Láma antitest, Rotavírus hasmenés, Gyermekek

Rövid összefoglaló Vizsgálat, amely a láma és teve tejében található antitestekből származó VHH antitest-fragmens orális beadásának hatékonyságát vizsgálja egy prototípus élelmiszerterméken keresztül a rotavírusos hasmenés súlyosságának csökkentésében gyermekeknél.

Részletes leírás

Bevezetés A rotavírus a vezető vírusos enteropatogén, amely világszerte a csecsemők és gyermekek hasmenéses epizódjainak 11-71%-áért felelős. A fejlődő országokban a rotavírus évente több mint 125 millió hasmenés epizódhoz kapcsolódik (Cook et al. 1990), ami becslések szerint 600 000 halálesethez vezet. Ez felelős az összes hasmenéses epizód 60%-áért, a hasmenéses kórházi kezelések 20-60%-áért és az 5 év alatti gyermekek hasmenéssel összefüggő halálozásának 20%-áért (Perez-Schael et al. 1997). Csak az Amerikai Egyesült Államokban a rotavírus az 5 évnél fiatalabb gyermekek kórházi kezelésének 3%-ával jár együtt, amelyek orvosi és közvetett költsége meghaladja az 1 milliárd USD-t évente (Glass et al. 1991). Sok helyen a rotavírus fertőzések miatti halálesetek továbbra is fennállnak annak ellenére, hogy az orális rehidrációs terápia alkalmazását ösztönző nemzeti programok vannak.

A rotavírusos gasztroenteritisz jelenlegi kezelése A rotavírusos hasmenés jelenlegi kezelése magában foglalja a kiszáradás megelőzését vagy a kiszáradás kezelését adott esetben orális vagy intravénás rehidratációval, valamint a folyamatos táplálást. A normál etetés korai újrakezdését ösztönzik a nyálkahártya helyreállításának fokozása és a fertőzés táplálkozási következményeinek minimalizálása érdekében. A fejlődő országok gyermekei számára előnyös lehet a cink-kiegészítés, de a bejuttatás módja és költséghatékonysága rotavírusos hasmenés esetén még nem eldöntött. Jelenleg nem áll rendelkezésre specifikus kezelés a betegség időtartamának vagy súlyosságának csökkentésére. Ezért a rotavírus által kiváltott hasmenés, amely önmagától elmúló betegségnek számít, jelentős gyermekkori halálozásokért felelős a fejlődő országokban (Glass et al. 1996).

Rotavírus fertőzés elleni aktív immunizálás Egy hatékony, biztonságos és olcsó rotavírus vakcina kifejlesztése, tesztelése és esetleges alkalmazása lenne a leghatékonyabb módszer a súlyos betegségek és halálesetek megelőzésére a fejlődő országokban. Gyors előrelépés történt, és számos rotavírus-vakcina jelöltet fejlesztettek ki és teszteltek. Két rotavírus vakcina, a Rotarix (GlaxoSmithKline Biologicals, Belgium) és a RotaTeq (Merck & Co., USA) nemrég jelent meg a fejlett világ piacán. Mindkét vakcina biztonságosnak tűnik az intussuscepció tekintetében, és rendkívül hatékony a túlnyomórészt G1 szerotípust hordozó rotavírus törzsek okozta súlyos gastroenteritis megelőzésében (Cunliffe és Nakagomi 2005). A fejlődő országokban továbbra is meg kell erősíteni mindkét vakcina biztonságosságát és hatékonyságát. Ezen túlmenően annak értékelése, hogy az egyes vakcinák képesek-e védelmet nyújtani a rotavírus törzsek egyre változatosabb populációja ellen, a törzs folyamatos felügyeletétől és az újabb vakcinák kifejlesztésétől függ, mivel az újabb szerotípusok vannak túlsúlyban a különböző földrajzi helyeken, ami nem biztos, hogy könnyű a fejlődő országok számára. . Egyértelmű tehát az igény a rotavírus-hasmenés kezelésében a jobb, költséghatékony beavatkozások meghatározására mindaddig, amíg egy hatékony, biztonságos és olcsó, a fejlődő országok számára megfizethető vakcina elérhetővé válik.

Passzív immunizálás rotavírus okozta hasmenés ellen; Jó okunk van feltételezni, hogy a passzív immunizálás hasznos lehet a humán rotavírusos hasmenés kezelésében. Például azt találták, hogy a rotavírus-semlegesítő antitestek orális adagolása modulálja a rotavírus által kiváltott hasmenést gyermekeknél. A rotavírus-hasmenés időtartamának és súlyosságának csökkentése tekintetében jótékony profilaktikus (Barnes és mtsai 1982) és terápiás hatásokat (Guarino et al. 1991) is megfigyeltek orálisan alkalmazott humán IgG-készítményekkel kapcsolatban. A humán antitest-készítmények használata azonban korlátozott a vírusfertőzés kockázata, valamint az ilyen termék(ek) magas előállítási és ellátási lánc költségei, valamint nagyon alacsony biológiai hozzáférhetősége miatt.

Alternatív, biztonságos és könnyen előállítható antitestforrást később hiperimmunizált szarvasmarha-kolosztrumokban fejlesztettek ki, vemhes teheneket vakcinázva a rotavírus humán törzsei ellen. Ezt a megközelítést hatékonyan alkalmazták profilaktikus (Davidsson és mtsai, 1989) és terápiás előnyök (Mitra és mtsai, 1995, Sarker és mtsai, 1998) céljára is kórházba került gyermekek rotavírusos hasmenése esetén. Egy bangladesi rotavírus-hasmenésben szenvedő gyermekek körében nemrégiben lezárult tanulmányban szerény előnyt tapasztaltunk a humán rotavírustörzsekkel immunizált csirke tojásából extrahált immunglobulin orális adagolásából (Sarker et al. 2001).

Az enterális fertőzések megelőzésére vagy kezelésére szolgáló passzív immunizálás általában viszonylag nagy mennyiségű antitestet igényel, különösen azokon a nyálkahártya helyeken, ahol az antitestek gyorsan kiürülnek. Ezért ezek a modalitások, bár hatékonynak bizonyultak, drágává válnak, mivel nagyobb dózisú antitestekre van szükség. A hagyományos IgG antitestek további korlátai közé tartozik gyenge stabilitásuk és összetett természetük, ami korlátozza nagy léptékű termelésüket. Ezekre a problémákra ígéretes megoldást jelentett a nagy léptékű antitest-termelés, meglehetősen váratlanul, maga a természet – a tevék és a lámák egy szokatlan típusú IgG antitesttel (IgG2 és IgG3) rendelkeznek, amelyek mentesek a könnyű láncoktól – a „nehézláncú” antitestek. .

Nehézlánc antitest-fragmensek kiválasztása Lámában és tevében a "nehézlánc" IgG antitestek együtt léteznek a "hagyományos" IgG-vel (IgG1) (Hamers-Casterman et al. 1993). A hagyományos antitestekkel ellentétben a nehéz lánc antitestek mentesek a könnyű láncoktól. Ezért a nehéz lánc antitestek kötődoménje csak a nehéz lánc variábilis doménjéből (VHH) áll, ellentétben a hagyományos antitestek kötődoménjével, amely a nehéz lánc variábilis doménjéből (VH) és az egyik könnyű lánc (VL). A láma VHH antitest fragmentumainak biokémiai tulajdonságai jobbak, mint a hagyományos IgG antitestek Fv fragmentumai (VH + VL). Bár a VHH antitest-fragmensek egyszerű antigénkötő szerkezettel rendelkeznek, csak egy doménnel, nagy affinitással rendelkeznek, és rendkívül hőstabilak (van der Linden et al., 1999). Ezenkívül a Saccharomyces cerevisiae pékélesztő jól expresszálja és választja ki őket, ami lehetővé teszi a nagy léptékű, költséghatékony termelést (Frenken et al., 2000). Ez az eljárás megfizethető élelmiszeripari alapanyaggá teszi a VHH-töredékeket, és szélesíti elérhetőségüket a fejlődő országok lakossága számára.

A VHH, mint potenciális élelmiszer-összetevő Az afrikai/arab országokban sokan fogyasztanak rendszeresen teve tejet. 1992-ben megfigyelték, hogy a tevetej magas titerben tartalmaz rotavírus elleni antitesteket (el Agamy et al 1992). A VHH 203027. sz. tételben található antitest-fragmentum azon antitestek fragmense, amelyekről feltételezik, hogy jelen vannak a teve/láma tejben. Így a vizsgálati készítmény élelmiszer-összetevők közé sorolható Az Unilever „VHH” projektjének 1999-es indulásától fogva az volt a célja, hogy a fejlődő országok számára megfizethető élelmiszert fejlesszen ki, amely „segítheti a rotavírus fertőzések kockázatának csökkentését”. Ez a fajta állítás nagyon jól illeszkedik az Európai Unió által támogatott, a Funkcionális Élelmiszer-tudomány Európában (FUFOSE) által előterjesztett definíciókba (Diplock et al 1999). A „fokozott funkció” (A típus) és a „betegség kockázatának csökkentése” (B típusú) állításokra vonatkozó FUFOSE terminológiát számos nemzeti és nemzetközi gyakorlati kódex, köztük a Codex Alimentarius is széles körben alkalmazza. Kifejezetten az 1990-es években fejlesztették ki, hogy lehetővé tegye a funkcionális élelmiszerek megkülönböztetését a gyógyszerektől. Ezzel összefüggésben utalni kívánunk az Európai Parlament és a Tanács 1997. január 27-i 258/97/EK rendeletére az új élelmiszerekről és az új élelmiszer-összetevőkről, valamint a tápanyag-összetételre és egészségre vonatkozó állításokról szóló 1924/2006. élelmiszerekhez. A VHH-fragmensek hatékonyságát a rotavírus-hasmenés kialakulásának kockázatának csökkentésében, ha élelmiszer formájában adják, egy további vizsgálatban fogják tesztelni. A VHH-antitest-fragmens alkalmazásának biztonságossága A VHH-antitest-fragmens orális alkalmazásának biztonságosságát két, az Egyesült Államokban elvégzett vizsgálat igazolta. Hollandia és Banglades, beleértve a felnőtteket és a 6 hónaposnál idősebb gyermekeket.

Összehasonlítás:

Összehasonlítjuk a VHH antitest-fragmens placebo elleni hatásával az ICDDR,B kórházba került, bizonyítottan rotavírusos hasmenésben szenvedő gyermekeknél. Ez a beavatkozás felülmúlja a szokásos kezelést, beleértve az orális rehidratáló kezelést is.