脂肪肉腫の診断と予後のための新しい血液バイオマーカーの同定 (ESPACE)

肉腫はまれな疾患であり、成人の全悪性疾患の 1% 未満を占めています¹。 それらの発生率は、年間住民 100,000 人あたり約 6 例であり、フランスでは年間 4,000 から 5,000 例の新規症例が推定されています。

脂肪肉腫 (LPS) は、最も一般的な軟部肉腫のサブタイプであり、すべての肉腫の約 15% を占めています。

OMS 分類は、LPS の 5 つのカテゴリを区別します: 粘液様、多形性、円形細胞脂肪肉腫、脱分化型 (DD-LPS)、高分化型 (WD-LPS)。 研究チームは、この研究の最後の 2 つに興味を持っています。

画像検査（四肢腫瘍の場合はMRI、後腹膜LPSの場合はCT）で診断が疑われるため、エキスパートセンターの集学的腫瘍委員会での議論につながり、確定診断のために生検を検証し、最適な生検ルートを定義する必要があります。拡散のリスクを回避します。 フランスでは、肉腫患者の管理は、24 の「NETSARC」センターのネットワークを中心に組織されています。

WD-LPS および DD-LPS は、それぞれ良性脂肪腫瘍および未分化肉腫と区別するのが難しい場合があります。 蛍光 in situ ハイブリダイゼーション (FISH) による Mdm2 遺伝子増幅の検出に基づく分子分析は、現在「ゴールド スタンダード」です。 それは腫瘍生検で行われます。 生検は、ガイドラインで病気の蔓延のリスクを減らすために推奨されている放射線生検です。 したがって、診断を可能にする材料は限られているため、同じサンプルでの形態学、免疫組織化学、および分子生物学の実現が複雑になります。 もう 1 つの制限は、この腫瘍断片が常に腫瘍内の不均一性を反映しているとは限らないことです。

治療は、肉腫を専門とする外科医によるモノブロック切除による外科的治療です。 外科的切除にもかかわらず、局所および遠隔再発のリスクは、高分化型脂肪肉腫で約 26%、脱分化型後腹膜脂肪肉腫で最大 59% です。 再発の予後因子は、切除の質、腫瘍の大きさ、グレード、および後腹膜/四肢の局在です。 これら 2 種類の脂肪肉腫に関する問題は同じではありません。 WD-LPS では、計画外の R1 切除 (初回手術の約 50% を占める) の場合の再発リスクを知ることが問題となります。 実際、これらすべての症例の体系的な外科的修正は費用がかかり、病的ですが、症例の 50% では外科的回復で腫瘍の残存物が見つかりません。 DD-LPS の場合、非 R0 手術の場合、外科的修正は体系的でなければならないため、問題は異なりますが、適切な手術にもかかわらず局所再発のリスクと、補助治療を提案するために評価しなければならない転移リスクです。 （化学療法および/または放射線療法）を再発リスクの高い患者に適用することも、再発リスクの高い患者を選択するために予後の生物学的要因を特定することが不可欠になります。

臨床医は、病気の存在を示す新しい血液検査を特定することを提案しています。 それは診断に役立ちますが、切除手術後の残存疾患を評価することを可能にする予後にも役立ちます。 肉腫は複雑であるため、非侵襲的な方法で WD-LPS および DD-LPS の効果的で信頼性の高いバイオマーカーを特定することは困難ですが、臨床医は、彼らのプロジェクトがより効率的で患者に優しい検出方法を提供することを望んでいます。病気。 私たちのプロジェクトは、臨床医、研究者、生物統計学者が密接に協力して提供する補完的な専門知識に依存しています。

臨床医は最近、セリン代謝における p53 非依存性 Mdm2 タンパク質の新しい機能を特徴付けました。これは、LPS の発生において基本的な役割を果たす可能性があります。 汎ゲノムアプローチにより、臨床医は Mdm2 の新規転写活性を特徴付け、癌細胞の代謝におけるその役割を実証しました。 これらのデータは、クロマチンに Mdm2 が存在することで、セリンなどの特定のアミノ酸の代謝と輸送に関与する遺伝子の転写を制御できることを示しています。

内因性セリン プールは、栄養要求性と de novo 合成の間のバランスによって維持されます。これらは、がん細胞の同化ニーズをサポートするために、細胞の形質転換中に強力に規制緩和されます。 Mdm2 は、de novo 合成とセリン輸送に関与する標的遺伝子上の ATF ファミリーの転写因子を介して動員されます。

臨床医は、侵襲的な生検を必要としないLPSの予後と診断のための生物学的検査を特定することを提案しています。 この研究に含まれる患者は、WD-LPS または DD-LPS の患者であり、2 年間で 100 人の患者を含めることを目標としています。

LPSの成長がMdm2を介したセリン代謝の調節によって媒介されることを示す最近のデータに基づいて、臨床医はLPS開発の代理マーカーとしてセリンの血中レベルを測定することを提案しています。 セリンの細胞内レベルを維持するために、Mdm2 は de novo セリン合成 (解糖中間体 3-ホスホグリセレートを使用して細胞内でセリンを生成する代謝経路) と栄養要求性による細胞内へのセリンの侵入の両方を制御します。 多くの場合、数十センチメートルに達するLPSのサイズを考えると、LPSは微小環境によって生成され、セリンとグリシンのプールを循環させることによって腫瘍に伝達される可能性のあるセリンの大きな需要をもたらす可能性があるという仮説を立てました。 -細胞によってセリンに変換されます)。 血漿アミノ酸のプロファイリングは、液体クロマトグラフィー (HPLC) で簡単に測定できるため、臨床的に大きな関心を集めています。 臨床医は、血清中のセリンやグリシンなどのさまざまなアミノ酸を測定する HPLC メソッドをすでに検証しています。 血清セリンレベルは、コントロールマウスで測定された血清レベルと比較して、患者の腫瘍を有する異種移植マウスでより高いため、予備データは仮説と一致しています。 さらに、腫瘍増殖の劇的な減少を誘発するMdm2阻害剤による治療に応答して、循環セリンの減少が観察され得る。

臨床医は、Agilent テクノロジーのアミノ酸を測定するためにすでに開発された質量分析計と組み合わせた HPLC を使用します。 アミノ酸の定量分析は、スピードと感度、誘導反応の信頼性と分析技術を兼ね備えています。 これらの目標は、一級アミノ酸に o-フタルアルデヒド (OPA) を使用し、二級アミノ酸に 9-フルオレニルメチル クロロホルメート (FMOC) を使用する自動化されたオンライン誘導体化によって達成されます。 その後、自動導出が堅牢な HPLC 分析に統合されます。 すべての手順は、Agilent 1190 HPLC を使用することで、迅速、正確、高感度で再現性があります。

このプロジェクトの主な目的は、循環セリン レベルを測定することにより、LPS を診断するための新しい非侵襲的な生物学的検査を特定することです。 現在のゴールド スタンダードは、FISH による Mdm2 増幅の検出です。