Protilátka proti lamám, rotavirový průjem, děti

Stručný souhrn Studie zkoumající účinnost orálního podávání fragmentu protilátky VHH odvozeného z protilátek nalezených v mléce lam a velbloudů prostřednictvím prototypového potravinářského produktu při snižování závažnosti rotavirového průjmu u dětí.

Detailní popis

Úvod Rotavirus je přední virový enteropatogen, který je celosvětově zodpovědný za 11–71 % všech průjmových epizod u kojenců a dětí. V rozvojových zemích je rotavirus každoročně spojován s více než 125 miliony epizod průjmu (Cook et al. 1990), což vede k odhadovaným 600 000 úmrtím. Je zodpovědný za 60 % všech průjmových epizod, 20–60 % hospitalizací s průjmem a 20 % úmrtí souvisejících s průjmem u dětí mladších 5 let (Perez-Schael et al. 1997). Jen ve Spojených státech amerických je rotavirus spojen s 3 % všech hospitalizací dětí mladších 5 let s lékařskými a nepřímými náklady přesahujícími 1 miliardu USD ročně (Glass et al. 1991). V mnoha lokalitách přetrvávají úmrtí na rotavirové infekce navzdory národním programům na podporu používání perorální rehydratační terapie.

Současná léčba rotavirové gastroenteritidy Současná léčba rotavirového průjmu zahrnuje prevenci dehydratace nebo léčbu dehydratace pomocí orální nebo intravenózní rehydratace, podle potřeby, a pokračující krmení. Je podporováno včasné obnovení normálního krmení, aby se zlepšila obnova sliznice a minimalizovaly se nutriční důsledky infekce. Děti z rozvojových zemí by mohly mít prospěch ze suplementace zinkem, ale v případě rotavirového průjmu se o jeho způsobu dodání a nákladové efektivitě teprve rozhodne. V současné době není k dispozici žádná specifická léčba, která by zkrátila trvání nebo závažnost tohoto onemocnění. Proto je rotaviry vyvolaný průjem, který je považován za samoomezující onemocnění, zodpovědný za významná dětská úmrtí v rozvojových zemích (Glass et al. 1996).

Aktivní imunizace proti rotavirové infekci Vývoj, testování a případné použití účinné, bezpečné a levné rotavirové vakcíny by bylo nejúčinnější metodou prevence závažných onemocnění a úmrtí v rozvojových zemích. Bylo dosaženo rychlého pokroku a bylo vyvinuto a testováno několik kandidátských vakcín proti rotavirům. Dvě rotavirové vakcíny, Rotarix (GlaxoSmithKline Biologicals, Belgie) a RotaTeq (Merck & Co., USA), nedávno vstoupily na trh ve vyspělém světě. Obě vakcíny se zdají být bezpečné s ohledem na intususcepci a jsou vysoce účinné v prevenci závažné gastroenteritidy způsobené rotavirovými kmeny nesoucími převážně sérotyp G1 (Cunliffe & Nakagomi 2005). Potvrzení bezpečnosti a účinnosti obou vakcín v rozvojových zemích je stále potřeba. Navíc posouzení schopnosti každé vakcíny poskytnout ochranu proti stále rozmanitější populaci rotavirových kmenů bude záviset na nepřetržitém sledování kmene a vývoji novějších vakcín, protože novější sérotypy převládají v různých geografických lokalitách, což nemusí být pro rozvojové země snadné. . Existuje tedy jasná potřeba definovat zlepšené, nákladově efektivní intervence v léčbě rotavirového průjmu, dokud nebude dostupná účinná, bezpečná a levná vakcína, dostupná pro rozvojové země.

Pasivní imunizace proti průjmu vyvolanému rotaviry; Existují dobré důvody pro hypotézu, že pasivní imunizace by mohla být užitečná při léčbě lidského rotavirového průjmu. Bylo například zjištěno, že orální podávání protilátek neutralizujících rotavirus moduluje průjem vyvolaný rotaviry u dětí. Prospěšné profylaktické (Barnes et al. 1982) a terapeutické účinky (Guarino et al. 1991), pokud jde o zkrácení doby trvání a závažnosti rotavirového průjmu, byly také pozorovány ve spojení s perorálně podávanými lidskými IgG přípravky. Použití preparátu lidské protilátky je však omezené kvůli riziku virové kontaminace a vysokým nákladům na výrobu a dodavatelský řetězec takového produktu (produktů) a velmi nízké biologické dostupnosti.

Alternativní zdroj protilátek, bezpečný a snadno vyrobitelný, byl později vyvinut v hyperimunizovaných bovinních kolostrech vakcinací březích krav proti lidským kmenům rotavirů. Tento přístup byl také účinně použit pro profylaktické (Davidsson et al. 1989) a terapeutické výhody (Mitra et al. 1995, Sarker et al. 1998) u rotavirového průjmu u hospitalizovaných dětí. V nedávno ukončené studii u dětí s rotavirovým průjmem v Bangladéši jsme pozorovali mírný přínos perorálního podávání imunoglobulinu extrahovaného z kuřecích vajec imunizovaných lidskými kmeny rotaviru (Sarker et al. 2001).

Pasivní imunizace pro prevenci nebo léčbu střevních infekcí obecně vyžaduje relativně velká množství protilátek, zejména v místech sliznic, kde jsou protilátky rychle odstraněny. Proto se tyto způsoby, ačkoli se prokázaly jako účinné, stávají drahými kvůli požadavku na větší dávky protilátek. Další omezení konvenčních IgG protilátek zahrnují jejich špatnou stabilitu a komplexní povahu, která omezuje jejich produkci ve velkém měřítku. Slibné řešení těchto problémů ve velkovýrobě protilátek přišlo poměrně nečekaně od přírody samotné – velbloudi a lamy mají neobvyklý typ IgG protilátek (IgG2 a IgG3), které postrádají lehké řetězce – protilátky „těžkého řetězce“. .

Selekce fragmentů protilátek s těžkým řetězcem U lamy a velblouda existují IgG protilátky s "těžkým řetězcem" společně s "konvenčním" IgG (IgG1) (Hamers-Casterman et al. 1993). Na rozdíl od konvenčních protilátek, protilátky těžkého řetězce postrádají lehké řetězce. Vazebná doména protilátek těžkého řetězce se tedy skládá pouze z variabilní domény těžkého řetězce (VHH) na rozdíl od vazebné domény konvenčních protilátek, která se skládá z variabilní domény těžkého řetězce (VH) a jedné z lehký řetězec (VL). Biochemické vlastnosti fragmentů VHH protilátek lamy jsou lepší než Fv fragmenty (VH + VL) konvenčních IgG protilátek. Ačkoli fragmenty protilátek VHH mají jednoduchou strukturu vázající antigen pouze s jednou doménou, mají vysokou afinitu a jsou extrémně termostabilní (van der Linden et al., 1999). Kromě toho jsou dobře exprimovány a vylučovány pekařskými kvasinkami Saccharomyces cerevisiae, což umožňuje produkci ve velkém měřítku, která je nákladově efektivní (Frenken et al., 2000). Tento proces učiní fragmenty VHH dostupnou složkou pro potravinářské výrobky a rozšíří jejich dostupnost pro širokou populaci rozvojových zemí.

VHH jako potenciální složka potravy Mnoho lidí v afrických/arabských zemích pravidelně konzumuje velbloudí mléko. V roce 1992 bylo pozorováno, že velbloudí mléko obsahuje vysoké titry protilátek proti rotavirům (el Agamy et al 1992). Fragment protilátky ve VHH šarži 203027 je fragmentem těch protilátek, o kterých se předpokládá, že jsou přítomny v velbloudím/lamím mléce. Zkoumaný produkt tak může být klasifikován jako potravinová složka Od svého počátku v roce 1999 bylo cílem projektu Unilever „VHH“ vyvinout dostupnou potravinu pro rozvojové země, která „může pomoci snížit riziko rotavirových infekcí“. Tento typ tvrzení velmi dobře zapadá do definic předložených Evropskou unií sponzorované společné akce pro vědu o funkčních potravinách v Evropě (FUFOSE) (Diplock et al 1999). Terminologie FUFOSE pro tvrzení o „vylepšené funkci“ (typ A) a „snížení rizika onemocnění“ (typ B) jsou nyní široce přizpůsobeny mnoha národními a mezinárodními kodexy praxe, včetně Codex Alimentarius. Byl speciálně vyvinut v 90. letech minulého století, aby umožnil oddělit funkční potraviny od léků. V této souvislosti bychom také rádi odkázali na nařízení Evropského parlamentu a Rady ES č. 258/97 ze dne 27. ledna 1997 o nových potravinách a nových složkách potravin a nařízení EU 1924/2006 o výživových a zdravotních tvrzeních. pro potraviny. Účinnost fragmentů VHH při snižování rizika rozvoje rotavirového průjmu při dodání v potravinovém formátu bude testována v dodatečné studii Bezpečnost aplikace fragmentu protilátky VHH Bezpečnost perorální aplikace fragmentu protilátky VHH byla prokázána ve dvou studiích provedených v Nizozemsko a Bangladéš, včetně dospělých a dětí starších 6 měsíců.

Srovnání:

Porovnáme s efektem fragmentu VHH protilátky proti placebu u dětí s prokázaným rotavirovým průjmem hospitalizovaných na MKNDR,B. Tato intervence bude nad rámec standardní léčby, včetně orální rehydratační léčby.