쇠고기가 대사산물과 염증에 미치는 영향

이 연구의 접근 방식은 건강한 개인(n=10, 남성 5명, 여성 5명)을 이중 맹검, 양손(유기농 목초 급여 및 일반 급여) 무작위 교차 시험에 등록하는 것입니다. 각 개별 참가자는 스테이크 식사 사이의 식후 혈청 담즙산 반응을 비교하기 위해 자신의 통제 역할을 합니다. 스테이크 식사는 유기적으로 목초를 먹인 식사(OGF)와 다른 관습적으로 먹이를 먹인 식사(CONVF)입니다. 참가자는 USDA에서 권장하는 온도인 158°F로 구운 6온스 스테이크를 먹게 됩니다. 참가자의 절반이 OGF 부문에서 시작하고 나머지 절반이 CONVF 부문에서 시작하는 무작위 교차 설계는 잠재적인 순서 효과를 제거합니다. 2개의 블록(블록당 총 5개)의 블록 무작위화가 생성됩니다. 교차 시험에서 각 사람이 자신의 통제 역할을 하게 하면 개인 간 변이의 영향이 제거됩니다. MSU Nutrition Research 팀은 식후 검사 프로토콜 및 식이 조작에 대한 광범위한 경험을 보유하고 있으며 이 경험을 활용하여 적절한 사전 검사 표준화, 식사 준비의 균일성, 정확한 혈액 수집 시기, 처리 및 분석을 위한 확립된 절차로 제안된 프로토콜을 수행할 것입니다. 혈액 샘플. 모든 1차 및 2차 형태를 포함한 담즙산은 식전 및 식후 4시간 동안 30분 간격으로 수집된 샘플에서 분석됩니다. MSU Proteomics, Metabolomics 및 Mass Spectrometry Facility에서 확립된 방법을 사용하여 OGF와 CONVF 조건 사이의 총 담즙산과 개별 담즙산을 비교합니다.

절차:

방문 1 동안 참가자는 정보에 입각한 동의를 받고 일련의 서면 설문지 및 인체 측정을 ​​완료하도록 요청받습니다. 방문 2 직전에 최소 72회의 준비 기간이 있을 것이며, 이 기간 동안 참가자는 붉은 고기 금지와 같은 특정 식이 지침을 따르도록 요청받을 것입니다. 두 번째(방문 2) 및 세 번째(방문 3) 방문은 각각 약 5시간이 걸리며 각각 샘플링 카테터를 통해 총 9번의 혈액 채취를 포함하며 각 혈액 채취는 약 2-3티스푼의 혈액을 수집합니다. 채혈은 제공된 스테이크 식사 전과 식사 후 4시간 동안 30분마다 채혈됩니다. 방문 1과 2 사이에는 최소 72시간, 방문 2와 3 사이에는 최소 7일이 있습니다. 이 최소 72시간 및 7일 기간 동안 참가자는 제공된 식이 및 신체 활동 지침을 따라야 합니다. 또한 참가자는 1개월 식단 기록 설문지와 24시간 식단 회상을 작성해야 합니다.

식이 개입: 육류 과학 전문가가 참가자에게 제공할 스테이크를 선택하고 준비합니다. 참가자는 OGF 또는 CONVF인 158°F로 조리된 6온스 비프 스테이크 식사를 섭취해야 하지만 눈이 멀도록 코드가 지정되고 라벨이 지정됩니다.

동역학(시간 경과에 따른 측정) 및 비표적 및 표적 대사체학(단일 샘플에서 1000개의 분자를 측정하는 고급 분석 기술)은 유기농 잔디의 영향을 조사하기 위해 별도의 식사 테스트의 잠재적인 건강 영향을 구별하는 도구로 사용됩니다. 건강한 성인의 단식 및 식후 반응에 대한 사료 공급 쇠고기 대 기존 공급 쇠고기 소비. 조사관은 쇠고기 샘플 간의 일련의 대사적 차이를 식별하고 이러한 차이가 건강에 미치는 알려진 영향을 식별하여 실질적인 비교를 제공하고 향후 연구를 위한 토대를 제공할 것으로 기대합니다.

대사체 및 지질체 분석: 모든 샘플이 수집되면 혈청 샘플을 해동하고 대사체 분획을 추출합니다. 추출 후 샘플은 질량 분석 분석을 사용하여 탐색됩니다. 초기 표적 분석은 담즙산, 지질 및 아미노산에 초점을 맞출 것입니다. 대상 분석물은 표준 곡선을 사용하여 정량화되고 결과 농도는 여러 통계 분석 도구를 사용하여 비교됩니다. 대사산물 샘플은 Waters Synapt G2Si QTOF(Waters Corporation)를 사용하여 분석됩니다. 이 장비는 Ion Mobility 기능이 있으며 복잡한 혼합물에서 담즙산과 같이 밀접하게 관련된 화합물을 단면적과 질량을 기준으로 구별할 수 있습니다. 높은 감도와 다양한 스캔 모드 덕분에 Synapt QTOF는 복잡한 생물학적 시료의 비표적 분석을 위한 최적의 선택입니다.

식이 분석: 이 연구는 Risk Factor Monitoring and Methods Branch의 직원이 개발한 19세 이상의 성인을 위해 고안된 식품 빈도 설문지인 웹 기반 식이 기록 설문지(DHQ III)의 최신 버전(2018)을 사용합니다. NIH 국립 암 연구소의 RFMMB). DHQ III의 출력에는 탄수화물 성분, 카로티노이드 및 토코페롤, 보충제의 식이 성분, 지방, 지방산 및 콜레스테롤, 다량 영양소 및 에너지, 미네랄, 단백질 성분 및 비타민이 DHQ III 출력 파일에서 사용 가능한 식이 성분 및 식품군이 포함됩니다. . 또한 급성 식이 소비는 무료 웹 기반 자동 자가 관리 24시간(ASA24®) 설문지를 사용하여 결정됩니다.