Endotoxinem indukované zánětlivé a behaviorální reakce a prediktory individuálních rozdílů

Studovat design

Do této studie bude zahrnuto 25 subjektů, které se budou řídit prospektivním, placebem kontrolovaným a zkříženým designem. Účastníci budou oslepeni, stejně jako výzkumní pracovníci, kteří mají na starosti účastníky a laboratoř.

Subjekty budou náhodně rozděleny do zkříženého designu se dvěma studiemi, s přibližně čtyřtýdenním vymýváním mezi stimulacemi LPS:

1. Pokus 1: endotoxin. Subjekty dostanou intravenózní injekci endotoxinu v dávce 2 ng/kg tělesné hmotnosti.
2. Pokus 2: placebo. Subjekty dostanou intravenózní injekci chloridu sodného jako placebo injekce endotoxinu.

Deset dalších zdravých dobrovolníků bude přijato do pilotní studie před začátkem hlavní studie, aby se otestovaly behaviorální úkoly, které budou použity. Tyto subjekty budou získávány mezi zaměstnanci univerzity nebo mezi studenty vysokých škol. Provedou čtyři specifické behaviorální úkoly a vyplní dotazníky hodnotící psychologické a behaviorální proměnné, aby přiřadili výsledky behaviorálních úkolů k psychologickým a subjektivním behaviorálním hodnocením. U subjektů zařazených do pilotní studie nebudou odebrány žádné biologické vzorky (krev, moč nebo vzorky triček).

Léčba

LPS poskytuje LGC Promochem AB, Albanoliden 5, 4tr, 506 30 Borås, Švédsko. USP (United States Pharmacopeial Convention) Endotoxin (kat. č. 1235503) se dodává jako lyofilizovaný (lyofilizovaný) prášek a každá lahvička obsahuje 10 000 jednotek endotoxinu USP. Každá lahvička obsahuje přibližně 1 mikrogram endotoxinu a smíchá se s 5 mililitry (ml) sterilní vody.

Postup při studiu

Studie bude provedena na oddělení klinických věd v nemocnici Danderyd.

Před zařazením a randomizací budou subjekty přicházet do nemocnice, aby byly podrobeny lékařskému vyšetření, včetně elektrokardiogramu a krevních laboratorních analýz. Při této příležitosti budou posouzeny sociodemografické údaje a zdravotní anamnéza, stejně jako tělesné proměnné (váha, výška, tělesné složení) a fyzická aktivita pomocí švédské verze IPAQ (International Physical Activity Questionnaire). Historie velké deprese bude hodnocena pomocí Mini-International Neuropsychiatric Interview (M.I.N.I.) pro velkou depresi. Psychologické proměnné, které by mohly ovlivnit behaviorální (nebo imunitní) odpověď na LPS ao kterých se předpokládá, že se mezi dnem screeningu a zkušebním dnem nezmění, budou také hodnoceny v té době pomocí několika webových sebehodnoticích dotazníků. Tato opatření budou zahrnovat vnímání těla a zdravotního rizika subjekty (např. interoceptivní uvědomění, vnímaná zranitelnost vůči nemocem, zdravotní úzkost a reaktivita znechucení, somatosenzorické zesílení, strach z pocitů souvisejících s úzkostí) a psychickou pohodu (např. stres, optimismus, sociální podpora, kognitivní pohoda). Celková doba lékařské prohlídky bude 30-45 minut. Čas na vyplnění dotazníků se odhaduje na přibližně 45 minut, ale lze to provést z domova. Účastníci také obdrží sadu s tričkem (s všitými vatovými tampony) a mýdlem bez vůně. Účastníci budou vyzváni, aby si triko oblékli ráno (po umytí podpaží) každý zkušební den a po příjezdu si ho svlékli. To umožní odběr vzorků tělesného pachu před ošetřením (základní hodnoty).

Účastníci budou poté podrobeni dvěma studiím prováděným v náhodném pořadí, s alespoň šestitýdenním vymýváním: endotoxin versus placebo.

Účastníci budou požádáni, aby se 48 hodin před zkušebním dnem zdrželi namáhavého cvičení a pití alkoholu, 24 hodin před zkušebním dnem se vyvarovali silného koření a ráno v den zkoušky si dali lehkou snídani. Účastníci přijedou ráno (v 7:30). Obléknou si ranní tričko (viz výše) a převléknou se do nového trička (se všitými bavlněnými vycpávkami v podpaží), které budou nosit po celý den. Trička budou použita pro hodnocení chování a analýzu sloučenin tělesného pachu. Krátce po jejich příjezdu budou umístěny dva intravenózní katétry: jeden pro odběr krve na jednu paži a jeden na jednu ruku pro injekci endotoxinu nebo chloridu sodného, ​​které budou po injekci odstraněny. Na paži jim bude poskytnut anestetický krém, aby se minimalizovala bolest při napíchnutí žíly. Subjekty si poté odpočinou alespoň 30 minut.

Injekce endotoxinu nebo chloridu sodného se provede, až bude zbytek dokončen (kolem 8:30). Vzorky krve (10 ml ve zkumavkách s EDTA (kyselina ethylendiamintetraoctová) a 10 ml ve zkumavkách s citrátem sodným) budou odebrány těsně před injekcí endotoxinu nebo chloridu sodného a 1, 1,5, 2, 3, 4, 5, 6 a 7,5 hodin po injekce. Kromě toho bude odebráno 2,5 ml ve zkumavkách PAXGene™ před a 2, 4 a 7,5 hodiny po injekci. Před injekcí a 3 a 7,5 hodiny po injekci budou odebrány dva další vzorky do zkumavek s EDTA (8 ml krve). Celkové množství odebrané krve bude asi 200 ml, což odpovídá třetině množství poskytnutého při darování krve. Vzorky krve budou použity k měření koncentrací prozánětlivých a protizánětlivých cytokinů a dalších zánětlivých markerů (např. C-Reaktivní protein - CRP) pomocí enzymatického imunosorbentního testu (ELISA), subpopulací imunitních buněk a koncentrací mikročástic pomocí průtokové cytometrie. , genetické markery využívající Cap analýzu genové exprese (CAGE) analýzy a počet a diferenciál bílých krvinek.

Vzorky moči budou odebrány před injekcí endotoxinu nebo chloridu sodného (tj. před umístěním katétrů) a co nejpozději po injekci (klasicky kolem čtyř hodin po injekci).

Účastníci budou sledováni kontinuálním elektrokardiogramem. Každých 30 minut bude monitorována saturace kyslíkem (SO2), krevní tlak a tělesná teplota. Oxid dusičitý (NO2) bude monitorován nepřetržitě, methemoglobin bude kontrolován současně s každým odběrem krve.

Sebehodnotící dotazníky hodnotící behaviorální a psychologické proměnné účastníci vyplní těsně před injekcí endotoxinu nebo chloridu sodného (během doby odpočinku), tři hodiny a 7,5 hodiny po injekci. Krátký dotazník hodnotící chorobné chování (SicknessQ) budou účastníci opakovaně vyplňovat v době těsně před do 7,5 hodiny po injekci endotoxinu nebo chloridu sodného. Subjekty budou natáčeny v posteli a budou nosit sociometrický odznak, aby bylo možné analyzovat reakci účastníků na standardizovanou situaci sociální interakce.

Fotografie budou pořízeny před (tj. před umístěním katétrů), dvě hodiny po a 7,5 hodiny po injekci pro další hodnocení tváří (např. zdraví, přitažlivost, únava). Paralelně bude měřena barva pleti ve stejnou dobu jako vzorky krve (kromě T1,5), aby bylo možné posoudit potenciální zprostředkující účinek zdravotního hodnocení tváří. Analýza chůze a pohybu subjektů bude provedena dvě a půl hodiny po injekci. Po těchto testech, těsně před třemi hodinami po injekci, budou provedeny krátké počítačové kognitivní testy. Subjekty provedou motivační úkol po vyplnění dotazníků tři hodiny po injekci. Kromě toho budou tři hodiny a půl po injekci provedeny dva testy hodnotící chování v reakci na pozitivní/negativní a zdravé/nemocné podněty (test chování přiblížení a vyhýbání se a test regulace emocí).

Účastníci si budou moci dát lehké jídlo (svačinku a džus) kolem oběda (12:30) a své tričko odevzdají těsně před pěti a půl hodinami po injekci.

Poslední vzorky krve budou odebrány 7,5 hodiny po injekci a účastníci budou propuštěni.

Monitorování experimentu bude provádět lékař pod dohledem specialisty na anestezii a intenzivní péči.