Endotoksinindusert inflammatorisk og atferdsrespons og prediktorer for individuelle forskjeller

Studere design

Tjuefem forsøkspersoner vil bli inkludert i denne studien, som vil følge et prospektivt, placebokontrollert og cross-over design. Deltakerne vil bli blindet, samt forskningspersonell med ansvar for deltakerne og laboratoriet.

Emner vil bli tilfeldig tildelt i cross-over-designet med to forsøk, med omtrent fire ukers utvasking mellom LPS-stimuleringer:

1. Forsøk 1: endotoksin. Forsøkspersonene vil få en intravenøs injeksjon av endotoksin med 2 ng/kg kroppsvekt.
2. Forsøk 2: placebo. Pasienter vil få en intravenøs injeksjon av natriumklorid som placebo for endotoksininjeksjon.

Ti andre friske frivillige vil bli rekruttert i en pilotstudie før starten av hovedstudien, for å teste atferdsoppgavene som skal brukes. Disse fagene skal rekrutteres blant universitetsansatte eller blant universitetsstudenter. De vil utføre fire spesifikke atferdsoppgaver og vil fylle ut spørreskjemaene som vurderer psykologiske og atferdsmessige variabler for å knytte utfall fra atferdsoppgavene til psykologiske og subjektive atferdsvurderinger. Det vil ikke bli tatt biologiske prøver (blod-, urin- eller t-skjorteprøver) hos forsøkspersoner rekruttert i pilotstudien.

Behandling

LPS er levert av LGC Promochem AB, Albanoliden 5, 4tr, 506 30 Borås, Sverige. USP (United States Pharmacopeial Convention) Endotoxin (Cat. nr. 1235503) kommer som et lyofilisert (frysetørket) pulver og hvert hetteglass inneholder 10 000 USP endotoksinenheter. Hvert hetteglass inneholder omtrent 1 mikrogram endotoksin og er blandet med 5 milliliter (ml) sterilt vann.

Studieprosedyre

Studien vil bli utført ved Institutt for kliniske vitenskaper, Danderyd sykehus.

Før inkludering og randomisering vil forsøkspersoner komme til sykehuset for å bli underkastet en medisinsk undersøkelse, inkludert elektrokardiogram og blodlaboratorieanalyser. Sosiodemografiske data og sykehistorie vil bli vurdert ved denne anledningen, samt kroppsvariabler (vekt, høyde, kroppssammensetning) og fysisk aktivitet ved hjelp av den svenske versjonen av IPAQ (International Physical Activity Questionnaire). Historie med alvorlig depresjon vil bli vurdert ved hjelp av Mini-International Neuropsychiatric Interview (M.I.N.I.) for alvorlig depresjon. Psykologiske variabler som kan påvirke den atferdsmessige (eller immune) responsen på LPS, og som ikke antas å endre seg mellom screeningdagen og prøvedagene, vil også bli vurdert på det tidspunktet ved hjelp av flere nettbaserte selvevalueringsspørreskjemaer. Disse tiltakene vil omfatte forsøkspersonens oppfatning av kropp og helserisiko (f.eks. interoceptiv bevissthet, opplevd sårbarhet for sykdom, helseangst og avskyreaktivitet, somatosensorisk forsterkning, frykt for angstrelaterte opplevelser) og psykologisk velvære (f.eks. oppfattet stress, optimisme, sosial støtte, kognitivt velvære). Den totale tiden for medisinsk undersøkelse vil være på 30-45 minutter. Tiden for å fylle ut spørreskjemaer er beregnet til omtrent 45 minutter, men kan gjøres hjemmefra. Deltakerne får også et sett med T-skjorte (med innsydde bomullspads) og en duftfri såpe. Deltakerne vil bli bedt om å bruke t-skjorten om morgenen (etter å ha vasket armhulene) på hver prøvedag, og ta den av etter ankomst. Dette vil tillate innsamling av prøver av kroppslukt før behandling (grunnlinje).

Deltakerne vil deretter bli utsatt for de to forsøkene utført i en randomisert rekkefølge, med minst seks ukers utvasking: endotoksin versus placebo.

Deltakerne vil bli bedt om å avstå fra hard trening og alkoholinntak 48 timer før prøvedagen, for å unngå sterke krydder 24 timer før prøvedagen, og ta en lett frokost morgenen på prøvedagen. Deltakerne ankommer om morgenen (kl. 07.30). De skal levere inn morgen-T-skjorten (se over) og bytte til en ny T-skjorte (med innsydde bomullspads i armhulen) for å ha på seg hele dagen. T-skjortene vil bli brukt til atferdsvurdering og analyse av kroppsluktforbindelse. Kort tid etter ankomst vil to intravenøse katetre bli plassert: ett for blodprøvetaking på en arm og ett på en hånd for injeksjon av endotoksin eller natriumklorid som skal fjernes etter injeksjonen. En bedøvelseskrem vil bli gitt for å spre på armen for å minimere smerten ved venepunktur. Forsøkspersonene vil deretter hvile i minst 30 minutter.

Injeksjon av endotoksin eller natriumklorid vil bli utført når resten er fullført (rundt kl. 8.30). Blodprøver (10 ml i EDTA-rør (etylendiamintetraeddiksyre) og 10 ml i natriumsitratrør) vil bli tatt rett før endotoksin- eller natriumkloridinjeksjonen og 1, 1,5, 2, 3, 4, 5, 6 og 7,5 timer etter injeksjonen. injeksjon. I tillegg vil 2,5 ml i PAXGene™-rør tas før og 2, 4 og 7,5 timer etter injeksjonen. Ytterligere to prøver i EDTA-rør (8 mL blod) vil bli tatt før injeksjonen og 3 og 7,5 timer etter injeksjonen. Den totale mengden blod som tas vil være på ca. 200 ml, tilsvarende en tredjedel av mengden gitt ved en bloddonasjon. Blodprøver vil bli brukt til å måle konsentrasjoner av pro- og anti-inflammatoriske cytokiner og andre inflammatoriske markører (f.eks. C-Reactive protein - CRP) ved bruk av Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), immuncellesubpopulasjoner og konsentrasjoner av mikropartikler ved bruk av flowcytometri , genetiske markører som bruker Cap-analyse-genekspresjon (CAGE) analyser og antall hvite blodlegemer og differensial.

Urinprøver vil bli tatt før endotoksin- eller natriumkloridinjeksjonen (dvs. før katetrene plasseres) og så sent som mulig etter injeksjonen (klassisk rundt fire timer etter injeksjonen).

Deltakerne vil bli overvåket med kontinuerlig elektrokardiogram. Oksygenmetning (SO2), blodtrykk og kroppstemperatur vil bli overvåket hvert 30. minutt. Nitrogendioksid (NO2) vil bli overvåket kontinuerlig, methemoglobin sjekkes samtidig med hver blodprøve.

Selvevalueringsspørreskjemaer som vurderer atferdsmessige og psykologiske variabler vil bli utfylt av deltakerne like før endotoksin- eller natriumkloridinjeksjonen (i hvileperioden), tre timer og 7,5 timer etter injeksjonen. Et kort spørreskjema som vurderer sykdomsatferd (SicknessQ) vil bli utfylt gjentatte ganger av deltakerne fra like før til 7,5 timer etter endotoksin- eller natriumkloridinjeksjonen. Emner vil bli filmet når de er i seng og vil bære et sosiometrisk merke, for å analysere deltakernes atferdsmessige respons på en standardisert situasjon med sosial interaksjon.

Fotografier vil bli tatt før (dvs. før katetrene plasseres), to timer etter og 7,5 timer etter injeksjonen, for ytterligere vurdering av ansiktene (f.eks. helse, attraktivitet, tretthet). Parallelt vil hudfarge måles samtidig med blodprøver (unntatt T1.5) for å vurdere en potensiell medierende effekt av ansikters helsevurderinger. Analyse av forsøkspersonens gang og bevegelse vil bli utført to og en halv time etter injeksjonen. Korte datastyrte kognitive tester vil bli utført etter disse testene, like før tre timer etter injeksjonen. Forsøkspersonene vil utføre en motivasjonsoppgave etter å ha fylt ut spørreskjemaene tre timer etter injeksjonen. I tillegg vil to tester som vurderer atferd som respons på positive/negative og sunne/syke stimuli (en tilnærmings-unngåelsesatferdstest og en regulering av følelser) utføres tre og en halv time etter injeksjonen.

Deltakerne får ta et lett måltid (snack og juicedrikke) rundt lunsjtid (12.30) og leverer inn t-skjorten like før fem og en halv time etter injeksjonen.

De siste blodprøvene vil bli tatt 7,5 timer etter injeksjonen og deltakerne skrives ut.

Overvåking av forsøket vil bli utført av en lege, overvåket av en spesialist i anestesi og intensivbehandling.