Terapia gênica usando células anti-CEA para tratar câncer metastático

Fundo:

• Construímos um único vetor retroviral que contém as cadeias alfa e beta de um receptor de células T (TCR) que reconhece o antígeno carcinoembrionário (CEA), que pode ser usado para mediar a transferência genética deste TCR com alta eficiência (maior que 30 %) sem a necessidade de realizar qualquer seleção.
• Em co-culturas com tumores positivos para HLA-A2 e CEA, células T transduzidas por TCR anti-CEA secretaram quantidades significativas de interferon-gama (IFN-gama) com alta especificidade.

Objetivos.

Objetivos primários:

• Avaliar a segurança da administração de linfócitos do sangue periférico engenheirados anti-CEA TCR em pacientes recebendo regime de condicionamento não mieloablativo e aldesleucina.
• Determinar se a administração de linfócitos de sangue periférico engenheirados TCR anti-CEA e aldesleucina a pacientes após um regime preparativo não mieloablativo, mas de depleção linfoide, resultará em regressão clínica do tumor em pacientes com câncer metastático que expressa CEA.
• Determinar a sobrevivência in vivo de células manipuladas por genes TCR.

Objetivo secundário:

- Determinar a sobrevivência in vivo de células manipuladas por genes TCR.

Elegibilidade:

Pacientes com HLA-A*0201 positivo e com 18 anos de idade ou mais devem ter

• câncer metastático cujos tumores expressam o antígeno CEA onde o componente limitante da vida da doença são as metástases hepáticas;
• receberam anteriormente e não responderam ou recorreram ao tratamento padrão para doença metastática;

Os pacientes não devem ter:

- contra-indicações para a administração de altas doses de aldesleucina.

Projeto:

• Células mononucleares de sangue periférico (PBMC) obtidas por leucaférese (aproximadamente 5 vezes 10(9) células) serão cultivadas na presença de anti-CD3 (OKT3) e aldesleucina para estimular o crescimento de células T.
• A transdução é iniciada pela exposição de aproximadamente 10(8) a 5 vezes 10(8) células ao sobrenadante do vetor retroviral contendo os genes TCR anti-CEA.
• Os pacientes receberão um regime preparativo não mieloablativo, mas com depleção de linfócitos, que consiste em ciclofosfamida e fludarabina, seguido de infusão intravenosa (IV) de PBMC transduzido por gene TCR reativo ao tumor ex vivo mais aldesleucina IV (720.000 UI/kg q8h para um máximo de 15 doses). Os pacientes receberão células transduzidas de TCR anti-CEA aprimoradas com CD8.
• Os pacientes passarão por avaliação completa do tumor com exame físico, tomografia computadorizada (TC) de tórax, abdome e pelve e avaliação clínica laboratorial quatro a seis semanas após o tratamento. Se o paciente tiver doença estável (SD) ou encolhimento do tumor, avaliações completas repetidas serão realizadas a cada 1-3 meses. Após o primeiro ano, os pacientes que continuarem a responder continuarão a ser acompanhados com esta avaliação a cada 3-4 meses até que os critérios fora do estudo sejam atendidos.
• O estudo será conduzido usando um projeto ideal de Fase I/II. O protocolo prosseguirá em um projeto de escalonamento de dose de fase 1, com seis coortes. Se um único paciente apresentar uma toxicidade limitante de dose (DLT) em um determinado nível de dose, mais três pacientes serão tratados com essa dose 3 para confirmar que não mais que 1/6 pacientes têm DLT antes de prosseguir para o próximo nível mais alto. Se for identificado um nível com 2 ou mais DLTs em 3-6 pacientes, três pacientes adicionais serão acumulados na próxima dose mais baixa, para um total de 6, a fim de caracterizar ainda mais a segurança da dose máxima tolerada (MTD ) antes de iniciar a parte da fase II. Se ocorrer um DLT na primeira coorte, essa coorte será expandida para 6 pacientes. Se 2 DLTs forem encontrados nesta coorte, os pacientes serão incluídos na coorte de desescalonamento.
• Uma vez que o MTD foi determinado, o estudo prosseguiria para a parte da fase II. Os pacientes serão inseridos em duas coortes com base na histologia: a coorte 1 incluirá pacientes com câncer colorretal metastático e a coorte 2 incluirá pacientes com outros tipos de câncer metastático que expressam CEA.
• Para cada um dos 2 estratos avaliados, o estudo será conduzido usando um desenho otimizado de fase II, onde inicialmente 21 pacientes avaliáveis ​​serão inscritos. Para cada um desses dois braços do estudo, se 0 ou 1 dos 21 pacientes apresentarem uma resposta clínica, nenhum outro paciente será inscrito, mas se 2 ou mais dos primeiros 21 pacientes avaliáveis ​​inscritos tiverem uma resposta clínica, então o acréscimo será continuar até que um total de 41 pacientes avaliáveis ​​tenham sido inscritos nesse estrato.
• O objetivo será determinar se a combinação de alta dose de aldesleucina, quimioterapia depletora de linfócitos e linfócitos manipulados com genes anti-CEA TCR pode ser associada a uma taxa de resposta clínica que pode descartar 5% (p0=0,05) a favor de uma modesta taxa de resposta parcial (PR) + resposta completa (CR) de 20% (p1=0,20).