Impact van rundvlees op metabolieten en ontstekingen

De aanpak voor deze studie is om een ​​populatie van gezonde individuen (n=10; 5 mannen en 5 vrouwen) te rekruteren in een dubbelblinde, tweearmige (biologische grasgevoerde en conventionele gevoede), gerandomiseerde, cross-over studie waarin elke individuele deelnemer dient als hun eigen controle om postprandiale serumgalzuurresponsen te vergelijken tussen steakmaaltijden, de ene met biologisch gras (OGF) en de andere met conventionele voeding (CONVF). Deelnemers consumeren een 6-oz steakmaaltijd gegrild tot 158 ​​° F, de aanbevolen temperatuur door de USDA. Het gerandomiseerde crossover-ontwerp waarbij de helft van de deelnemers begint in de OGF-arm en de andere helft begint in de CONVF-arm, elimineert mogelijke volgorde-effecten. Blokrandomisatie met 2 blokken (totaal 5 per blok) wordt gecreëerd. Door elke persoon als hun eigen controle te laten dienen in een crossover-onderzoek, wordt de invloed van interindividuele variatie geëlimineerd. Het MSU Nutrition Research-team heeft uitgebreide ervaring met postprandiale testprotocollen en dieetmanipulatie en zal deze ervaring gebruiken om het voorgestelde protocol uit te voeren met de juiste pre-teststandaardisatie, uniformiteit van maaltijdbereiding, nauwkeurige timing van bloedafname en gevestigde procedures voor verwerking en analyse Bloedstalen. Galzuren, inclusief alle primaire en secundaire vormen, zullen worden geanalyseerd uit monsters die vóór de maaltijd en met tussenpozen van 30 minuten gedurende 4 uur na de maaltijd zijn verzameld. Gevestigde methoden in de MSU Proteomics, Metabolomics en Mass Spectrometry Facility zullen worden gebruikt om totale en individuele galzuren te vergelijken tussen OGF- en CONVF-condities.

Procedures:

Tijdens Bezoek 1 ondergaan deelnemers geïnformeerde toestemming, wordt gevraagd om een ​​reeks schriftelijke vragenlijsten en antropometrische metingen in te vullen. Vlak voor bezoek 2 is er een inloopperiode van minimaal 72 dagen, waarin deelnemers wordt gevraagd bepaalde voedingsrichtlijnen te volgen, zoals geen rood vlees. Het tweede (bezoek 2) en derde (bezoek 3) bezoek duurt elk ongeveer 5 uur en omvat elk in totaal 9 bloedafnames via een bemonsteringskatheter, waarbij bij elke bloedafname ongeveer 2-3 theelepels bloed worden verzameld. Er wordt bloed afgenomen vóór een verstrekte steakmaaltijd en daarna om de dertig minuten gedurende 4 uur na consumptie van de maaltijd. Er zijn minimaal 72 uur tussen bezoeken 1 en 2, en 7 dagen tussen bezoeken 2 en 3. Gedurende deze periode van minimaal 72 uur en 7 dagen wordt de deelnemers gevraagd om de verstrekte instructies voor voeding en lichaamsbeweging op te volgen. Bovendien wordt de deelnemers gevraagd een vragenlijst over de voedingsgeschiedenis van een maand in te vullen en een 24-uurs voedingsherinnering.

Dieetinterventie: een specialist in vleeswetenschap selecteert en bereidt de steaks die aan de deelnemers worden gegeven. Deelnemers wordt gevraagd om een ​​6-ounce biefstukmaaltijd te consumeren, gekookt tot 158 ​​° F, dat is ofwel OGF of CONVF, maar zal worden gecodeerd en geëtiketteerd om verblinding te garanderen.

Kinetica (metingen in de tijd) en ongerichte en gerichte metabolomics (een geavanceerde analytische techniek om duizenden moleculen in een enkel monster te meten) zullen worden gebruikt als een hulpmiddel om mogelijke gezondheidseffecten van de afzonderlijke maaltijdtesten te onderscheiden om de invloed van biologisch gras te onderzoeken. gevoede rundvlees versus conventioneel gevoede rundvleesconsumptie op nuchtere en postprandiale reacties bij gezonde volwassenen. De onderzoekers verwachten een reeks metabolische verschillen tussen rundvleesmonsters te identificeren en zullen bekende effecten van die verschillen op de gezondheid identificeren om een ​​inhoudelijke vergelijking te bieden en een basis te leggen voor toekomstig onderzoek.

Metabolomische en Lipidomische analyse: Wanneer alle monsters zijn verzameld, worden de serummonsters ontdooid en wordt een metabolietfractie geëxtraheerd. Na extractie worden de monsters onderzocht met behulp van massaspectrometrische analyse. Een eerste gerichte analyse zal zich richten op galzuren, lipiden en aminozuren. Gerichte analyten zullen worden gekwantificeerd met behulp van standaardcurven en de resulterende concentraties zullen worden vergeleken met behulp van verschillende statistische analysetools. Metabolietmonsters zullen worden geanalyseerd met behulp van een Waters Synapt G2Si QTOF (Waters Corporation). Dit instrument heeft het vermogen om ionen te verplaatsen en kan onderscheid maken tussen nauw verwante verbindingen, zoals galzuren, in complexe mengsels op basis van hun dwarsdoorsnede-oppervlak en massa. De hoge gevoeligheid en verscheidenheid aan scanmodi maken de Synapt QTOF de optimale keuze voor ongerichte analyse van complexe biologische monsters.

Dieetanalyse: deze studie zal de meest recente versie (2018) gebruiken van de webgebaseerde Diet History Questionnaire (DHQ III), een vragenlijst over voedselfrequentie ontworpen voor volwassenen van 19 jaar en ouder, ontwikkeld door personeel van de Risk Factor Monitoring and Methods Branch ( RFMMB) van het NIH National Cancer Institute. De uitvoer van de DHQ III omvat koolhydraatbestanddelen, carotenoïden en tocoferolen, voedingsbestanddelen uit supplementen, vetten, vetzuren en cholesterol, macronutriënten en energie, mineralen, eiwitbestanddelen en vitamines zijn voedingsbestanddelen en voedselgroepen die beschikbaar zijn in de uitvoerbestanden van DHQ III . Daarnaast zal de acute voedingsconsumptie worden bepaald met behulp van de gratis, webgebaseerde Automated Self-Administered 24-hour (ASA24®) vragenlijst.