Genová terapie pomocí anti-CEA buněk k léčbě metastatické rakoviny

Pozadí:

• Zkonstruovali jsme jediný retrovirový vektor, který obsahuje jak alfa, tak beta řetězec receptoru T lymfocytů (TCR), který rozpoznává karcinoembryonální antigen (CEA), který lze použít ke zprostředkování genetického přenosu tohoto TCR s vysokou účinností (vyšší než 30 %) bez nutnosti provádět jakýkoli výběr.
• Ve společných kulturách s HLA-A2 a CEA pozitivními nádory vylučovaly T buňky transdukované anti-CEA TCR významné množství interferonu-gama (IFN-gama) s vysokou specificitou.

Cíle:

Primární cíle:

• Vyhodnotit bezpečnost podávání anti-CEA TCR upravených lymfocytů periferní krve u pacientů léčených nemyeloablativním přípravným režimem a aldesleukinem.
• Stanovit, zda podávání anti-CEA TCR upravených lymfocytů periferní krve a aldesleukinu pacientům po nemyeloablativním, ale lymfoidním deplečním přípravném režimu povede ke klinické regresi nádoru u pacientů s metastatickým karcinomem, který exprimuje CEA.
• Stanovit in vivo přežití buněk vytvořených genem TCR.

Sekundární cíl:

- Stanovit in vivo přežití buněk vytvořených genem TCR.

Způsobilost:

Pacienti, kteří jsou HLA-A*0201 pozitivní a jsou starší 18 let, musí mít

• metastatický karcinom, jehož nádory exprimují CEA antigen, kde život limitující složkou onemocnění jsou jaterní metastázy;
• dříve dostávali a nereagovali na standardní péči o metastatické onemocnění nebo se k ní vraceli;

Pacienti by neměli mít:

- kontraindikace podávání vysokých dávek aldesleukinu.

Design:

• Mononukleární buňky periferní krve (PBMC) získané leukaferézou (přibližně 5krát 10(9) buněk) budou kultivovány v přítomnosti anti-CD3 (OKT3) a aldesleukinu za účelem stimulace růstu T-buněk.
• Transdukce je zahájena expozicí přibližně 10(8) až 5krát 10(8) buněk supernatantu retrovirového vektoru obsahujícímu geny anti-CEA TCR.
• Pacienti dostanou nemyeloablativní, ale lymfocyty depleční preparativní režim sestávající z cyklofosfamidu a fludarabinu, po kterém následuje intravenózní (IV) infuze ex vivo nádorově reaktivních, TCR genem transdukovaných PBMC plus IV aldesleukin (720 000 IU/kg každých 8 hodin po maximálně 15 dávek). Pacienti dostanou CD8-enhanced anti-CEA TCR transdukované buňky.
• Pacienti podstoupí kompletní vyšetření nádoru s fyzikálním vyšetřením, počítačovou tomografií (CT) hrudníku, břicha a pánve a klinickým laboratorním vyšetřením čtyři až šest týdnů po léčbě. Pokud má pacient stabilní onemocnění (SD) nebo zmenšení nádoru, bude se každé 1-3 měsíce provádět opakované kompletní hodnocení. Po prvním roce budou pacienti s pokračující odpovědí nadále sledováni tímto hodnocením každé 3-4 měsíce, dokud nebudou splněna kritéria mimo studii.
• Studie bude provedena s použitím optimálního návrhu fáze I/II. Protokol bude pokračovat v návrhu fáze 1 eskalace dávky se šesti kohortami. Pokud by se u jednoho pacienta projevila toxicita omezující dávku (DLT) při určité úrovni dávky, byli by touto 3 dávkou léčeni další tři pacienti, aby se potvrdilo, že ne více než 1/6 pacientů má DLT před pokračováním na další vyšší úroveň. Pokud byla identifikována hladina se 2 nebo více DLT u 3–6 pacientů, přibudou další tři pacienti s další nejnižší dávkou, celkem 6, aby se dále charakterizovala bezpečnost maximální tolerované dávky (MTD ) před zahájením části fáze II. Pokud se DLT objeví v první kohortě, bude tato kohorta rozšířena na 6 pacientů. Pokud se v této kohortě vyskytnou 2 DLT, pacienti budou zařazeni do kohorty pro deeskalaci.
• Jakmile byla stanovena MTD, studie by pokračovala do fáze II. Pacienti budou zařazeni do dvou kohort na základě histologie: kohorta 1 bude zahrnovat pacienty s metastatickým kolorektálním karcinomem a kohorta 2 bude zahrnovat pacienty s jinými typy metastatického karcinomu, které exprimují CEA.
• Pro každou ze 2 hodnocených vrstev bude studie provedena s použitím optimálního návrhu fáze II, do kterého bude zpočátku zařazeno 21 hodnotitelných pacientů. Pro každou z těchto dvou větví studie platí, že pokud 0 nebo 1 z 21 pacientů zaznamená klinickou odpověď, pak nebudou zařazeni žádní další pacienti, ale pokud 2 nebo více z prvních 21 zařazených hodnotitelných pacientů bude mít klinickou odpověď, bude narůstat pokračovat, dokud nebude do této vrstvy zařazeno celkem 41 hodnotitelných pacientů.
• Cílem bude určit, zda je kombinace vysoké dávky aldesleukinu, chemoterapie depleující lymfocyty a lymfocytů upravených genem anti-CEA TCR schopna být spojena s mírou klinické odpovědi, která může vyloučit 5 % (p0=0,05) ve prospěch mírné 20% částečné odezvy (PR) + úplné odezvy (CR) (p1=0,20).