Влияние говядины на метаболиты и воспаление

Подход к этому исследованию заключается в включении группы здоровых людей (n = 10; 5 мужчин и 5 женщин) в двойное слепое, двухгрупповое (органическое кормление травой и обычное кормление), рандомизированное перекрестное исследование, в котором каждый отдельный участник служит своим собственным контролем для сравнения постпрандиальной реакции желчных кислот в сыворотке между стейками, одним из которых является органическое кормление травой (OGF), а другим - традиционным кормлением (CONVF). Участники будут потреблять стейк весом 6 унций, приготовленный на гриле до 158 ° F, рекомендованной Министерством сельского хозяйства США температуры. Рандомизированный перекрестный дизайн с половиной участников, начинающихся в группе OGF, и другой половиной, начинающей в группе CONVF, устранит потенциальные эффекты порядка. Будет создана рандомизация блоков с 2 блоками (всего 5 на блок). Если каждый человек будет контролировать себя в перекрестном испытании, это устранит влияние межиндивидуальных вариаций. Исследовательская группа MSU по питанию имеет большой опыт работы с протоколами постпрандиального тестирования и диетическими манипуляциями и будет использовать этот опыт для выполнения предложенного протокола с соответствующей стандартизацией перед тестом, единообразием приготовления пищи, точным временем сбора крови и установленными процедурами обработки и анализа. образцы крови. Желчные кислоты, включая все первичные и вторичные формы, будут анализироваться в образцах, собранных до еды и с 30-минутными интервалами в течение 4 часов после еды. Установленные методы Центра протеомики, метаболомики и масс-спектрометрии МГУ будут использоваться для сравнения общих и индивидуальных желчных кислот в условиях OGF и CONVF.

Процедуры:

Во время визита 1 участники получат информированное согласие, им будет предложено заполнить серию письменных анкет и антропометрических измерений. Непосредственно перед посещением 2 будет как минимум 72 вводных периода, в течение которых участников попросят следовать определенным диетическим рекомендациям, таким как отказ от красного мяса. Второе (посещение 2) и третье (посещение 3) посещения будут длиться примерно по 5 часов каждое и будут включать в себя в общей сложности 9 заборов крови через катетер для отбора проб, при этом при каждом заборе крови будет собираться около 2-3 чайных ложек крови. Кровь будет браться перед приготовлением бифштекса, а затем каждые тридцать минут в течение 4 часов после приема пищи. Между посещениями 1 и 2 должно пройти не менее 72 часов, а между посещениями 2 и 3 — 7 дней. В течение этого минимального 72-часового и 7-дневного периода участников попросят следовать предоставленным инструкциям по питанию и физической активности. Кроме того, участников попросят заполнить анкету по истории диеты за один месяц и вспомнить диету за 24 часа.

Диетическое вмешательство: специалист по мясным наукам выберет и приготовит стейки, которые будут поданы участникам. Участникам будет предложено съесть стейк из говядины весом 6 унций, приготовленный до 158 ° F, который соответствует стандарту OGF или CONVF, но будет закодирован и промаркирован для обеспечения слепоты.

Кинетика (измерения с течением времени) и нецелевая и целевая метаболомика (продвинутый аналитический метод для измерения 1000 молекул в одном образце) будут использоваться в качестве инструмента для дифференциации потенциального воздействия на здоровье отдельных тестов еды для изучения влияния органической травы. употребление говядины в сравнении с обычным потреблением говядины в ответах натощак и после приема пищи у здоровых взрослых. Исследователи рассчитывают выявить ряд метаболических различий между образцами говядины и определить известное влияние этих различий на здоровье, чтобы обеспечить существенное сравнение и заложить основу для будущих исследований.

Метаболический и липидомный анализ: когда все образцы собраны, образцы сыворотки размораживают и извлекают фракцию метаболитов. После извлечения образцы будут исследованы с помощью масс-спектрометрического анализа. Первоначальный целевой анализ будет сосредоточен на желчных кислотах, липидах и аминокислотах. Целевые аналиты будут количественно определены с использованием стандартных кривых, а полученные концентрации будут сравниваться с использованием нескольких инструментов статистического анализа. Образцы метаболита будут проанализированы с использованием Waters Synapt G2Si QTOF (Waters Corporation). Этот прибор обладает способностью к ионной подвижности и может различать близкородственные соединения, такие как желчные кислоты, в сложных смесях на основе их площади поперечного сечения и массы. Высокая чувствительность и разнообразие режимов сканирования делают Synapt QTOF оптимальным выбором для нецелевого анализа сложных биологических образцов.

Анализ рациона: в этом исследовании будет использована самая последняя версия (2018 г.) веб-опросника по истории питания (DHQ III), опросника по частоте приема пищи, предназначенного для взрослых 19 лет и старше, разработанного сотрудниками Отдела мониторинга факторов риска и методов ( RFMB) Национального института рака NIH. Выходные данные DHQ III включают углеводные компоненты, каротиноиды и токоферолы, пищевые компоненты из пищевых добавок, жиры, жирные кислоты и холестерин, макроэлементы и энергию, минералы, белковые компоненты и витамины. . Кроме того, острое диетическое потребление будет определяться с помощью бесплатной онлайн-анкеты для автоматического самостоятельного администрирования за 24 часа (ASA24®).