Vliv různých metod zpracování spermií na výsledek ICSI.
Vliv různých metod zpracování spermií (Swim up, Zeta, Sperm Gradient Centrifugation) na výsledek ICSI. "Perspektiva DNA spermií"
Přehled studie
Postavení
Podmínky
Intervence / Léčba
Detailní popis
Typ studie
Zápis (Aktuální)
Fáze
- Fáze 2
- Fáze 3
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
Qalubiya
-
Banha, Qalubiya, Egypt, 13512
- Ahmed Saad
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Pohlaví způsobilá ke studiu
Popis
Kritéria pro zařazení:
- nevysvětlitelné neplodné páry po dobu 2 let
- věk od 20 let do 37 let
Kritéria vyloučení:
- případy endometriózy
- děložní faktory
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
- Primární účel: Základní věda
- Přidělení: Randomizované
- Intervenční model: Paralelní přiřazení
- Maskování: Trojnásobný
Zbraně a zásahy
Skupina účastníků / Arm |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Aktivní komparátor: metoda plavání nahoru
Změřte objem pomocí sterilní 2ml pipety. Přeneste vzorek z plastového kelímku do sterilní 15ml kónické centrifugační zkumavky.
Jemně promíchejte vzorek se stejným objemem média na promývání spermií.
Centrifugujte zkumavky při 1500 otáčkách za minutu po dobu 10 minut. Opatrně odsajte supernatant, aniž byste narušili peletu a resuspendujte peletu v 50 mcm čerstvého promývacího média, poté jemně naneste vrstvu 0,5 ml promývacího média na povrch.
Inkubujte zkumavky pod úhlem 45° po dobu 1 hodiny pro plavání ve vertikálním stojanu v inkubátoru při 37°C.
Po inkubační době odsajte celý supernatant ze zkumavky s kulatým dnem.
Alikvoty oddělených spermií byly analyzovány analýzou halospermu na fragmentaci DNA, další alikvoty stejného supernatantu byly použity pro ICSI, poté byly fertilizace, dělení, blastulace, těhotenství a implantace uvedeny do tabulky a statisticky testovány.
|
různé metody zpracování spermií pro výběr nejvhodnějších spermií pro ICSI
|
|
Aktivní komparátor: gradientová centrifugace spermií
Pro experiment byly použity gradienty PureSperm 40 % a 80 %. Všechny postupy byly prováděny za sterilních podmínek. Pomocí sterilní pipety bylo 2,0 ml "spodní vrstvy" (80% gradient PureSperm) přeneseno do kónické centrifugační zkumavky. Pomocí nové sterilní pipety bylo jemně naneseno 2,0 ml "horní vrstvy" (40% gradient PureSperm) na horní část spodní vrstvy. Vzorek zkapalněného spermatu byl poté umístěn na horní vrstvu a zkumavka byla centrifugována po dobu 20 minut při 300 g. Horní a spodní vrstvy byly opatrně odsáty, aniž by došlo k narušení pelety. Pomocí přenosové pipety byly k peletě přidány 2-3 ml Ham's F10 + 10% HAS a resuspendovaná peleta byla centrifugována po dobu 7 minut při 300 g. Supernatant byl poté odstraněn a peleta byla suspendována v objemu 0,5 ml Ham's F10 + FCS 10 %. Alikvoty oddělených spermií byly zpracovány jako v předchozí větvi |
různé metody zpracování spermií pro výběr nejvhodnějších spermií pro ICSI
|
|
Aktivní komparátor: zeta metoda
vzorky spermií byly naředěny na 5 milionů v 1 ml. Pro indukci kladného náboje byla zkumavka umístěna do latexové rukavice až k uzávěru a uchopením uzávěru byla zkumavka otočena o dvě nebo tři otáčky a rychle vytažena. Každá zkumavka byla udržována při teplotě místnosti po dobu 1 minuty, aby se umožnilo přilnutí nabitých spermií ke stěně centrifugační zkumavky. Zkumavky byly drženy za uzávěr, aby se zabránilo uzemnění zkumavky. Po 1 minutě byly zkumavky centrifugovány při 200 g po dobu 5 minut. Poté byly médium a peleta odstraněny, aby se odstranily neadherující spermie a další buňky. Povrch zkumavky byl promyt 0,2 ml Ham's F10+ FCS 10%, aby se neutralizoval náboj na stěně zkumavky a oddělily se ulpívající spermie. Médium odebrané na dně každé zkumavky bylo opakováno a použito k několikanásobnému opláchnutí stěny stejné zkumavky, aby se zvýšil počet získaných spermií. Alikvoty oddělených spermií byly zpracovány jako v předchozí větvi |
různé metody zpracování spermií pro výběr nejvhodnějších spermií pro ICSI
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Fragmentace DNA spermií
Časové okno: 30 minut
|
změřte integritu spermií pomocí testu halospermu
|
30 minut
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Rychlost oplodnění oocytů
Časové okno: den 1
|
Ne. oocytů oplodněných /celkový počet oocytů
|
den 1
|
|
Rychlost výbuchu
Časové okno: den 5
|
počet odstřelených embryí / celkový počet embryí
|
den 5
|
|
míra těhotenství
Časové okno: 15 dní
|
počet těhotných případů\ všechny ne. případů
|
15 dní
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Sponzor
Spolupracovníci
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (Aktuální)
Primární dokončení (Aktuální)
Dokončení studie (Aktuální)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (Aktuální)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (Aktuální)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Další identifikační čísla studie
- Hawaa-4
Plán pro data jednotlivých účastníků (IPD)
Plánujete sdílet data jednotlivých účastníků (IPD)?
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .