Effetto di diversi metodi di elaborazione dello sperma nell'esito dell'ICSI.
Effetto di diversi metodi di elaborazione dello sperma ( Swim up, Zeta, Centrifugazione del gradiente dello sperma ) nell'esito ICSI. "Una prospettiva del DNA dello sperma"
Panoramica dello studio
Stato
Condizioni
Intervento / Trattamento
Descrizione dettagliata
Tipo di studio
Iscrizione (Effettivo)
Fase
- Fase 2
- Fase 3
Contatti e Sedi
Luoghi di studio
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Qalubiya
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Banha, Qalubiya, Egitto, 13512
- Ahmed Saad
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Criteri di partecipazione
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
Accetta volontari sani
Sessi ammissibili allo studio
Descrizione
Criterio di inclusione:
- coppie infertili inspiegabili per 2 anni
- età dai 20 ai 37 anni
Criteri di esclusione:
- casi di endometriosi
- fattori uterini
Piano di studio
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
- Scopo principale: Scienza basilare
- Assegnazione: Randomizzato
- Modello interventistico: Assegnazione parallela
- Mascheramento: Triplicare
Armi e interventi
Gruppo di partecipanti / Arm |
Intervento / Trattamento |
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Comparatore attivo: metodo di nuoto
Misurare il volume utilizzando una pipetta sterile da 2 mL. Trasferire il campione da un bicchiere di plastica a una provetta da centrifuga conica sterile da 15 mL.
Mescolare delicatamente il campione con lo stesso volume di Sperm Washing Media.
Centrifugare le provette a 1500 rpm per 10 minuti. Aspirare con cura il supernatante senza disturbare il pellet e risospendere il pellet in 50 mcm di mezzo di lavaggio fresco, quindi posizionare delicatamente uno strato di 0,5 ml di mezzo di lavaggio sulla superficie.
Incubare le provette con un angolo di 45° per 1 ora per lo swim-up in rack verticale in un incubatore a 37°C.
Dopo il periodo di incubazione, aspirare l'intero surnatante dal tubo a fondo tondo.
Le aliquote dello sperma distaccato sono state analizzate mediante analisi dell'alosperma per la frammentazione del DNA, altre aliquote dello stesso supernatante sono state utilizzate per l'ICSI, quindi i tassi di fecondazione, divisione, blastulazione, gravidanza e impianto sono stati tabulati e testati statisticamente.
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diverso metodo di elaborazione dello sperma per selezionare lo sperma più adatto per l'ICSI
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Comparatore attivo: centrifugazione in gradiente spermatico
Per l'esperimento sono stati utilizzati gradienti di PureSperm del 40% e dell'80%. Tutte le procedure sono state condotte in condizioni sterili. Utilizzando una pipetta sterile, 2,0 mL dello "strato inferiore" (gradiente PureSperm all'80%) sono stati trasferiti in una provetta da centrifuga conica. Utilizzando una nuova pipetta sterile, 2,0 mL dello "strato superiore" (gradiente PureSperm al 40%) sono stati delicatamente dispensati sopra lo strato inferiore. Un campione di seme liquefatto è stato quindi posto sopra lo strato superiore e la provetta è stata centrifugata per 20 minuti a 300 g. Gli strati superiore e inferiore sono stati accuratamente aspirati senza disturbare il pellet. Utilizzando una pipetta di trasferimento, al pellet sono stati aggiunti 2-3 mL di Ham's F10 +10% HAS e il pellet risospeso è stato centrifugato per 7 minuti a 300 g. Il surnatante è stato quindi rimosso e il pellet è stato sospeso in un volume di 0,5 mL di Ham's F10 + FCS 10%. Le aliquote dello sperma distaccato sono state trattate come braccio precedente |
diverso metodo di elaborazione dello sperma per selezionare lo sperma più adatto per l'ICSI
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Comparatore attivo: metodo zeta
campioni di sperma sono stati diluiti 5 milioni in 1 ml. Per indurre una carica positiva, il tubo è stato posto all'interno di un guanto di lattice fino al cappuccio e afferrato il cappuccio, il tubo è stato ruotato di due o tre giri ed estratto rapidamente. Ogni provetta è stata mantenuta a temperatura ambiente per 1 minuto per consentire l'adesione dello sperma carico alla parete della provetta da centrifuga. I tubi sono stati tenuti dal tappo per evitare la messa a terra del tubo. Dopo 1 minuto le provette sono state centrifugate a 200 g per 5 minuti. Quindi, il mezzo e il pellet sono stati scartati per scartare lo sperma non aderente e altre cellule. La superficie della provetta è stata lavata con 0,2 ml di Ham's F10+ FCS 10% per neutralizzare la carica sulla parete della provetta e staccare lo sperma aderente. Il terreno raccolto sul fondo di ciascuna provetta è stato ripipettato e utilizzato per risciacquare più volte la parete della stessa provetta per aumentare il numero di spermatozoi recuperati. Le aliquote dello sperma distaccato sono state trattate come braccio precedente |
diverso metodo di elaborazione dello sperma per selezionare lo sperma più adatto per l'ICSI
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Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Frammentazione del DNA spermatico
Lasso di tempo: 30 minuti
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misurare l'integrità degli spermatozoi mediante analisi dell'alosperma
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30 minuti
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Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Tasso di fecondazione degli ovociti
Lasso di tempo: giorno 1
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NO. di ovociti fecondati/totale n. di ovociti
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giorno 1
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Tasso di esplosione
Lasso di tempo: giorno 5
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n. di embrioni blasticati / totale n. di embrioni
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giorno 5
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tasso di gravidanza
Lasso di tempo: 15 giorni
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n. di casi di gravidanza\ tutti n. dei casi
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15 giorni
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Collaboratori e investigatori
Sponsor
Collaboratori
Studiare le date dei record
Studia le date principali
Inizio studio (Effettivo)
Completamento primario (Effettivo)
Completamento dello studio (Effettivo)
Date di iscrizione allo studio
Primo inviato
Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità
Primo Inserito (Effettivo)
Aggiornamenti dei record di studio
Ultimo aggiornamento pubblicato (Effettivo)
Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC
Ultimo verificato
Maggiori informazioni
Termini relativi a questo studio
Altri numeri di identificazione dello studio
- Hawaa-4
Piano per i dati dei singoli partecipanti (IPD)
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