지방육종의 진단과 예후를 위한 새로운 혈액 바이오마커 발굴 (ESPACE)

육종은 성인의 모든 악성 질환의 1% 미만을 차지하는 희귀 질환입니다¹. 이들의 발병률은 매년 주민 100,000명당 약 6건의 새로운 사례입니다. 즉, 프랑스에서 연간 4,000~5,000건의 새로운 사례가 추정됩니다.

지방육종(LPS)은 모든 육종의 약 15%를 차지하는 가장 흔한 연조직 육종 아형입니다.

OMS 분류는 LPS를 점액양, 다형성, 원형 세포 지방육종, 탈분화(DD-LPS) 및 잘 분화(WD-LPS)의 5가지 범주로 구분합니다. 연구팀은 이 연구의 마지막 두 가지에 관심이 있습니다.

영상 검사(사지 종양의 경우 MRI 및 후복막 LPS의 경우 CT)에서 진단이 의심되며, 전문가 센터의 다학제 종양 위원회에서 논의로 이어져 최종 진단을 위한 생검을 검증하고 최적의 생검 경로를 정의해야 합니다. 확산 위험을 피하십시오. 프랑스에서는 육종 환자 관리가 24개의 "NETSARC" 센터 네트워크를 중심으로 구성됩니다.

WD-LPS 및 DD-LPS는 각각 양성 지방 종양 및 미분화 육종과 구별하기 어려울 수 있습니다. FISH(Fluorescence in situ Hybridization)에 의한 Mdm2 유전자 증폭의 검출에 기반한 분자 분석은 현재 "황금 표준"입니다. 그것은 종양 생검에서 수행됩니다. 생검은 질병 확산의 위험을 줄이기 위해 지침에서 권장하는 방사선 생검입니다. 따라서 진단을 가능하게 하는 물질이 제한되어 동일한 샘플에 대한 형태학, 면역조직화학 및 분자 생물학의 실현을 복잡하게 만듭니다. 다른 한계는 이 종양 조각이 항상 종양 내 이질성을 반영하지 않는다는 것입니다.

치료는 육종 전문 외과의에 의한 단일 블록 절제술로 외과적입니다. 외과적 절제에도 불구하고 국소 및 원격 재발 위험은 잘 분화된 지방육종⁵의 경우 약 26%, 역분화 후복막 지방육종의 경우 최대 59%입니다. 재발에 대한 예후 인자는 절제의 질, 종양 크기, 등급, 후복막/사지 국소화입니다. 이 두 가지 유형의 지방 육종에 관한 문제는 동일하지 않습니다. WD-LPS에서 문제는 계획되지 않은 R1 절제(초기 수술의 약 50%를 나타냄)의 경우 재발 위험을 아는 것입니다. 실제로 이러한 모든 경우의 체계적인 외과적 교정은 비용이 많이 들고 병적인 반면, 50%의 경우에서는 외과적 회복 시 종양 잔류물이 발견되지 않습니다. DD-LPS의 경우 non-R0 수술의 경우 수술적 재수술이 체계적으로 이루어져야 하기 때문에 문제가 다르지만 보조 치료를 제안하기 위해서는 적절한 수술에도 불구하고 국소 재발의 위험과 전이 위험을 평가해야 합니다. (화학 요법 및 / 또는 방사선 요법) 재발 위험이 높은 환자에게 또한 재발 위험이 높은 환자를 선택하기 위해 예후의 생물학적 요인을 식별하는 것이 필수적입니다.

임상의는 질병의 존재를 나타내는 새로운 혈액 검사를 식별할 것을 제안합니다. 그러면 진단뿐만 아니라 절제 수술 후 잔여 질환을 평가할 수 있는 예후에도 도움이 됩니다. 육종의 복잡성으로 인해 비침습적 방법으로 WD-LPS 및 DD-LPS에 대한 효과적이고 신뢰할 수 있는 바이오마커를 식별하는 것은 어려운 일이지만 임상의는 그들의 프로젝트가 육종 검출을 위한 보다 효율적이고 환자 친화적인 방법을 제공하기를 희망합니다. 질병. 우리의 프로젝트는 임상의, 연구원 및 생물통계학자가 긴밀히 협력하여 제공하는 보완적인 전문 지식에 의존합니다.

임상의들은 최근 세린 대사에서 p53 독립형 Mdm2 단백질의 새로운 기능을 특징지었습니다. 이는 LPS 발달에 근본적인 역할을 할 수 있습니다. 범게놈 접근법을 통해 임상의는 Mdm2의 새로운 전사 활성을 특징짓고 암세포 대사에서의 역할을 입증했습니다. 이러한 데이터는 염색질에 Mdm2가 존재하면 세린과 같은 특정 아미노산의 대사 및 수송에 관여하는 유전자의 전사를 제어할 수 있음을 나타냅니다.

내인성 세린 풀은 암 세포의 단백동화 요구를 지원하기 위해 세포 변형 동안 강력하게 규제가 완화되는 영양요구성과 새로운 합성 사이의 균형에 의해 유지됩니다. Mdm2는 de novo 합성 및 세린 수송과 관련된 표적 유전자에서 ATF 계열의 전사 인자를 통해 모집됩니다.

임상의는 침습적 생검이 필요하지 않은 LPS의 예후 및 진단을 위한 생물학적 테스트를 식별할 것을 제안합니다. 연구에 포함된 환자는 WD-LPS 또는 DD-LPS 환자이며 2년 동안 100명의 환자를 포함하는 것을 목표로 합니다.

LPS 성장이 세린 대사의 Mdm2 매개 조절에 의해 매개된다는 것을 보여주는 최근 데이터를 기반으로, 임상의는 LPS 발달을 위한 대리 마커로서 세린 혈중 농도를 측정할 것을 제안합니다. 세린의 세포내 수준을 유지하기 위해 Mdm2는 de novo 세린 합성(세포에서 세린을 생성하기 위해 당분해 중간체 3-Phospho-Glycerate를 사용하는 대사 경로)과 영양요구성에 의한 세포 내 세린의 진입을 모두 제어합니다. 종종 수십 센티미터에 이를 수 있는 LPS의 크기를 감안할 때, 임상의들은 LPS가 미세 환경에 의해 생성될 수 있고 세린과 글리신의 순환 풀을 통해 종양으로 전달될 수 있는 세린에 대한 상당한 수요를 초래할 수 있다는 가설을 세웠습니다. - 세포에 의해 세린으로 전환됨). 혈장 아미노산 프로파일링은 액체 크로마토그래피(HPLC)로 쉽게 측정할 수 있기 때문에 임상적으로 매우 중요합니다. 임상의는 혈청에서 세린과 글리신을 포함한 다양한 아미노산을 측정하는 HPLC 방법을 이미 검증했습니다. 우리의 예비 데이터는 대조군 마우스에서 측정된 혈청 수준에 비해 환자 종양이 있는 이종이식 마우스에서 혈청 세린 수준이 더 높기 때문에 우리의 가설과 일치합니다. 또한 종양 성장의 급격한 감소를 유도하는 Mdm2 억제제 치료에 대한 반응으로 순환 세린의 감소가 관찰될 수 있습니다.

임상의는 애질런트 기술의 아미노산을 측정하기 위해 이미 개발된 질량 분석법과 결합된 HPLC를 사용합니다. 아미노산의 정량 분석은 유도 반응의 신뢰성 및 분석 기술과 속도 및 감도를 결합합니다. 이러한 목표는 1차 아미노산에 대해 o-프탈알데히드(OPA)를 사용하고 2차 아미노산에 대해 9-플루오레닐메틸 클로로포르메이트(FMOC)를 사용하는 자동화 및 온라인 유도체화에 의해 달성됩니다. 그런 다음 자동화된 유도가 강력한 HPLC 분석에 통합됩니다. 전체 절차는 Agilent 1190 HPLC를 사용하여 빠르고 정확하며 민감하고 재현 가능합니다.

이 프로젝트의 주요 목적은 순환 세린 수준을 측정하여 LPS 진단을 위한 새로운 비침습적 생물학적 테스트를 식별하는 것입니다. 현재의 황금 표준은 FISH에 의한 Mdm2 증폭의 검출입니다.