Améliorer le diagnostic du déficit immunitaire commun variable

Une susceptibilité accrue aux infections bactériennes et virales est la caractéristique des immunodéficiences primaires (IDP). Le déficit immunitaire commun variable (DICV) est le DIP le plus courant nécessitant un traitement par substitution d'Ig (SCIg ou IgIV), qui est diagnostiqué par la présence d'une hypogammaglobulinémie et de réponses défectueuses aux antigènes vaccinaux. Avant le diagnostic, les patients CVID développent souvent une auto-immunité qui nécessite une immunosuppression ou des cancers qui nécessitent une chimiothérapie. Malheureusement, des difficultés surviennent pour poser le diagnostic de CVID chez les adultes traités avec des médicaments immunosuppresseurs, des stéroïdes ou une chimiothérapie, empêchant l'utilisation en temps opportun des thérapies de remplacement des Ig chez ces patients. De plus, le CVID est difficile à diagnostiquer chez les jeunes enfants. Le séquençage de l'exome et d'autres méthodes génétiques n'ont jusqu'à présent pas réussi à identifier les causes monogéniques claires du CVID. Dans le même temps, les patients présentant des dérèglements des voies de signalisation, notamment STAT1, STAT3, NFKB, PI3K et d'autres, présentent un déficit clinique en anticorps, ce qui suggère qu'en examinant les voies de signalisation, les enquêteurs pourraient trouver des signes de CVID. Les enquêteurs proposent d'utiliser un nouveau crible large pour étudier les défauts fonctionnels des réponses immunitaires humaines dans CVID. À l'aide de la cytométrie de masse à temps de vol (CyTOF) et d'anticorps phospho-spécifiques, les chercheurs examineront simultanément les principales voies de signalisation de tous les types de cellules immunitaires innées et adaptatives en circulation afin d'identifier la phosphorylation anormale des molécules de signalisation en réponse à une variété de stimulations canoniques. Cette méthode est innovante car elle identifie les défauts de signalisation de la réponse immunitaire tout en étant insensible à la chimiothérapie ou à l'immunosuppression, car les réponses de signalisation examinées sont biologiquement en amont des cibles immunosupprimées. Notre approche génère une nouvelle "empreinte digitale de signalisation" pour faciliter le diagnostic de CVID. Notre proposition a également un impact, car les connaissances acquises sur les défauts fonctionnels du CVID, lorsqu'elles sont combinées avec le séquençage de l'exome entier, amélioreront la compréhension générale de la réponse immunitaire humaine aux infections.

Il y a deux objectifs principaux : 1) étudier des sujets témoins en bonne santé à travers une variété d'âges pour les comparer aux patients CVID, et en outre générer de nouvelles informations sur la façon dont les réponses de signalisation immunitaire changent avec l'âge, ce qui est actuellement inconnu ; et 2) étudier les patients CVID pour identifier les réponses de signalisation aberrantes cohérentes qui permettront l'accélération du diagnostic et du traitement.

Design de l'étude : Les investigateurs proposent une étude observationnelle cas-témoins avec un seul prélèvement sanguin parmi deux cohortes, des patients présentant un déficit en anticorps (CVID) et des témoins sains. Méthodes : Cinquante (50) patients CVID (adultes et enfants) seront acceptés à la clinique d'immunologie de l'UCLA. Des témoins sains, appariés selon l'âge et le sexe seront recherchés en même temps (100). Il y aura un prélèvement sanguin de < 5 ml de sang à analyser immédiatement par phospho-CyTOF à l'UCLA. L'ADN génomique sera préparé à partir d'échantillons et de séquences analysés.

Cet écran examine la phosphorylation de tous les types de cellules immunitaires en circulation à la fois (cellules T CD4 et CD8, cellules B, cellules NK, monocytes, macrophages, neutrophiles, éosinophiles et DC). Le sang total des sujets et des témoins sera aliquoté en portions, et chaque portion sera stimulée avec des cytokines, des agonistes TLR, des anticorps anti-TCR ou anti-BCR, PMA, ou laissée non stimulée. Les cellules traitées seront colorées en surface, fixées, perméabilisées et colorées de manière intracellulaire pour 12 phospho-protéines de signalisation, puis analysées par CyTOF, qui permet de mesurer plus de 50 paramètres simultanément.