이식의 관행을 우리 손으로 바꾸었습니다(17). 자가 이식 혈액 악성 종양(8-9, 15) 경험을 얻은 후 우리는 악성 질환에 사용되는 자가 이식 컨디셔닝 요법의 변형을 사용하여 다발성 경화증 환자에게 동결 보존되지 않은 자가 조혈 줄기 세포를 이식하는 프로그램에 참여하는 것을 목표로 합니다.

재료 및 방법

1. 환자:

   HSCT를 위해 센터에 의뢰된 MS 환자는 전향적으로 연구에 참여하게 됩니다. 재발 완화(RRMS) 과정, 이차 진행(SPMS) 또는 일차 진행(PPMS)이 있는 개인. 환자는 70% 이상의 Karnofsky 수행 상태(18)와 6 이하의 EDSS 점수(1)를 가져야 합니다. 이 연구는 Clinic Ruiz의 윤리위원회의 승인을 받았으며 모든 환자는 가능한 합병증 절차에 대해 충분히 숙지한 후 동의서에 서명했습니다.

2. 말초혈액 줄기세포 동원 및 성분채집술:

   PBSC 동원 일정은 시클로포스파마이드(Cy) 및 필그라스팀(과립구 콜로니 자극 인자, G-CSF)으로 수행되었습니다. 정맥 Cy(50mg/kg)는 -11일과 -10일에 120분 동안 전달되었습니다. 피하 G-CSF(10 μg/kg/b.i.d.)는 -9일에서 -1일 사이에 전달되었습니다. Amicus 기계(Fresenius Kabi, Deerfield, IL, USA) 또는 Spectra Optia 기계(Terumo BCT, Lakewood, CO, USA) 및 Spin-Nebraska 프로토콜 [19]. 성분 채집 목적은 최소 1 × 106개의 생존 가능한 CD34+ 세포/kg에 도달하는 것이었습니다. 말초 혈액의 CD34+ 세포는 성분 채혈 절차 전에 측정되지 않았습니다.

3. 컨디셔닝 및 자가 이식:

   외래 환자로서 -11일, -10일, -2일 및 -1일에 120분 동안 Cy(50mg(Kg)) 정맥 투여 후 MESNA(180분 동안 1000mg/m2), 온단세트론 8mg, 덱사메타손 4mg 및 판토프라졸 40mg. 정맥 주사 후 온단세트론(화학요법 후 12시간마다 4mg), 경구용 cotrimoxazol(24시간마다 800/160mg), 경구용 fluconazole(200mg) 및 경구용 acyclovir(400mg씩 12시간)를 모든 환자에게 사용한다. 과립구가 0.5 x 109/L보다 클 때까지; 이 기간 동안 모든 환자는 48시간마다 실험실 검사 및 임상 연구를 받게 됩니다. 과립구 회복 후, 환자에게 리툭시맙(3시간 동안 총 1000mg 용량)을 투여하고, 이후 6개월 동안 cotrimoxazol 800/160mg을 주 3회, acyclovir 800mg을 매일 투여합니다.

4. Apheresis 제품 보존, 연구 및 주입:

성분채집술 제품과 1ml 분취량은 ACD-A(Baxter Healthcare, Deerfield IL)에서 4oC, 가스 불투과성 폴리염화비닐 플라스틱 필름으로 구성된 300ml 이동 팩(Baxter Healthcare, Deerfield IL)에 최대 72일 동안 보관했습니다. 시간. 전체 백색 단핵 세포(MNC) 및 CD34 양성 세포의 계수는 EPICS Elite ESP 장치(Coulter Electronics, Hialeah, FL)에서 유세포 분석법(20)에 의해 수행되며, 후자의 하위 집단에는 항-CD34 단일클론 항체 HPCA를 사용합니다. -2(Becton Dickinson, San José CA), 전방 및 90° 각도 광산란에 따른 요오드화 프로피듐-제외 CD45(+) MNC 모집단의 게이팅. MNC의 추가 생존력 연구에서는 유세포 분석기에서 요오드화 프로피듐 배제 및 항세포 항체를 사용합니다. 퍼지 절차는 수행되지 않습니다. -2일과 -1일에 얻은 성분채집 제품은 기존 혈액은행 냉장고에 보관 후 각각 0일과 +1일에 환자에게 재주입한다.