Erilaisten siittiöiden käsittelymenetelmien vaikutus ICSI-tulokseen.
Erilaisten siittiöiden käsittelymenetelmien (Swim up, Zeta, spermagradienttisentrifugointi) vaikutus ICSI-tulokseen. "Sperman DNA:n näkökulma"
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Vaihe 2
- Vaihe 3
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
Qalubiya
-
Banha, Qalubiya, Egypti, 13512
- Ahmed Saad
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- selittämättömät lapsettomat parit 2 vuoden ajan
- ikä 20-vuotiaasta 37-vuotiaaksi
Poissulkemiskriteerit:
- endometrioositapaukset
- kohdun tekijät
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Perustiede
- Jako: Satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Kolminkertaistaa
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Active Comparator: uida ylös -menetelmä
Mittaa tilavuus steriilillä 2 ml:n pipetillä. Siirrä näyte muovikupista steriiliin 15 ml:n kartiomaiseen sentrifugiputkeen.
Sekoita näyte varovasti yhtä suureen määrään siittiöiden pesuainetta.
Sentrifugoi putkia nopeudella 1500 rpm 10 minuuttia. Imu supernatantti varovasti häiritsemättä pellettiä ja suspensoi pelletti uudelleen 50 mcm tuoreeseen pesuaineeseen ja aseta sitten kerros 0,5 ml pesuainetta varovasti pinnalle.
Inkuboi putkia 45° kulmassa 1 tunnin ajan pystysuorassa telineessä uintia varten 37°C:n inkubaattorissa.
Inkubointijakson jälkeen ime koko supernatantti pyöreäpohjaisesta putkesta.
Irrotettujen siittiöiden alikvootit analysoitiin halosperm-määrityksellä DNA-fragmentaation toteamiseksi. Saman supernatantin toisia alikvootteja käytettiin ICSI:lle, sitten hedelmöitys-, jakautumis-, blastulaatio-, raskaus- ja implantaationopeudet taulukoitiin ja testattiin tilastollisesti.
|
erilainen siittiöiden käsittelymenetelmä sopivimpien siittiöiden valitsemiseksi ICSI:lle
|
|
Active Comparator: siittiöiden gradienttisentrifugointi
Kokeessa käytettiin PureSperm-gradientteja 40 % ja 80 %. Kaikki toimenpiteet suoritettiin steriileissä olosuhteissa. Steriiliä pipettiä käyttäen siirrettiin 2,0 ml "alempaa kerrosta" (80 % PureSperm-gradientti) kartiomaiseen sentrifugiputkeen. Uutta steriiliä pipettiä käyttäen 2,0 ml "ylempää kerrosta" (40 % PureSperm-gradientti) annosteltiin varovasti alemman kerroksen päälle. Nesteytetty siemennesteenäyte asetettiin sitten ylemmän kerroksen päälle ja putkea sentrifugoitiin 20 minuuttia 300 g:ssä. Ylempi ja alempi kerros imettiin huolellisesti pois pellettiä häiritsemättä. Käyttämällä siirtopipettiä pellettiin lisättiin 2-3 ml Ham's F10 + 10 % HAS ja uudelleensuspendoitua pellettiä sentrifugoitiin 7 minuuttia 300 g:ssä. Sitten supernatantti poistettiin ja pelletti suspendoitiin 0,5 ml:n tilavuuteen Ham's F10 + FCS 10 %. Alikvootteja irronneesta siittiöstä käsiteltiin samalla tavalla kuin edellinen käsi |
erilainen siittiöiden käsittelymenetelmä sopivimpien siittiöiden valitsemiseksi ICSI:lle
|
|
Active Comparator: zeta menetelmä
siittiönäytteet laimennettiin 5 miljoonaa 1 ml:aan. Positiivisen varauksen aikaansaamiseksi putki asetettiin lateksikäsineen sisään korkkiin asti ja korkista kiinni pitäen putkea käännettiin kaksi tai kolme kierrosta ja vedettiin nopeasti ulos. Jokaista putkea pidettiin huoneenlämpötilassa 1 minuutin ajan, jotta ladattu siittiö tarttui sentrifugiputken seinämään. Putket pidettiin kiinni korkista putken maadoitumisen välttämiseksi. 1 minuutin kuluttua putkia sentrifugoitiin 200 g:ssä 5 minuuttia. Sitten väliaine ja pelletti heitettiin pois kiinnittymättömien siittiöiden ja muiden solujen hylkäämiseksi. Putken pinta pestiin 0,2 ml:lla Ham's F10+ FCS 10 % putken seinämän varauksen neutraloimiseksi ja kiinnittyneiden siittiöiden irrottamiseksi. Kunkin putken pohjalta kerätty elatusaine toistettiin ja huuhdeltiin saman putken seinämää useita kertoja talteen otettujen siittiöiden määrän lisäämiseksi. Alikvootteja irronneesta siittiöstä käsiteltiin samalla tavalla kuin edellinen käsi |
erilainen siittiöiden käsittelymenetelmä sopivimpien siittiöiden valitsemiseksi ICSI:lle
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Sperman DNA:n fragmentoituminen
Aikaikkuna: 30 minuuttia
|
mittaa siittiöiden eheys halospermimäärityksellä
|
30 minuuttia
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Munasolujen hedelmöitysaste
Aikaikkuna: päivä 1
|
ei. hedelmöittyneistä munasoluista /yht.n. munasoluista
|
päivä 1
|
|
Räjähdysnopeus
Aikaikkuna: päivä 5
|
blastuloitujen alkioiden lukumäärä / yhteensä ei alkioista
|
päivä 5
|
|
raskausaste
Aikaikkuna: 15 päivää
|
ei raskaana olevia tapauksia\ kaikki ei. tapauksista
|
15 päivää
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Yhteistyökumppanit
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muut tutkimustunnusnumerot
- Hawaa-4
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .