Identificatie van een nieuwe bloedbiomarker voor de diagnose en prognose van liposarcomen (ESPACE)

Sarcomen zijn zeldzame ziekten, die verantwoordelijk zijn voor minder dan 1% van alle kwaadaardige ziekten bij volwassenen¹. Hun incidentie is ongeveer 6 nieuwe gevallen per 100.000 inwoners per jaar, dwz naar schatting 4.000 tot 5.000 nieuwe gevallen per jaar in Frankrijk.

Liposarcoom (LPS) is het meest voorkomende subtype van wekedelensarcoom, goed voor ongeveer 15% van alle sarcomen.

De OMS-classificatie onderscheidt 5 categorieën van LPS: myxoid, pleomorphe, rondcellige liposarcomen, gededifferentieerd (DD-LPS) en goed gedifferentieerd (WD-LPS). Onderzoeksteam is geïnteresseerd in de laatste twee in deze studie.

De diagnose wordt vermoed op de beeldvormingsonderzoeken (MRI voor ledemaattumoren en CT voor retro-peritoneale LPS) die moeten leiden tot een discussie op een multidisciplinaire tumorraad in een expertisecentrum om de biopsie te valideren voor definitieve diagnose en om de beste biopsieroute naar vermijd het risico van verspreiding. In Frankrijk is het beheer van patiënten met sarcoom georganiseerd rond het netwerk van 24 "NETSARC"-centra.

WD-LPS en DD-LPS kunnen moeilijk te onderscheiden zijn van respectievelijk goedaardige vettumoren en ongedifferentieerde sarcomen. Moleculaire analyse, gebaseerd op de detectie van Mdm2-genamplificatie door Fluorescentie in situ Hybridisatie (FISH) is momenteel de "gouden standaard". Het wordt uitgevoerd op een tumorbiopsie. De biopsie is een radiologische biopsie zoals aanbevolen in de richtlijnen om het risico op verspreiding van de ziekte te verminderen. Het materiaal dat de diagnose mogelijk maakt, is dus beperkt, wat de realisatie van morfologie, immunohistochemie en moleculaire biologie op hetzelfde monster bemoeilijkt. De andere beperking is dat dit tumorfragment niet altijd de heterogeniteit binnen de tumor weerspiegelt.

De behandeling is chirurgisch met monobloc-resectie door een chirurg gespecialiseerd in sarcomen. Ondanks chirurgische excisie is het risico op lokaal en op afstand recidief ongeveer 26% voor goed gedifferentieerde liposarcomen⁵ en tot 59% voor gededifferentieerde retroperitoneale liposarcomen. Prognostische factoren voor recidief zijn de kwaliteit van excisie, tumorgrootte, graad en retroperitoneale/ledemaatlokalisatie. De problematiek met betrekking tot deze 2 soorten liposarcomen is niet hetzelfde. Bij WD-LPS is de vraag het risico op herhaling te kennen in het geval van ongeplande R1-resectie (vertegenwoordigt ongeveer 50% van de initiële operaties). Een systematische chirurgische revisie van al deze gevallen is inderdaad duur en morbide, terwijl in 50% van de gevallen geen tumorresidu zal worden gevonden bij het chirurgisch herstel. Voor de DD-LPS is het probleem anders omdat de chirurgische revisie systematisch moet zijn in het geval van niet-R0-chirurgie, maar het is het risico op lokaal recidief ondanks adequate chirurgie en het metastatische risico dat moet worden geëvalueerd om een ​​adjuvante behandeling voor te stellen (chemotherapie en/of radiotherapie) bij patiënten met een hoog risico op recidief, waardoor het essentieel is om een ​​biologische factor van prognose te identificeren om patiënten met een hoog risico op terugval te selecteren.

Artsen stellen voor een nieuwe bloedtest te identificeren die de aanwezigheid van de ziekte zou aangeven. Het zou dan dienen voor de diagnose, maar ook voor de prognose, waardoor we de resterende ziekte na een operatie of excisie kunnen evalueren. Vanwege de complexiteit van sarcomen is het identificeren van een effectieve en betrouwbare biomarker voor WD-LPS en DD-LPS met niet-invasieve methoden een uitdaging, maar clinici hopen dat hun project een efficiëntere en patiëntvriendelijkere methode zal bieden voor de detectie van sarcomen. de ziekte. Ons project steunt op de complementaire expertise van clinici, onderzoekers en biostatistici in nauwe samenwerking.

Clinici hebben onlangs een nieuwe functie van het p53-onafhankelijke Mdm2-eiwit in het serinemetabolisme gekarakteriseerd, dat een fundamentele rol zou kunnen spelen in de ontwikkeling van LPS. Door middel van pan-genoombenaderingen hebben clinici een nieuwe transcriptionele activiteit van Mdm2 gekarakteriseerd en zijn rol in het metabolisme van kankercellen aangetoond. Deze gegevens geven aan dat de aanwezigheid van Mdm2 op chromatine het mogelijk maakt om de transcriptie te regelen van genen die betrokken zijn bij het metabolisme en transport van bepaalde aminozuren zoals serine.

De endogene serinepool wordt in stand gehouden door een evenwicht tussen auxotrofie en de novo-synthese, die tijdens celtransformatie sterk gedereguleerd worden om de anabole behoeften van kankercellen te ondersteunen. Mdm2 wordt gerekruteerd via transcriptiefactoren van de ATF-familie op doelwitgenen die betrokken zijn bij de novo-synthese en serinetransport.

Artsen stellen voor om een ​​biologische test te identificeren voor de prognose en diagnose van LPS waarvoor geen invasieve biopsie nodig is. Patiënten die in de studie worden opgenomen, zijn patiënten met WD-LPS of DD-LPS, met als doel 100 patiënten over een periode van 2 jaar op te nemen.

Op basis van recente gegevens die aantonen dat LPS-groei wordt gemedieerd door Mdm2-gemedieerde regulatie van het serinemetabolisme, stellen clinici voor om serinebloedspiegels te meten als een surrogaatmarker voor LPS-ontwikkeling. Om het intracellulaire niveau van serine te behouden, regelt Mdm2 zowel de novo serinesynthese (een metabole route die het glycolytische tussenproduct 3-fosfo-glyceraat gebruikt om serine in cellen te genereren) als de binnenkomst van de serine in de cel door auxotrofie. Gezien de grootte van LPS, die vaak enkele tientallen centimeters kan bereiken, veronderstelden clinici dat LPS zou kunnen resulteren in een aanzienlijke vraag naar serine die door de micro-omgeving zou kunnen worden geproduceerd en naar de tumor zou kunnen worden overgebracht door circulerende pools van serine en glycine (die onderling kunnen worden gecombineerd). - door cellen omgezet in serine). De profilering van plasma-aminozuren is van groot klinisch belang omdat ze eenvoudig te meten zijn met vloeistofchromatografie (HPLC). Clinici hebben al een HPLC-methode gevalideerd om verschillende aminozuren, waaronder serine en glycine, in het serum te meten. Onze voorlopige gegevens zijn in overeenstemming met onze hypothese, aangezien het serumserinegehalte hoger is bij de gexenotransplanteerde muizen met patiëntentumor in vergelijking met de serumgehalten gemeten bij de controlemuizen. Bovendien kan als reactie op behandeling met een Mdm2-remmer, die een drastische vermindering van de tumorgroei veroorzaakt, een afname van circulerende serine worden waargenomen.

Clinici zullen een HPLC gebruiken in combinatie met massaspectrometrie die al is ontwikkeld om aminozuren van Agilent-technologie te meten. De kwantitatieve analyse van aminozuren combineert snelheid en gevoeligheid met de betrouwbaarheid van de afleidingsreactie en de analytische techniek. Deze doelen worden bereikt door geautomatiseerde en online derivatisering met o-ftaalaldehyde (OPA) voor primaire aminozuren en 9-fluorenylmethylchloorformiaat (FMOC) voor secundaire aminozuren. Geautomatiseerde afleiding wordt vervolgens geïntegreerd in robuuste HPLC-analyse. De volledige procedure is snel, nauwkeurig, gevoelig en reproduceerbaar met behulp van Agilent 1190 HPLC.

Het hoofddoel van dit project is het identificeren van een nieuwe niet-invasieve biologische test voor de diagnose van LPS door circulerende serinespiegels te meten. De huidige gouden standaard is de detectie van Mdm2-versterking door de FISH.