牛肉对代谢物和炎症的影响

本研究的方法是在一项双盲、双组（有机草饲和常规饲喂）、随机、交叉试验中招募健康个体（n=10；5 名男性和 5 名女性），其中每个参与者都作为他们自己的对照来比较牛排餐之间的餐后血清胆汁酸反应，一种是有机草饲 (OGF) 另一种是常规喂养 (CONVF)。 参与者将食用 6 盎司的牛排餐，烤至 158°F，这是美国农业部推荐的温度。 一半参与者从 OGF 臂开始，另一半从 CONVF 臂开始的随机交叉设计将消除潜在的顺序效应。 将创建具有 2 个块（每个块总共 5 个）的块随机化。 让每个人在交叉试验中作为自己的对照将消除个体间差异的影响。 MSU 营养研究团队在餐后测试方案和饮食控制方面拥有丰富的经验，并将利用这些经验执行拟议的方案，包括适当的预测试标准化、膳食准备的均匀性、采血的精确时间以及既定的处理和分析程序血液样本。 胆汁酸，包括所有初级和次级形式，将从餐前收集的样本中进行分析，并在餐后 4 小时内以 30 分钟的间隔进行分析。 MSU 蛋白质组学、代谢组学和质谱设施中已建立的方法将用于比较 OGF 和 CONVF 条件之间的总胆汁酸和单个胆汁酸。

手续：

在访问 1 期间，参与者将获得知情同意，并被要求完成一系列书面问卷和人体测量。 在访问 2 之前将有至少 72 次磨合期，在此期间将要求参与者遵循某些饮食指南，例如不吃红肉。 第二次（访视 2）和第三次（访视 3）每次约需 5 小时，每次都包括通过取样导管进行的 9 次抽血，每次抽血收集约 2-3 茶匙血液。 将在提供的牛排餐前抽血，然后在餐后 4 小时内每三十分钟抽一次血。 第 1 次和第 2 次就诊之间至少间隔 72 小时，第 2 次和第 3 次就诊之间至少间隔 7 天。 在这至少 72 小时零 7 天的时间内，将要求参与者遵循提供的饮食和身体活动说明。 此外，参与者将被要求完成一个月的饮食史问卷和 24 小时饮食回顾。

饮食干预：肉类科学专家将选择和准备提供给参与者的牛排。 参与者将被要求食用一份 6 盎司的牛排餐，煮至 158°F（OGF 或 CONVF），但将被编码和标记以确保致盲。

动力学（随着时间的推移测量）和非目标和目标代谢组学（一种先进的分析技术，用于测量单个样本中的 1000 个分子）将用作区分单独膳食测试的潜在健康影响的工具，以调查有机草的影响-饲喂牛肉与常规饲喂牛肉对健康成人空腹和餐后反应的影响。 研究人员希望确定牛肉样本之间的一系列代谢差异，并将确定这些差异对健康的已知影响，以提供实质性比较并为未来研究奠定基础。

代谢组学和脂质组学分析：收集完所有样本后，将解冻血清样本，并提取代谢物部分。 提取后，将使用质谱分析法探索样品。 最初的靶向分析将侧重于胆汁酸、脂质和氨基酸。 目标分析物将使用标准曲线进行量化，所得浓度将使用多种统计分析工具进行比较。 使用 Waters Synapt G2Si QTOF (Waters Corporation) 分析代谢物样品。 该仪器具有离子淌度能力，可以根据横截面积和质量区分复杂混合物中密切相关的化合物，例如胆汁酸。 高灵敏度和多种扫描模式使 Synapt QTOF 成为复杂生物样品非靶向分析的最佳选择。

饮食分析：本研究将使用最新版本（2018 年）的基于网络的饮食历史问卷 (DHQ III)，这是一种为 19 岁及以上成年人设计的食物频率问卷，由风险因素监测和方法处的工作人员开发（ NIH 国家癌症研究所的 RFMMB）。 DHQ III 的输出包括碳水化合物成分、类胡萝卜素和生育酚、来自补充剂的膳食成分、脂肪、脂肪酸和胆固醇、常量营养素和能量、矿物质、蛋白质成分和维生素是 DHQ III 输出文件中可用的膳食成分和食物组. 此外，将使用免费的、基于网络的 24 小时自动自我管理 (ASA24®) 调查问卷来确定急性膳食摄入量。