Vliv hovězího masa na metabolity a záněty

Přístupem této studie je zapsat populaci zdravých jedinců (n=10; 5 mužů a 5 žen) do dvojitě zaslepené, dvouramenné (krmení organickou trávou a konvenční výživou), randomizované, zkřížené studie, ve které každý jednotlivý účastník slouží jako vlastní kontrola k porovnání postprandiálních reakcí sérových žlučových kyselin mezi steakovými jídly, z nichž jedno je krmeno organicky trávou (OGF) a druhé konvenčně krmeno (CONVF). Účastníci budou konzumovat 6-oz steakové jídlo grilované na 158 °F, doporučenou teplotu USDA. Náhodný crossover design, kdy polovina účastníků začíná v rameni OGF a druhá polovina začíná v rameni CONVF, eliminuje potenciální efekty pořadí. Bude vytvořena randomizace bloků se 2 bloky (celkem 5 na blok). Pokud bude každá osoba sloužit jako vlastní kontrola ve zkříženém pokusu, eliminuje se vliv interindividuálních variací. Tým MSU Nutrition Research má rozsáhlé zkušenosti s postprandiálními testovacími protokoly a dietními manipulacemi a tyto zkušenosti využije k provedení navrženého protokolu s vhodnou předtestovou standardizací, jednotností přípravy jídla, přesným načasováním odběru krve a zavedenými postupy pro zpracování a analýzu. vzorky krve. Žlučové kyseliny, včetně všech primárních a sekundárních forem, budou analyzovány ze vzorků odebraných před jídlem a ve 30minutových intervalech po dobu 4 hodin po jídle. Pro srovnání celkových a jednotlivých žlučových kyselin mezi podmínkami OGF a CONVF budou použity zavedené metody v zařízení MSU Proteomics, Metabolomics a Mass Spectrometry Facility.

Postupy:

Během návštěvy 1 účastníci podstoupí informovaný souhlas, budou požádáni o vyplnění série písemných dotazníků a antropometrických měření. Těsně před návštěvou 2 proběhne minimálně 72 záběhových období, během kterých budou účastníci požádáni, aby dodržovali určitá dietní pravidla, jako je zákaz červeného masa. Druhá (návštěva 2) a třetí (návštěva 3) zabere každá přibližně 5 hodin a každá bude zahrnovat celkem 9 odběrů krve odběrovým katetrem, přičemž při každém odběru krve se odeberou asi 2–3 čajové lžičky krve. Krev bude odebírána před dodaným steakem, poté každých 30 minut po dobu 4 hodin po konzumaci jídla. Mezi návštěvami 1 a 2 je minimálně 72 hodin a mezi návštěvami 2 a 3 7 dní. Během tohoto minimálního 72hodinového a 7denního období budou účastníci požádáni, aby dodržovali poskytnuté pokyny týkající se stravování a fyzické aktivity. Kromě toho budou účastníci požádáni o vyplnění měsíčního dotazníku o anamnéze stravy a 24hodinového opakování diety.

Dietní intervence: Specialista na vědu o mase vybere a připraví steaky, které dostanou účastníci. Účastníci budou požádáni, aby zkonzumovali 6-uncové hovězí steakové jídlo, vařené na 158 °F, které je buď OGF nebo CONVF, ale bude kódováno a označeno, aby bylo zajištěno oslepení.

Kinetika (měření v průběhu času) a necílená a cílená metabolomika (pokročilá analytická technika pro měření 1000 molekul v jediném vzorku) budou použity jako nástroj k rozlišení potenciálních zdravotních dopadů samostatných testů na jídlo ke zkoumání vlivu organické trávy- konzumace krmeného hovězího oproti konvenčně krmenému hovězímu na lačno a postprandiální reakce u zdravých dospělých. Výzkumníci očekávají, že identifikují řadu metabolických rozdílů mezi vzorky hovězího masa a identifikují známé dopady těchto rozdílů na zdraví, aby poskytli věcné srovnání a poskytli základ pro budoucí výzkum.

Metabolomická a lipidomická analýza: Po odebrání všech vzorků budou vzorky séra rozmraženy a bude extrahována frakce metabolitů. Po extrakci budou vzorky zkoumány pomocí hmotnostní spektrometrie. Počáteční cílená analýza se zaměří na žlučové kyseliny, lipidy a aminokyseliny. Cílené analyty budou kvantifikovány pomocí standardních křivek a výsledné koncentrace budou porovnány pomocí několika nástrojů statistické analýzy. Vzorky metabolitů budou analyzovány pomocí Waters Synapt G2Si QTOF (Waters Corporation). Tento přístroj má schopnost iontové mobility a dokáže rozlišit blízce příbuzné sloučeniny, jako jsou žlučové kyseliny, v komplexních směsích na základě jejich průřezové plochy a hmotnosti. Vysoká citlivost a rozmanitost skenovacích režimů činí ze Synapt QTOF optimální volbu pro necílenou analýzu komplexních biologických vzorků.

Analýza stravy: Tato studie bude využívat nejnovější verzi (2018) webového dotazníku Diet History Questionnaire (DHQ III), dotazníku o frekvenci jídla určeného pro dospělé ve věku 19 let a starší, který vyvinuli pracovníci oddělení monitorování rizikových faktorů a metod ( RFMMB) z NIH National Cancer Institute. Výstupy DHQ III zahrnují sacharidové složky, karotenoidy a tokoferoly, složky stravy z doplňků, tuky, mastné kyseliny a cholesterol, makroživiny a energii, minerály, bílkovinné složky a vitamíny jsou složky stravy a skupiny potravin dostupné ve výstupních souborech DHQ III. . Kromě toho bude akutní dietní spotřeba stanovena pomocí bezplatného webového dotazníku Automated Self-Administrated 24-hour (ASA24®).