Identifikasjon og karakterisering av prediktive faktorer for begynnende benmetastaser hos kreftpasienter (PreMetOn)

MATERIALER OG METODER: 1) Fjerning av fullblod fra perifer vene og separering av plasma fra innrullerte metastaserende kreftpasienter; 2) Isolering av tumoreksosomer som sirkulerer fra plasmaet til kreftpasienter (Kit Invitrogen: Total Exosome Isolation Reagent); 3) Neste generasjons sekvenseringsmetoder (NGS) vil bli brukt for å evaluere ekspresjonsprofilene til miRNA-er isolert fra sirkulerende tumoreksosomer (MiSeq Illumina System); 4) Massespektrometrimetoder vil bli brukt for proteomanalyse av sirkulerende eksosomer isolert fra plasma fra kreftpasienter (Triple TOFF 5600 Plus System OG HPLC-analyse av bioaktive og biomarkørpeptider); 5) 3D-kulturer for studiet av krysstale mellom sirkulerende tumoreksosomer (isolert fra pasientens plasma) og benvevsceller (ved bruk av kommersielle cellelinjer) som en del av den metastatiske prosessen (Cellec perfusjonsbioreaktor BioteK AG).

Påmeldingsprosedyrer: Pasienter som anses som kvalifiserte vil bli registrert i studien etter å ha gitt et skriftlig informert samtykke.

Datainnsamling: Kliniske data vil bli hentet av pasientens kildedokument. En protokollspesifikk CRF som rapporterer resultatene av analysene vil bli gitt. En CRF er nødvendig og bør fylles ut for hvert inkluderte emne.

Etikk: Den kliniske utprøvingsprotokollen og dens dokumenter vil bli sendt før initiering av studien til de kompetente myndighetene og etiske komiteene i hvert deltakerland for godkjenning. Den ansvarlige etterforskeren vil sikre at denne studien utføres i samsvar med enten den mest oppdaterte Helsinki-erklæringen og alle internasjonale og lokale lover som gjelder for kliniske studier og pasientbeskyttelse. Protokollen er skrevet, og studien vil bli utført i henhold til prinsippene til ICH Harmonized Tripartite Guideline for Good Clinical Practice (ref: http://www.emea.eu.int/pdfs/human/ich/013595en.pdf ).

Informert samtykke: Alle pasienter vil bli informert, av etterforskeren, om målene for studien, de mulige risikoene og fordelene som vil følge av studiedeltakelsen. Utforskeren må tydelig informere om at pasienten står fritt til å nekte deltakelse i studien, og at han når som helst og uansett årsak kan trekke tilbake samtykket. De vil bli informert om den strenge konfidensialiteten til pasientdataene deres, men at deres medisinske journaler kan bli gjennomgått for prøveformål av autoriserte personer andre enn deres behandlende lege. Prosedyren for informert samtykke må være i samsvar med ICHs retningslinjer for god klinisk praksis. Dette innebærer at "det skriftlige informerte samtykkeskjemaet skal være signert og personlig datert av pasienten eller av pasientens juridisk akseptable representant".

Etterforskeren må også signere skjemaet for informert samtykke, og vil oppbevare originalen på stedet og en kopi av originalen må overleveres til pasienten.

Den kompetente etiske komiteen for hver institusjon som deltar i studien må validere lokale informerte samtykkedokumenter før studien kan åpnes. Det vil understrekes at deltakelsen er frivillig og at pasienten har lov til å nekte videre deltakelse i studien når han/hun ønsker det. Dette vil ikke påvirke pasientens videre behandling.

Generelle prinsipper for innsamling av humant biologisk materiale (HBM): Innsamling av humant biologisk materiale (HBM) innebærer innsamling og lagring av biologisk materiale, biologisk restmateriale eller derivater i samsvar med etiske og tekniske krav. Biologisk materiale (blodprøver) vil bli sentralisert og lagret ved Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli-Sicilia, Bagheria (Palermo). Herfra vil det biologiske materialet bli brukt og lagret i henhold til prøvekarakteristikken og gjeldende forskrift.

Plasma og sirkulerende eksosomer hentet fra blod vil bli lagret i sterile beholdere (falk, rør, eppendorf) i en fryser ved en temperatur på -80 °C ved Istituto Ortopedico Rizzoli -Dipartimento Rizzoli Sicilia.

Følgende prinsipper gjelder for lagring av HBM: (a) Istituto Ortopedico Rizzoli vil ha en utpekt person som er ansvarlig for innsamling og vil fungere som et kommunikasjonspunkt; (b) Den innsamlede HBM bør dokumenteres, dvs. gjenværende mengde og plasseringen. fungere som et kommunikasjonspunkt; og (c) Lagring og bruk av biologisk materiale vil skje i samsvar med standardene for god laboratoriepraksis (GLP) og gjeldende lovgivning.

Konfidensialitet: For å sikre konfidensialitet av data fra kliniske forsøk som deponeres i den nasjonale og europeiske gjeldende reguleringen, vil data kun være tilgjengelig for sponsoren og dens utpekte, for overvåkings-/revisjonsprosedyrer, etterforskeren og samarbeidspartnere, Etikkkomiteen for hver tilsvarende stedet og Helsetilsynet. Etterforsker og institusjonen vil gi tilgang til data og kildedokumentasjon for overvåking, revisjon, revisjon av etisk komité og inspeksjoner av helsemyndighetene, men opprettholder til enhver tid konfidensialitet av personopplysninger som spesifisert i gjeldende regelverk.

Etterforskeren skal garantere at pasientens anonymitet til enhver tid holdes og deres identitet skal beskyttes mot uvedkommende og institusjoner.

Alle pasienter som inngår i studien vil bli identifisert med en numerisk kode, slik at ingen identifiserbare personopplysninger vil bli samlet inn. Etterforskeren må ha og oppbevare et pasientinkluderingsregister der det registrerer pasientens personopplysninger: navn, etternavn, adresse og tilsvarende identifikasjonskode inn i studien. Dette registeret vil bli oppbevart i etterforskerfilen.

Publikasjonspolitikk og dataeierskap: Hovedetterforskeren av studien er ansvarlig for den endelige rapporten, publiserer alle innsamlede data som beskrevet i protokollen og vil sørge for at dataene rapporteres ansvarlig og konsekvent. Spesielt vil publisering av data som stammer fra denne studien skje uavhengig av de oppnådde resultatene. Overføring eller spredning av data, gjennom vitenskapelige publikasjoner og/eller presentasjon på konferanser, kongresser og seminarer, vil skje utelukkende etter rent statistisk behandling av det samme, eller i en absolutt anonym form. Alle studiedata eies av sponsoren.