공통 가변성 면역 결핍의 진단 개선

박테리아 및 바이러스 감염에 대한 증가된 감수성은 특징적인 1차 면역결핍(PID)입니다. Ig 대체(SCIg 또는 IVIg)로 치료해야 하는 가장 일반적인 PID는 저감마글로불린혈증과 백신 항원에 대한 결함 반응의 존재로 진단되는 공통 가변성 면역 결핍증(CVID)입니다. 진단 전에 CVID 환자는 종종 면역억제를 필요로 하는 자가면역 또는 화학요법을 필요로 하는 암을 개발합니다. 불행하게도, 면역억제제, 스테로이드 또는 화학요법으로 치료받은 성인에서 CVID를 진단하는 데 어려움이 발생하여 이러한 환자에서 적시에 Ig 대체 요법을 사용하지 못합니다. 게다가 CVID는 어린 아이들에게서 진단하기 어렵습니다. 엑솜 시퀀싱 및 기타 유전적 방법은 지금까지 CVID에 대한 명확한 단일 유전자 원인을 식별하는 데 실패했습니다. 동시에 STAT1, STAT3, NFKB, PI3K 등을 포함한 신호 경로의 장애가 있는 환자는 임상적 항체 결핍이 있어 신호 경로를 검사함으로써 연구자들이 CVID의 징후를 발견할 수 있음을 시사합니다. 연구자들은 CVID에서 인간 면역 반응의 기능적 결함을 연구하기 위해 광범위하고 새로운 스크린을 사용할 것을 제안합니다. CyTOF(time-of-flight mass cytometry)와 phospho-specific 항체를 사용하여 연구자들은 순환하는 모든 선천성 및 적응성 면역 세포 유형의 주요 신호 경로를 한 번에 검사하여 다양한 반응에 대한 신호 분자의 비정상적인 인산화를 식별합니다. 정식 자극. 이 방법은 검사된 신호 반응이 생물학적으로 면역 억제된 표적의 상류에 있기 때문에 화학 요법이나 면역 억제에 둔감하면서 면역 반응의 신호 결함을 식별하기 때문에 혁신적입니다. 우리의 접근 방식은 CVID 진단을 용이하게 하기 위한 새로운 "신호 지문"을 생성합니다. CVID의 기능적 결함에 대해 얻은 지식이 전체 엑솜 시퀀싱과 결합될 때 감염에 대한 인간 면역 반응에 대한 일반적인 이해를 향상시킬 것이기 때문에 우리의 제안은 또한 영향력이 있습니다.

두 가지 주요 목표가 있습니다: 1) CVID 환자와 비교하여 다양한 연령대의 건강한 대조군을 연구하고, 또한 현재 알려지지 않은 연령에 따라 면역 신호 반응이 어떻게 변하는지에 대한 새로운 정보를 생성하고, 2) CVID 환자를 연구하여 진단 및 치료를 가속화할 수 있는 일관된 비정상적인 신호 반응을 식별합니다.

연구 설계: 조사관은 항체 결핍증(CVID) 환자와 건강한 대조군인 두 코호트 사이에서 단일 채혈을 통한 관찰 사례 대조군 연구를 제안합니다. 방법: 50명의 CVID 환자(성인 및 어린이)가 UCLA의 면역학 클리닉에서 동의를 받습니다. 건강하고 연령과 성별이 일치하는 통제가 동시에 추구될 것입니다(100). UCLA에서 phospho-CyTOF로 즉시 분석할 < 5mL의 혈액을 한 번 채혈합니다. 게놈 DNA는 분석된 샘플 및 서열로부터 준비될 것입니다.

이 화면은 모든 순환 면역 세포 유형(CD4 및 CD8 T 세포, B 세포, NK 세포, 단핵구, 대식세포, 호중구, 호산구 및 DC)의 인산화를 한 번에 검사합니다. 피험자 및 대조군의 전혈을 일부로 나누어 각 부분을 사이토카인, TLR 작용제, 항-TCR 또는 항-BCR 항체, PMA로 자극하거나 자극하지 않은 상태로 둡니다. 처리된 세포는 표면 염색, 고정, 투과화 및 12가지 신호 인산화 단백질에 대해 세포 내 염색된 다음 50개 이상의 매개변수를 동시에 측정할 수 있는 CyTOF로 분석됩니다.