Identifiering och karakterisering av prediktiva faktorer för uppkomsten av benmetastaser hos cancerpatienter (PreMetOn)

MATERIAL OCH METODER: 1) Avlägsnande av helblod från perifer ven och separation av plasma från inskrivna patienter med metastaserande cancer; 2) Isolering av tumörexosomer som cirkulerar från plasma från cancerpatienter (Kit Invitrogen: Total Exosome Isolation Reagent); 3) Nästa generations sekvenseringsmetoder (NGS) kommer att användas för att utvärdera uttrycksprofilerna för miRNA isolerade från cirkulerande tumörexosomer (MiSeq Illumina System); 4) Masspektrometrimetoder kommer att användas för proteomanalys av cirkulerande exosomer isolerade från plasma från cancerpatienter (Triple TOFF 5600 Plus System OCH HPLC-analys av bioaktiva och biomarkörpeptider); 5) 3D-kulturer för studiet av överhörning mellan cirkulerande tumörexosomer (isolerade från patientens plasma) och benvävnadsceller (med kommersiella cellinjer) som en del av den metastatiska processen (Cellec perfusionsbioreaktor BioteK AG).

Registreringsprocedurer: Patienter som anses kvalificerade kommer att registreras i studien efter att ha lämnat ett skriftligt informerat samtycke.

Datainsamling: Klinisk data kommer att hämtas av patientens källdokument. En protokollspecifik CRF som rapporterar resultaten av analyserna kommer att tillhandahållas. En CRF krävs och bör fyllas i för varje inkluderat ämne.

Etik: Det kliniska prövningsprotokollet och dess dokument kommer att skickas innan studien påbörjas till de behöriga myndigheterna och etiska kommittéerna i varje deltagande land för godkännande. Den ansvariga utredaren kommer att säkerställa att denna studie genomförs i enlighet med antingen den mest uppdaterade Helsingforsdeklarationen och alla internationella och lokala lagar som gäller för kliniska prövningar och patientskydd. Protokollet har skrivits och studien kommer att genomföras enligt principerna i ICH Harmonized Tripartite Guideline for Good Clinical Practice (ref: http://www.emea.eu.int/pdfs/human/ich/013595en.pdf ).

Informerat samtycke: Alla patienter kommer att informeras av utredaren om syftet med studien, de möjliga riskerna och fördelarna som kommer att bli följden av studiedeltagandet. Utredaren ska tydligt informera om att patienten har rätt att vägra att delta i studien och att han kan återkalla samtycke när som helst och av vilken anledning som helst. De kommer att informeras om den strikta sekretessen för deras patientdata, men att deras medicinska journaler kan granskas för försöksändamål av auktoriserade personer andra än deras behandlande läkare. Proceduren för informerat samtycke måste överensstämma med ICH:s riktlinjer för god klinisk praxis. Detta innebär att "det skriftliga informerade samtyckesformuläret ska vara undertecknat och personligen daterat av patienten eller av patientens juridiskt godtagbara ombud".

Utredaren måste också underteckna formuläret för informerat samtycke och kommer att behålla originalet på platsen och en kopia av originalet måste lämnas till patienten.

Den behöriga etiska kommittén för varje institution som deltar i studien måste validera lokala informerade samtyckesdokument innan studien kan öppnas. Det kommer att betonas att deltagandet är frivilligt och att patienten får vägra vidare deltagande i studien när han/hon vill. Detta kommer inte att påverka patientens efterföljande vård.

Allmänna principer för insamling av humant biologiskt material (HBM): Insamling av humant biologiskt material (HBM) innefattar insamling och lagring av biologiskt material, resterande biologiskt material eller derivat i enlighet med etiska och tekniska krav. Biologiskt material (blodprover) kommer att centraliseras och lagras vid Istituto Ortopedico Rizzoli - Dipartimento Rizzoli-Sicilia, Bagheria (Palermo). Härifrån kommer det biologiska materialet att användas och lagras i enlighet med provets egenskaper och tillämpliga regler.

Plasma och cirkulerande exosomer erhållna från blod kommer att förvaras i sterila behållare (falk, rör, eppendorf) i en frys vid en temperatur på -80 °C vid Istituto Ortopedico Rizzoli -Dipartimento Rizzoli Sicilia.

Följande principer gäller för lagring av HBM: (a) Istituto Ortopedico Rizzoli kommer att ha en utsedd person som ansvarar för insamlingen och kommer att fungera som en kommunikationspunkt; (b) Den insamlade HBM bör dokumenteras, det vill säga mängden som återstår och dess plats. fungera som en kommunikationspunkt; och (c) Lagring och användning av biologiskt material kommer att ske i enlighet med standarderna för god laboratoriesed (GLP) och tillämplig lagstiftning.

Konfidentialitet: För att säkerställa konfidentialitet för data från kliniska prövningar enligt den nationella och europeiska tillämpliga förordningen, kommer data endast att vara tillgänglig för prövningssponsoren och dess utsedda, för övervaknings-/revisionsprocedurer, utredaren och samarbetspartners, etikkommittén för varje motsvarande plats och Hälsomyndigheten. Utredaren och institutionen kommer att tillåta tillgång till data och källdokumentation för övervakning, revision, revision av etiska kommittén och inspektioner av hälsomyndigheten, men att alltid upprätthålla konfidentiella personuppgifter enligt gällande förordning.

Utredaren ska garantera att patientens anonymitet alltid hålls och att deras identitet måste skyddas från obehöriga personer och institutioner.

Alla patienter som ingår i studien kommer att identifieras med en numerisk kod, så att inga identifierbara personuppgifter kommer att samlas in. Utredaren måste ha och bevara ett patientinkluderingsregister där det registrerar patientens personuppgifter: namn, efternamn, adress och motsvarande identifieringskod i studien, detta register kommer att förvaras i utredarfilen.

Publiceringspolicy och dataägande: Studiens huvudutredare är ansvarig för slutrapporten, publicering av all data som samlas in enligt beskrivningen i protokollet och kommer att säkerställa att data rapporteras ansvarsfullt och konsekvent. I synnerhet kommer publiceringen av data som härrör från denna studie att ske oberoende av de resultat som erhålls. Överföring eller spridning av data, genom vetenskapliga publikationer och/eller presentation vid konferenser, kongresser och seminarier, kommer att ske uteslutande efter en rent statistisk bearbetning av densamma, eller i absolut anonym form. Alla studiedata ägs av sponsorn.