Wpływ różnych metod przetwarzania nasienia na wynik ICSI.
Wpływ różnych metod przetwarzania nasienia (pływanie, zeta, wirowanie w gradiencie nasienia) na wynik ICSI. „Perspektywa DNA plemników”
Przegląd badań
Status
Warunki
Interwencja / Leczenie
Szczegółowy opis
Typ studiów
Zapisy (Rzeczywisty)
Faza
- Faza 2
- Faza 3
Kontakty i lokalizacje
Lokalizacje studiów
-
-
Qalubiya
-
Banha, Qalubiya, Egipt, 13512
- Ahmed Saad
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
Akceptuje zdrowych ochotników
Płeć kwalifikująca się do nauki
Opis
Kryteria przyjęcia:
- niewyjaśnione niepłodne pary od 2 lat
- wiek od 20 do 37 lat
Kryteria wyłączenia:
- przypadki endometriozy
- czynniki maciczne
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
- Główny cel: Podstawowa nauka
- Przydział: Randomizowane
- Model interwencyjny: Przydział równoległy
- Maskowanie: Potroić
Broń i interwencje
Grupa uczestników / Arm |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
Aktywny komparator: metoda pływania
Zmierzyć objętość za pomocą sterylnej pipety o pojemności 2 ml. Przenieść próbkę z plastikowego kubka do sterylnej stożkowej probówki wirówkowej o pojemności 15 ml.
Delikatnie wymieszaj próbkę z równą objętością płynu do płukania spermy.
Wirować probówki przy 1500 obr./min przez 10 minut. Ostrożnie odessać supernatant bez naruszania osadu i ponownie zawiesić osad w 50 mcm świeżego podłoża przemywającego, a następnie delikatnie umieścić warstwę 0,5 ml pożywki przemywającej na powierzchni.
Inkubować probówki pod kątem 45° przez 1 godzinę w celu wypłynięcia w stojaku pionowym w inkubatorze o temperaturze 37°C.
Po okresie inkubacji odessać cały supernatant z okrągłodennej probówki.
Próbki oddzielonych plemników analizowano za pomocą testu halosperm pod kątem fragmentacji DNA, kolejne porcje tego samego supernatantu stosowano do ICSI, następnie wskaźniki zapłodnienia, podziału, blastulacji, ciąży i implantacji zestawiono w tabeli i przetestowano statystycznie.
|
różne metody przetwarzania nasienia w celu wybrania najbardziej odpowiednich plemników do ICSI
|
|
Aktywny komparator: wirowanie w gradiencie plemników
W eksperymencie zastosowano gradienty PureSperm 40% i 80%. Wszystkie zabiegi przeprowadzono w sterylnych warunkach. Używając sterylnej pipety, 2,0 ml „dolnej warstwy” (gradient 80% PureSperm) przeniesiono do stożkowej probówki wirówkowej. Używając nowej sterylnej pipety, 2,0 ml „górnej warstwy” (gradient 40% PureSperm) delikatnie dozowano na wierzch dolnej warstwy. Upłynnioną próbkę nasienia umieszczono następnie na wierzchu górnej warstwy i probówkę wirowano przez 20 minut przy 300 g. Górną i dolną warstwę ostrożnie odessano bez naruszania osadu. Używając pipety do przenoszenia, do osadu dodano 2-3 ml Ham's F10 +10% HAS i ponownie zawieszony osad wirowano przez 7 minut przy 300 g. Następnie usunięto supernatant i osad zawieszono w objętości 0,5 ml Ham's F10 + FCS 10%. Porcje oddzielonych plemników traktowano jak poprzednie ramię |
różne metody przetwarzania nasienia w celu wybrania najbardziej odpowiednich plemników do ICSI
|
|
Aktywny komparator: metoda zeta
próbki plemników rozcieńczono 5 milionów w 1 ml. Aby wywołać ładunek dodatni, rurkę umieszczono w lateksowej rękawiczce aż do zakrętki i chwytając za zakrętkę, rurkę obrócono o dwa lub trzy obroty i szybko wyciągnięto. Każdą probówkę trzymano w temperaturze pokojowej przez 1 minutę, aby umożliwić przyleganie naładowanych plemników do ścianki probówki wirówkowej. Probówki trzymano za zakrętkę, aby uniknąć uziemienia probówki. Po 1 minucie probówki wirowano przy 200 g przez 5 minut. Następnie pożywkę i osad usunięto w celu odrzucenia nie przylegających plemników i innych komórek. Powierzchnię probówki przemyto 0,2 ml Ham's F10+ FCS 10% w celu zneutralizowania ładunku na ściance probówki i oderwania przylegających plemników. Pożywkę zebraną na dnie każdej probówki ponownie odpipetowano i użyto do kilkukrotnego przepłukania ścianek tej samej probówki w celu zwiększenia liczby odzyskanych plemników. Porcje oddzielonych plemników traktowano jak poprzednie ramię |
różne metody przetwarzania nasienia w celu wybrania najbardziej odpowiednich plemników do ICSI
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Fragmentacja DNA plemników
Ramy czasowe: 30 minut
|
zmierzyć integralność plemników za pomocą testu halosperm
|
30 minut
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Wskaźnik zapłodnienia oocytów
Ramy czasowe: dzień 1
|
NIE. zapłodnionych oocytów /liczba ogółem oocytów
|
dzień 1
|
|
Szybkość wybuchu
Ramy czasowe: dzień 5
|
liczba zarodków poddanych blastyfikacji / łączna liczba embrionów
|
dzień 5
|
|
wskaźnik ciąż
Ramy czasowe: 15 dni
|
liczba przypadków ciąży\ wszystkie nie. przypadków
|
15 dni
|
Współpracownicy i badacze
Sponsor
Współpracownicy
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (Rzeczywisty)
Zakończenie podstawowe (Rzeczywisty)
Ukończenie studiów (Rzeczywisty)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Rzeczywisty)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Rzeczywisty)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Inne numery identyfikacyjne badania
- Hawaa-4
Plan dla danych uczestnika indywidualnego (IPD)
Planujesz udostępniać dane poszczególnych uczestników (IPD)?
Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze
Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA
Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .