Endotoxin által kiváltott gyulladásos és viselkedési válaszok és az egyéni különbségek előrejelzői

Dizájnt tanulni

A jelen tanulmányban huszonöt alany szerepel majd, amely prospektív, placebo-kontrollos és keresztezett elrendezést fog követni. A résztvevők, valamint a résztvevőkért és a laboratóriumért felelős kutatószemélyzet vakok lesznek.

Az alanyokat véletlenszerűen osztják ki a keresztezési tervben, két kísérlettel, körülbelül négy héttel az LPS-stimulációk között:

1. 1. próba: endotoxin. Az alanyok 2 ng/testtömeg-kg intravénás endotoxin injekciót kapnak.
2. 2. próba: placebo. Az alanyok intravénás nátrium-klorid injekciót kapnak endotoxin injekció placebójaként.

Tíz másik egészséges önkéntest vesznek fel egy kísérleti vizsgálatba a fő vizsgálat megkezdése előtt, hogy teszteljék az alkalmazott viselkedési feladatokat. Ezeket a tantárgyakat az egyetemi dolgozók vagy az egyetemi hallgatók körében toborozzák. Négy konkrét viselkedési feladatot hajtanak végre, és kitöltik a pszichológiai és viselkedési változókat értékelő kérdőíveket, hogy a viselkedési feladatok eredményeit a pszichológiai és szubjektív viselkedési értékelésekhez társítsák. Nem vesznek biológiai mintát (vér-, vizelet- vagy pólómintát) a kísérleti vizsgálatba bevont alanyoktól.

Kezelés

Az LPS-t az LGC Promochem AB, Albanoliden 5, 4tr, 506 30 Borås, Svédország biztosítja. Az USP (Egyesült Államok Gyógyszerkönyvi Egyezménye) Endotoxin (Kat. No. 1235503) liofilizált (fagyasztva szárított) por formájában érkezik, és minden injekciós üveg 10 000 USP Endotoxin Egységet tartalmaz. Minden injekciós üveg körülbelül 1 mikrogramm endotoxint tartalmaz, és 5 ml (ml) steril vízzel keverjük össze.

Tanulmányi eljárás

A vizsgálatot a Danderyd Kórház Klinikai Tudományok Osztályán végzik.

A felvétel és a randomizálás előtt az alanyok a kórházba kerülnek, hogy orvosi vizsgálatnak vetik alá őket, beleértve az elektrokardiogramot és a vér laboratóriumi elemzéseit. Ezen az alkalmon a szocio-demográfiai adatok és a kórtörténet, valamint a testváltozók (súly, magasság, testösszetétel) és a fizikai aktivitás értékelésére kerül sor az IPAQ (International Physical Activity Questionnaire) svéd változata segítségével. A major depresszió történetét a Mini-International Neuropsychiatric Interview (M.I.N.I.) segítségével értékeljük a major depresszióra vonatkozóan. Azokat a pszichológiai változókat, amelyek befolyásolhatják az LPS-re adott viselkedési (vagy immun-) választ, és amelyekről feltételezhető, hogy nem változnak a szűrési nap és a próbanapok között, több webalapú önértékelő kérdőív segítségével is felmérjük. Ezek az intézkedések magukban foglalják az alanyok testérzékelését és egészségügyi kockázatát (pl. interoceptív tudatosság, betegségekkel szembeni észlelt sebezhetőség, egészségi szorongás és undorító reakciókészség, szomatoszenzoros felerősítés, a szorongással kapcsolatos érzésektől való félelem) és pszichológiai jólét (pl. észlelt stressz, optimizmus, szociális támogatás, kognitív jóllét). Az orvosi vizsgálat teljes ideje 30-45 perc. A kérdőívek kitöltésének ideje körülbelül 45 perc, de otthonról is elvégezhető. A résztvevők egy pólóval (bevarrt vattakorongokkal) és egy illatmentes szappant tartalmazó készletet is kapnak. A résztvevőket arra kérik, hogy reggel (hónaljmosás után) viseljék a pólót minden próbanapon, és érkezés után vegyék le. Ez lehetővé teszi a testszagról a kezelés előtti (alapvonal) minták gyűjtését.

A résztvevőket ezután randomizált sorrendben, legalább hathetes kimosással, két kísérletnek vetik alá: endotoxin kontra placebo.

A résztvevőket arra kérik, hogy a próba napja előtt 48 órával tartózkodjanak a megerőltető testmozgástól és az alkoholfogyasztástól, 24 órával a próba előtt kerüljék az erős fűszereket, és a próbanap reggelén egy könnyű reggelit. A résztvevők reggel (7.30-kor) érkeznek. Beöltözik a reggeli pólójukat (lásd fent), és átöltöznek egy új pólóra (bevarrt vattakorongokkal a hónaljban), hogy egész nap viseljék. A pólókat viselkedésértékelésre és a testszagok elemzésére használják. Röviddel érkezésük után két intravénás katétert helyeznek el: az egyiket az egyik karban lévő vérvételhez, a másikat pedig az endotoxin vagy a nátrium-klorid injekció beadásához, amelyet az injekció beadása után eltávolítanak. A karjukon érzéstelenítő krémet biztosítanak a vénapunkció fájdalmának minimalizálása érdekében. Ezután az alanyok legalább 30 percig pihennek.

Az endotoxin vagy nátrium-klorid injekció beadására akkor kerül sor, amikor a többi befejeződött (körülbelül reggel 8.30). Vérmintákat (10 ml EDTA (etilén-diamin-tetraecetsav) csövekben és 10 ml nátrium-citrát csövekben) közvetlenül az endotoxin vagy nátrium-klorid injekció beadása előtt és 1, 1,5, 2, 3, 4, 5, 6 és 7,5 órával azután vesznek. injekció. Ezenkívül 2,5 ml PAXGene™ csöveket vesznek be az injekció beadása előtt, valamint 2, 4 és 7,5 órával azután. Két további mintát vesznek EDTA-csövekből (8 ml vért) az injekció beadása előtt, valamint 3 és 7,5 órával az injekció beadása után. A vér teljes mennyisége körülbelül 200 ml lesz, ami a véradáskor adott vérmennyiség harmadának felel meg. Vérmintákat használnak a pro- és gyulladásgátló citokinek és egyéb gyulladásos markerek (pl. C-reaktív fehérje – CRP) koncentrációjának mérésére enzimhez kötött immunszorbens vizsgálattal (ELISA), immunsejt-alpopulációk és mikrorészecskék koncentrációinak mérésére áramlási citometriával. , genetikai markerek Cap elemzés génexpresszió (CAGE) elemzések és fehérvérsejtszám és differenciál segítségével.

A vizeletmintákat az endotoxin vagy nátrium-klorid injekció beadása előtt (azaz a katéterek behelyezése előtt) és az injekció beadása után a lehető legkésőbb (klasszikusan körülbelül négy órával az injekció beadása után) veszik.

A résztvevőket folyamatos elektrokardiogrammal ellenőrizzük. Az oxigéntelítettséget (SO2), a vérnyomást és a testhőmérsékletet 30 percenként ellenőrzik. A nitrogén-dioxidot (NO2) folyamatosan ellenőrizzük, a methemoglobint minden vérmintával egy időben ellenőrizzük.

A viselkedési és pszichológiai változókat értékelő önértékelő kérdőíveket a résztvevők közvetlenül az endotoxin vagy nátrium-klorid injekció beadása előtt (a pihenőidő alatt), az injekció beadása után három órával és 7,5 órával töltik ki. A résztvevők ismételten kitöltenek egy rövid kérdőívet, amely értékeli a betegséggel kapcsolatos viselkedést (SicknessQ), közvetlenül az endotoxin vagy nátrium-klorid injekció beadása előtt, egészen 7,5 órával azután. Az alanyokat ágyban filmre veszik, és szociometrikus kitűzőt viselnek, hogy elemezzék a résztvevők viselkedési reakcióit a társadalmi interakció szabványos helyzetére.

Fényképek készülnek az injekció beadása előtt (azaz a katéterek behelyezése előtt), két órával az injekció beadása után és 7,5 órával az arcok további értékelése céljából (pl. egészség, vonzerő, fáradtság). Ezzel párhuzamosan a bőrszínt a vérmintákkal egy időben mérik (kivéve a T1.5-öt), hogy felmérjék az arcok egészségi állapotának lehetséges közvetítő hatását. Az injekció beadása után két és fél órával az alanyok járásának és mozgásának elemzésére kerül sor. Rövid számítógépes kognitív teszteket végeznek ezek után a tesztek után, három órával az injekció beadása után. Az alanyok a kérdőívek kitöltése után motivációs feladatot hajtanak végre három órával az injekció beadása után. Ezenkívül három és fél órával az injekció beadása után két tesztet is végeznek, amelyek a pozitív/negatív és az egészséges/betegség ingerekre adott viselkedést értékelik (egy megközelítés-elkerülési viselkedés teszt és egy érzelemszabályozás teszt).

Ebédidőben (12:30) a résztvevők könnyű ételeket (snack és gyümölcslé) fogyaszthatnak, és pólójukat az injekció beadása után öt és fél órával korábban leadhatják.

Az utolsó vérmintákat az injekció beadása után 7,5 órával veszik, és a résztvevőket hazaengedik.

A kísérlet ellenőrzését orvos végzi, altatásos és intenzív terápiás szakember felügyelete mellett.