ICSI 결과에 다른 정자 처리 방법의 영향.
ICSI 결과에서 다양한 정자 처리 방법(Swim up, Zeta, Sperm Gradient Centrifugation)의 영향. "정자 DNA 관점"
연구 개요
상세 설명
연구 유형
등록 (실제)
단계
- 2 단계
- 3단계
연락처 및 위치
연구 장소
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Qalubiya
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Banha, Qalubiya, 이집트, 13512
- Ahmed Saad
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참여기준
자격 기준
공부할 수 있는 나이
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
연구 대상 성별
설명
포함 기준:
- 2년 동안 원인 불명의 불임 부부
- 나이 20세 ~ 37세
제외 기준:
- 자궁내막증 사례
- 자궁 요인
공부 계획
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
- 주 목적: 기초 과학
- 할당: 무작위
- 중재 모델: 병렬 할당
- 마스킹: 삼루타
무기와 개입
참가자 그룹 / 팔 |
개입 / 치료 |
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활성 비교기: 스윔업 방법
멸균된 2mL 피펫을 사용하여 부피를 측정합니다. 플라스틱 컵에서 멸균된 15mL 원추형 원심분리기 튜브로 검체를 옮깁니다.
검체를 동량의 정자 세척 배지와 부드럽게 섞습니다.
튜브를 1500rpm에서 10분 동안 원심분리합니다. 펠릿을 방해하지 않고 상층액을 조심스럽게 흡인하고 펠릿을 50mcm의 신선한 세척 매체에 재현탁한 다음 0.5ml의 세척 매체를 표면에 부드럽게 놓습니다.
튜브를 45° 각도로 1시간 동안 인큐베이션하여 37°C 인큐베이터의 수직 랙에서 스윔업합니다.
잠복기 후 둥근 바닥 튜브에서 전체 상층액을 흡인합니다.
분리된 정자의 분취량을 DNA 단편화에 대한 할로스펌 분석으로 분석했습니다. 동일한 상청액의 다른 분취량을 ICSI에 사용한 다음 수정, 분열, 포배, 임신 및 착상 비율을 표로 만들고 통계적으로 테스트했습니다.
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ICSI에 가장 적합한 정자를 선별하기 위한 다양한 정자 처리 방법
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활성 비교기: 정자 구배 원심 분리
PureSperm 기울기 40% 및 80%가 실험에 사용되었습니다. 모든 절차는 무균 상태에서 수행되었습니다. 멸균 피펫을 사용하여 "하층"(80% PureSperm 구배) 2.0mL를 원추형 원심분리 튜브로 옮겼습니다. 새 멸균 피펫을 사용하여 "상층"(40% PureSperm 구배) 2.0mL를 하층 위에 부드럽게 분배했습니다. 액화된 정액 샘플을 상층 위에 놓고 튜브를 300g에서 20분 동안 원심분리했습니다. 펠릿을 건드리지 않고 상부 및 하부 층을 조심스럽게 흡인하였다. 이동 피펫을 사용하여 2-3 mL의 Ham's F10 +10% HAS를 펠릿에 첨가하고 재현탁된 펠릿을 300g에서 7분 동안 원심분리했습니다. 이어서 상청액을 제거하고 펠릿을 0.5mL의 Ham's F10 + FCS 10% 부피에 현탁시켰다. 분리된 정자의 분취량은 이전 팔과 같이 처리되었습니다. |
ICSI에 가장 적합한 정자를 선별하기 위한 다양한 정자 처리 방법
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활성 비교기: 제타법
정자 샘플은 1ml에 500만개 희석되었습니다. 양전하를 유도하기 위해 튜브를 라텍스 장갑 안에 캡까지 올려놓고 캡을 잡고 튜브를 2~3바퀴 회전시킨 후 빠르게 빼냈다. 각 튜브는 상온에서 1분 동안 유지하여 하전된 정자가 원심분리 튜브의 벽에 부착되도록 했습니다. 튜브 접지를 피하기 위해 캡으로 튜브를 고정했습니다. 1분 후 튜브를 200g에서 5분 동안 원심분리했습니다. 그 다음, 부착되지 않은 정자 및 기타 세포를 폐기하기 위해 배지 및 펠릿을 폐기하였다. 튜브 표면을 Ham's F10+ FCS 10% 0.2ml로 세척하여 튜브 벽의 전하를 중화시키고 부착된 정자를 떼어 냈습니다. 각 튜브 바닥에 채취한 배지를 다시 피펫팅하여 회수한 정자의 수를 늘리기 위해 동일한 튜브의 벽을 여러 번 헹구는 데 사용했습니다. 분리된 정자의 분취량은 이전 팔과 같이 처리되었습니다. |
ICSI에 가장 적합한 정자를 선별하기 위한 다양한 정자 처리 방법
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연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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정자 DNA 단편화
기간: 30 분
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halosperm 분석으로 정자 완전성 측정
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30 분
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2차 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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난자 수정률
기간: 1일차
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아니요. 수정된 난모세포 수/총 수 난모세포의
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1일차
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폭발 속도
기간: 5일
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포배된 배아 수 / 총 수 배아의
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5일
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임신율
기간: 15 일
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임신 사례 없음\ 모두 없음. 경우의
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15 일
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공동 작업자 및 조사자
연구 기록 날짜
연구 주요 날짜
연구 시작 (실제)
기본 완료 (실제)
연구 완료 (실제)
연구 등록 날짜
최초 제출
QC 기준을 충족하는 최초 제출
처음 게시됨 (실제)
연구 기록 업데이트
마지막 업데이트 게시됨 (실제)
QC 기준을 충족하는 마지막 업데이트 제출
마지막으로 확인됨
추가 정보
이 연구와 관련된 용어
기타 연구 ID 번호
- Hawaa-4
개별 참가자 데이터(IPD) 계획
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약물 및 장치 정보, 연구 문서
미국 FDA 규제 의약품 연구
미국 FDA 규제 기기 제품 연구
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