Anticorpo de lhama, diarreia por rotavírus, crianças

Resumo breve Estudo que investiga a eficácia da administração oral de fragmento de anticorpo VHH derivado de anticorpos encontrados no leite de lhamas e camelos por meio de um protótipo de produto alimentar na redução da gravidade da diarreia por rotavírus em crianças.

Descrição detalhada

Introdução O rotavírus é o principal enteropatógeno viral, sendo responsável por 11-71% de todos os episódios de diarreia em lactentes e crianças em todo o mundo. Nos países em desenvolvimento, o rotavírus está associado a mais de 125 milhões de episódios de diarreia a cada ano (Cook et al. 1990), levando a cerca de 600.000 mortes. É responsável por 60% de todos os episódios de diarreia, 20-60% das hospitalizações por diarreia e 20% das mortes relacionadas à diarreia em crianças <5 anos de idade (Perez-Schael et al. 1997). Somente nos Estados Unidos da América, o rotavírus está associado a 3% de todas as hospitalizações de crianças menores de 5 anos, com custos médicos e indiretos de mais de US$ 1 bilhão a cada ano (Glass et al. 1991). Em muitas localidades, as mortes por infecções por rotavírus persistem, apesar dos programas nacionais para incentivar o uso da terapia de reidratação oral.

Manejo atual da gastroenterite por rotavírus O manejo atual da diarreia por rotavírus inclui a prevenção da desidratação ou o manejo da desidratação usando reidratação oral ou intravenosa, conforme apropriado, e alimentação contínua. A retomada precoce da alimentação normal é incentivada para melhorar o reparo da mucosa e minimizar as consequências nutricionais da infecção. As crianças de países em desenvolvimento podem se beneficiar da suplementação de zinco, mas seu modo de administração e custo-efetividade ainda precisam ser decididos na diarreia por rotavírus. Nenhum tratamento específico está atualmente disponível para reduzir a duração ou a gravidade desta doença. Portanto, a diarreia induzida por rotavírus, que é considerada uma doença autolimitada, é responsável por mortes infantis significativas nos países em desenvolvimento (Glass et al. 1996).

Imunização ativa contra a infecção por rotavírus O desenvolvimento, teste e eventual uso de uma vacina eficaz, segura e barata contra o rotavírus seria o método mais eficiente para prevenir doenças graves e mortes em países em desenvolvimento. Foi feito um rápido progresso e várias vacinas candidatas contra o rotavírus foram desenvolvidas e testadas. Duas vacinas contra rotavírus, Rotarix (GlaxoSmithKline Biologicals, Bélgica) e RotaTeq (Merck & Co., EUA) entraram recentemente no mercado no mundo desenvolvido. Ambas as vacinas parecem ser seguras em relação à intussuscepção e são altamente eficazes na prevenção de gastroenterite grave devido a cepas de rotavírus que carregam predominantemente o sorotipo G1 (Cunliffe & Nakagomi 2005). Ainda é necessária a confirmação da segurança e eficácia de ambas as vacinas nos países em desenvolvimento. Além disso, a avaliação da capacidade de cada vacina em fornecer proteção contra uma população cada vez mais diversificada de cepas de rotavírus dependerá da vigilância contínua da cepa e do desenvolvimento de novas vacinas, pois os sorotipos mais novos predominam em diferentes localizações geográficas, o que pode não ser fácil para os países em desenvolvimento. . Portanto, há uma clara necessidade de definir intervenções melhoradas e econômicas no manejo da diarreia por rotavírus até que uma vacina eficaz, segura e barata, acessível aos países em desenvolvimento, esteja disponível.

Imunização passiva para diarreia induzida por rotavírus; Existem boas razões para supor que a imunização passiva pode ser útil no tratamento da diarreia humana por rotavírus. Por exemplo, verificou-se que a administração oral de anticorpos neutralizantes de rotavírus modula a diarreia induzida por rotavírus em crianças. Profiláticos benéficos (Barnes et al. 1982) e efeitos terapêuticos (Guarino et al. 1991), em termos de redução da duração e gravidade da diarreia por rotavírus, também foram observados em associação com preparações de IgG humana administradas por via oral. O uso de preparação de anticorpo humano, no entanto, é limitado devido ao risco de contaminação viral e altos custos de produção e cadeia de suprimentos de tal(is) produto(s) e biodisponibilidade muito baixa.

Uma fonte alternativa de anticorpos, segura e fácil de produzir, foi posteriormente desenvolvida em colostros bovinos hiperimunizados por meio da vacinação de vacas prenhes contra cepas humanas de rotavírus. Essa abordagem também foi usada com eficácia para benefícios profiláticos (Davidsson et al. 1989) e terapêuticos (Mitra et al. 1995, Sarker et al. 1998) na diarreia por rotavírus em crianças hospitalizadas. Em um estudo recentemente concluído em crianças com diarreia por rotavírus em Bangladesh, observamos um benefício modesto da administração oral de imunoglobulina extraída de ovos de galinha imunizados com cepas humanas de rotavírus (Sarker et al. 2001).

A imunização passiva para prevenção ou tratamento de infecções entéricas geralmente requer quantidades relativamente grandes de anticorpo, particularmente nos locais da mucosa onde os anticorpos são rapidamente eliminados. Portanto, essas modalidades, embora comprovadamente eficazes, tornam-se caras devido à necessidade de doses maiores de anticorpos. As outras limitações dos anticorpos IgG convencionais incluem sua baixa estabilidade e natureza complexa que limita sua produção em larga escala. Uma solução promissora para esses problemas na produção de anticorpos em larga escala veio, inesperadamente, da própria natureza - camelos e lhamas possuem um tipo incomum de anticorpos IgG (IgG2 e IgG3) que são desprovidos de cadeias leves - os anticorpos de "cadeia pesada" .

Seleção de fragmentos de anticorpo de cadeia pesada Em lhamas e camelos, os anticorpos IgG de "cadeia pesada" coexistem com o IgG "convencional" (IgG1) (Hamers-Casterman et al. 1993). Em contraste com os anticorpos convencionais, os anticorpos de cadeia pesada são desprovidos de cadeias leves. Portanto, o domínio de ligação dos anticorpos de cadeia pesada consiste apenas no domínio variável da cadeia pesada (VHH) em contraste com o domínio de ligação dos anticorpos convencionais que consiste em um domínio variável da cadeia pesada (VH) e um dos cadeia leve (LV). As propriedades bioquímicas dos fragmentos de anticorpo VHH de lhama são superiores aos fragmentos Fv (VH + VL) de anticorpos IgG convencionais. Embora os fragmentos de anticorpo VHH tenham uma estrutura simples de ligação ao antígeno com apenas um domínio, ele possui alta afinidade e é extremamente termoestável (van der Linden et al., 1999). Além disso, eles são bem expressos e secretados pela levedura de panificação Saccharomyces cerevisiae, permitindo uma produção econômica em larga escala (Frenken et al., 2000). Este processo tornará os fragmentos de VHH um ingrediente acessível para produtos alimentícios e ampliará sua disponibilidade para a população em geral dos países em desenvolvimento.

VHH como um potencial ingrediente alimentar Muitas pessoas nos países africanos/árabe consomem regularmente leite de camelo. Em 1992, observou-se que o leite de camelo contém altos títulos de anticorpos contra o rotavírus (el Agamy et al 1992). O fragmento de anticorpo no lote VHH 203027 é um fragmento daqueles anticorpos que se supõe estarem presentes no leite de camelo/lhama. Assim, o produto experimental pode ser classificado como um ingrediente alimentar Desde o seu início em 1999, o objetivo do projeto "VHH" da Unilever era desenvolver um alimento acessível para os países em desenvolvimento, que "pode ​​ajudar a reduzir o risco de infecções por rotavírus". Este tipo de alegação se encaixa muito bem nas definições apresentadas pela Ação Concertada patrocinada pela União Européia sobre Ciência de Alimentos Funcionais na Europa (FUFOSE) (Diplock et al 1999). A terminologia FUFOSE para alegações de 'função aprimorada' (tipo A) e 'redução do risco de doença' (tipo B) são agora amplamente adaptadas por muitos códigos de prática nacionais e internacionais, incluindo o Codex Alimentarius. Foi especialmente desenvolvido na década de 1990 para permitir a separação entre alimentos funcionais e medicamentos. Neste contexto, gostaríamos também de referir o Regulamento CE n.º 258/97 do Parlamento Europeu e do Conselho de 27 de janeiro de 1997 relativo a novos alimentos e novos ingredientes alimentares e o regulamento da UE 1924/2006 sobre alegações nutricionais e de saúde feitas para alimentos. A eficácia dos fragmentos VHH na redução do risco de desenvolver diarreia por rotavírus quando fornecidos em forma de alimento será testada em um estudo adicional Segurança da aplicação do fragmento do anticorpo VHH A segurança da aplicação oral do fragmento do anticorpo VHH foi comprovada em dois estudos realizados no Holanda e Bangladesh, incluindo adultos e crianças com idade superior a 6 meses.

Comparação:

Compararemos com o efeito do fragmento de anticorpo VHH contra placebo em crianças com diarreia comprovada por rotavírus hospitalizadas no ICDDR,B. Esta intervenção complementará o tratamento padrão, incluindo o tratamento de reidratação oral.