Impact du bœuf sur les métabolites et l'inflammation

L'approche de cette étude consiste à inscrire une population d'individus en bonne santé (n = 10; 5 hommes et 5 femmes) dans un essai croisé à double insu et à deux bras (nourri à l'herbe biologique et nourri à l'herbe conventionnelle), randomisé et croisé dans lequel chaque participant individuel sert de son propre contrôle pour comparer les réponses postprandiales des acides biliaires sériques entre les repas de steak, l'un nourri à l'herbe biologique (OGF) et l'autre nourri de manière conventionnelle (CONVF). Les participants consommeront un steak de 6 oz grillé à 158 ° F, la température recommandée par l'USDA. La conception croisée randomisée avec la moitié des participants commençant dans le bras OGF et l'autre moitié commençant dans le bras CONVF éliminera les effets d'ordre potentiels. La randomisation de blocs avec 2 blocs (total de 5 par bloc) sera créée. Le fait que chaque personne serve de témoin dans un essai croisé éliminera l'influence de la variation interindividuelle. L'équipe de recherche nutritionnelle de MSU possède une vaste expérience des protocoles de test postprandiaux et de la manipulation alimentaire et utilisera cette expérience pour exécuter le protocole proposé avec une normalisation pré-test appropriée, l'uniformité de la préparation des repas, le moment précis de la collecte de sang et les procédures établies pour le traitement et l'analyse. échantillons de sang. Les acides biliaires, y compris toutes les formes primaires et secondaires, seront analysés à partir d'échantillons prélevés avant le repas et à intervalles de 30 minutes pendant 4 heures après le repas. Les méthodes établies dans l'installation de protéomique, de métabolomique et de spectrométrie de masse de la MSU seront utilisées pour comparer les acides biliaires totaux et individuels entre les conditions OGF et CONVF.

Procédures:

Au cours de la visite 1, les participants subiront un consentement éclairé, seront invités à remplir une série de questionnaires écrits et de mesures anthropométriques. Il y aura une période de rodage d'au moins 72 heures juste avant la visite 2, au cours de laquelle les participants seront invités à suivre certaines directives diététiques, telles que l'absence de viande rouge. Les deuxième (visite 2) et troisième (visite 3) visites prendront environ 5 heures chacune et comprendront chacune un total de 9 prises de sang à travers un cathéter d'échantillonnage, chaque prise de sang recueillant environ 2 à 3 cuillères à café de sang. Le sang sera prélevé avant un repas de steak fourni, puis toutes les trente minutes pendant 4 heures après la consommation du repas. Il y a un minimum de 72 heures entre les visites 1 et 2, et 7 jours entre les visites 2 et 3. Pendant cette période minimale de 72 heures et 7 jours, les participants seront invités à suivre les instructions fournies en matière d'alimentation et d'activité physique. De plus, les participants seront invités à remplir un questionnaire sur l'historique de leur alimentation d'un mois et un rappel alimentaire de 24 heures.

Intervention diététique : Un spécialiste des sciences de la viande sélectionnera et préparera les steaks qui seront remis aux participants. Les participants seront invités à consommer un repas de steak de bœuf de 6 onces, cuit à 158 ° F qui est soit OGF ou CONVF, mais sera codé et étiqueté pour assurer l'aveuglement.

La cinétique (mesures au fil du temps) et la métabolomique non ciblée et ciblée (une technique analytique avancée pour mesurer des milliers de molécules dans un seul échantillon) seront utilisées comme outil pour différencier les impacts potentiels sur la santé des tests de repas séparés pour étudier l'influence de l'herbe biologique. consommation de bœuf nourri par rapport à la consommation de bœuf nourri de manière conventionnelle sur les réponses à jeun et postprandiale chez des adultes en bonne santé. Les chercheurs s'attendent à identifier un éventail de différences métaboliques entre les échantillons de bœuf et identifieront les impacts connus de ces différences sur la santé afin de fournir une comparaison substantielle et de fournir une base pour les recherches futures.

Analyse métabolomique et lipidomique : lorsque tous les échantillons ont été collectés, les échantillons de sérum seront décongelés et une fraction métabolite sera extraite. Après extraction, les échantillons seront explorés par analyse par spectrométrie de masse. Une première analyse ciblée portera sur les acides biliaires, les lipides et les acides aminés. Les analytes ciblés seront quantifiés à l'aide de courbes standard et les concentrations résultantes seront comparées à l'aide de plusieurs outils d'analyse statistique. Les échantillons de métabolites seront analysés à l'aide d'un Waters Synapt G2Si QTOF (Waters Corporation). Cet instrument a une capacité de mobilité ionique et peut différencier des composés étroitement apparentés, tels que les acides biliaires, dans des mélanges complexes en fonction de leur surface de section et de leur masse. La sensibilité élevée et la variété des modes de balayage font du Synapt QTOF le choix optimal pour l'analyse non ciblée d'échantillons biologiques complexes.

Analyse diététique : Cette étude utilisera la version la plus récente (2018) du questionnaire Web sur l'historique de l'alimentation (DHQ III), un questionnaire sur la fréquence des aliments conçu pour les adultes de 19 ans et plus, élaboré par le personnel de la Direction de la surveillance des facteurs de risque et des méthodes ( RFMMB) du NIH National Cancer Institute. Les sorties du DHQ III comprennent les constituants glucidiques, les caroténoïdes et les tocophérols, les constituants alimentaires des suppléments, les graisses, les acides gras et le cholestérol, les macronutriments et l'énergie, les minéraux, les constituants protéiques et les vitamines sont des constituants alimentaires et des groupes d'aliments disponibles dans les fichiers de sortie du DHQ III. . De plus, la consommation alimentaire aiguë sera déterminée à l'aide du questionnaire gratuit en ligne Automated Self-Administered 24-hour (ASA24®).