Endotoksin-induceret inflammatoriske og adfærdsmæssige reaktioner og forudsigelser af individuelle forskelle

Studere design

Femogtyve forsøgspersoner vil blive inkluderet i denne undersøgelse, som vil følge et prospektivt, placebokontrolleret og cross-over design. Deltagerne vil blive blindet, samt forskningspersonale med ansvar for deltagerne og laboratoriet.

Emner vil blive tilfældigt tildelt i cross-over-designet med to forsøg, med omkring fire ugers udvaskning mellem LPS-stimuleringer:

1. Forsøg 1: endotoksin. Forsøgspersonerne vil modtage en intravenøs injektion af endotoksin med 2 ng/kg legemsvægt.
2. Forsøg 2: placebo. Forsøgspersonerne vil modtage en intravenøs injektion af natriumchlorid som placebo for endotoksin-injektion.

Ti andre raske frivillige vil blive rekrutteret i et pilotstudie forud for begyndelsen af ​​hovedundersøgelsen, for at teste de adfærdsmæssige opgaver, der vil blive brugt. Disse fag vil blive rekrutteret blandt universitetspersonalet eller blandt universitetsstuderende. De vil udføre fire specifikke adfærdsmæssige opgaver og vil udfylde spørgeskemaerne, der vurderer psykologiske og adfærdsmæssige variabler for at knytte resultater fra adfærdsopgaverne til psykologiske og subjektive adfærdsvurderinger. Der vil ikke blive taget biologiske prøver (blod-, urin- eller t-shirtprøver) hos forsøgspersoner, der er rekrutteret i pilotundersøgelsen.

Behandling

LPS'en leveres af LGC Promochem AB, Albanoliden 5, 4tr, 506 30 Borås, Sverige. USP (United States Pharmacopeial Convention) Endotoxin (Cat. nr. 1235503) kommer som et frysetørret (frysetørret) pulver, og hvert hætteglas indeholder 10.000 USP endotoksinenheder. Hvert hætteglas indeholder meget ca. 1 mikrogram Endotoxin og er blandet med 5 milliliter (ml) sterilt vand.

Studieprocedure

Undersøgelsen vil blive udført på Klinisk Afdeling, Danderyd Hospital.

Forud for inklusion og randomisering vil forsøgspersoner komme på hospitalet for at blive underkastet en lægeundersøgelse, herunder elektrokardiogram og blodlaboratorieanalyser. Sociodemografiske data og sygehistorie vil blive vurderet ved denne lejlighed, såvel som kropsvariabler (vægt, højde, kropssammensætning) og fysisk aktivitet ved hjælp af den svenske version af IPAQ (International Physical Activity Questionnaire). Anamnese med svær depression vil blive vurderet ved hjælp af Mini-International Neuropsychiatric Interview (M.I.N.I.) for svær depression. Psykologiske variabler, der kan påvirke den adfærdsmæssige (eller immune) reaktion på LPS, og som ikke menes at ændre sig mellem screeningsdagen og forsøgsdagene, vil også blive vurderet på det tidspunkt ved hjælp af flere webbaserede selvevalueringsspørgeskemaer. Disse mål vil omfatte forsøgspersonernes opfattelse af kroppen og sundhedsrisiko (f.eks. interoceptiv bevidsthed, opfattet sårbarhed over for sygdom, helbredsangst og afsky reaktivitet, somatosensorisk forstærkning, frygt for angst-relaterede fornemmelser) og psykologisk velvære (f.eks. stress, optimisme, social støtte, kognitivt velvære). Den samlede tid for lægeundersøgelsen vil være på 30-45 minutter. Tiden til at udfylde spørgeskemaer er estimeret til cirka 45 minutter, men kan udføres hjemmefra. Deltagerne får desuden et sæt med en T-shirt (med indsyede vatrondeller) og en duftfri sæbe. Deltagerne vil blive bedt om at bære T-shirten om morgenen (efter vask af armhuler) på hver prøvedag og tage den af ​​efter deres ankomst. Dette vil gøre det muligt at indsamle prøver af kropslugt til forbehandling (baseline).

Deltagerne vil derefter blive udsat for de to forsøg udført i en randomiseret rækkefølge med mindst seks ugers udvaskning: endotoksin versus placebo.

Deltagerne vil blive bedt om at afholde sig fra anstrengende motion og alkoholindtagelse 48 timer før prøvedagen, for at undgå stærke krydderier 24 timer før prøvedagen, og at tage en let morgenmad om morgenen på prøvedagen. Deltagerne ankommer om morgenen (kl. 7.30). De afleverer deres morgen-T-shirt (se ovenfor) og skifter til en ny T-shirt (med indsyede vatrondeller i armhulen) til at have på hele dagen. T-shirtsene vil blive brugt til adfærdsvurdering og analyse af kropslugtforbindelse. Kort efter deres ankomst vil to intravenøse katetre blive placeret: et til blodprøvetagning på den ene arm og et på den ene hånd til injektion af endotoksin eller natriumklorid, der fjernes efter injektionen. En bedøvelsescreme vil blive givet til at sprede på deres arm for at minimere smerten ved venepunktur. Forsøgspersonerne vil derefter hvile i mindst 30 minutter.

Injektion af endotoksin eller natriumchlorid vil blive udført, når resten er afsluttet (omkring kl. 8.30). Blodprøver (10 ml i EDTA-rør (ethylendiamintetraeddikesyre) og 10 ml i natriumcitratrør) vil blive taget lige før endotoksin- eller natriumchloridinjektionen og 1, 1,5, 2, 3, 4, 5, 6 og 7,5 timer efter injektionen. indsprøjtning. Derudover tages 2,5 ml PAXGene™-rør før og 2, 4 og 7,5 timer efter injektionen. To yderligere prøver i EDTA-rør (8 ml blod) tages før injektionen og 3 og 7,5 timer efter injektionen. Den samlede mængde blod, der tages, vil være på omkring 200 ml, svarende til en tredjedel af den mængde, der gives ved en bloddonation. Blodprøver vil blive brugt til at måle koncentrationer af pro- og anti-inflammatoriske cytokiner og andre inflammatoriske markører (f.eks. C-Reactive protein - CRP) ved hjælp af Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), immuncellesubpopulationer og koncentrationer af mikropartikler ved hjælp af flowcytometri , genetiske markører ved hjælp af Cap-analyse-genekspression (CAGE) analyser og antal hvide blodlegemer og differential.

Urinprøver vil blive taget før endotoksin- eller natriumchloridinjektionen (dvs. før katetrene placeres) og så sent som muligt efter injektionen (klassisk omkring fire timer efter injektionen).

Deltagerne vil blive overvåget med kontinuerligt elektrokardiogram. Iltmætning (SO2), blodtryk og kropstemperatur vil blive overvåget hvert 30. minut. Nitrogendioxid (NO2) vil blive overvåget kontinuerligt, methæmoglobin kontrolleres på samme tid som hver blodprøve.

Selvevalueringsspørgeskemaer, der vurderer adfærdsmæssige og psykologiske variabler, vil blive udfyldt af deltagerne lige før endotoksin- eller natriumchloridinjektionen (i hvileperioden), tre timer og 7,5 timer efter injektionen. Et kort spørgeskema, der vurderer sygdomsadfærd (SicknessQ) vil blive udfyldt gentagne gange af deltagerne fra lige før til 7,5 timer efter endotoksin- eller natriumchloridinjektionen. Emner vil blive filmet, når de er i seng og vil bære et sociometrisk badge for at analysere deltagernes adfærdsmæssige reaktion på en standardiseret situation med social interaktion.

Fotografier vil blive taget før (dvs. før katetrene placeres), to timer efter og 7,5 timer efter injektionen for yderligere vurdering af ansigterne (f.eks. sundhed, tiltrækningskraft, træthed). Parallelt hermed vil hudfarve blive målt på samme tid som blodprøver (undtagen T1.5) for at vurdere en potentiel medierende effekt af ansigters helbredsvurderinger. Analyse af forsøgspersonernes gang og bevægelse vil blive udført to en halv time efter injektionen. Korte computeriserede kognitive tests vil blive udført efter disse tests, lige før tre timer efter injektionen. Forsøgspersonerne udfører en motivationsopgave efter at have udfyldt spørgeskemaerne tre timer efter injektionen. Derudover vil to test, der vurderer adfærd som reaktion på positive/negative og sunde/syge stimuli (en tilgangs-undgåelsesadfærdstest og en regulering af følelsesmæssige test) blive udført tre og en halv time efter injektionen.

Deltagerne får lov til at indtage et let måltid (snack og juicedrik) omkring frokosttid (12.30) og afleverer deres T-shirt lige før fem en halv time efter indsprøjtningen.

De sidste blodprøver tages 7,5 timer efter injektionen og deltagerne udskrives.

Overvågning af forsøget vil blive foretaget af en læge, overvåget af en specialist i anæstesi og intensiv pleje.